Name: Model osteogenezy rozpraszającej uwagę myszy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-14T12:45:00.000+00:00
Duration: 4 min 24 s
Description: Poznaj model osteogenezy rozpraszającej uwagę myszy z wykorzystaniem niestandardowego dystraktora. Ta metoda umożliwia szczegółową analizę regeneracji kości i tkanek miękkich u myszy.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy dziękują Pani Makiko Kato za zachętę do ukończenia tego badania. Dziękujemy również Wydziałowi Zwierząt Doświadczalnych i Inżynierii Badań Medycznych Wyższej Szkoły Medycznej Uniwersytetu Nagoya za zakwaterowanie myszy.

Wszystkie eksperymenty zostały przeprowadzone zgodnie z protokołami zatwierdzonymi przez Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami i Użytkowania naszej instytucji. Wysterylizuj wszystkie narzędzia przed zabiegiem.
1. Przygotowanie formy do stworzenia dystraktora na zamówienie
<ol>
	<li>Wykonaj dwa niekompletne pierścienie (średnica zewnętrzna, 20 mm; średnica wewnętrzna, 10 mm), które są częścią dystraktora, z jednym arkuszem wosku parafinowego (145 mm x 74 mm) za pomocą rzeźbiarki Evans.
	<ol>
		<li>Zrób 4 takie same kawałki. Użyj szpatułki do wosku podgrzanej palnikiem gazowym. Ułóż cztery pierścienie w stos na grubość 5 mm. Zapewnij miejsce na rozporową i igłę, odpowiednio 8 mm x 2 mm i 5 mm x 2 mm za pomocą rzeźbiarki do wosku Evans (rysunki 1A, 1B).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Osadź wzory wosku w silikonowym materiale wyciskowym i utwórz formę dla pierścieni z żywicy (<silna klasa="xfig">Rysunek 1C).</li>
	<li>Po utwardzeniu silikonowego materiału wyciskowego (około 5 minut w temperaturze pokojowej) należy usunąć wzory wosku.</li>
</ol>
2. Produkcja dystraktora na zamówienie
<ol>
	<li>Nałóż wazelinę cienko i równomiernie na silikonową formę. Wymieszaj 3 g polimeryzacyjnej żywicy dentystycznej i natychmiast wlej ją do silikonowej formy. Ustaw na 5 minut w temperaturze pokojowej (RT).</li>
	<li>Wyjmij pierścień z żywicy spolimeryzowanej z formy i wypoleruj go za pomocą pręta z węglika spiekanego i mikrosilnika dentystycznego, aby usunąć zadziory (około 1 min). Do każdego dystraktora wykonanego na zamówienie wymagane są dwa pierścienie żywiczne.
	<ol>
		<li>Powtórz procedurę, aby utworzyć wymaganą liczbę pierścieni z żywicy (<silna klasa="xfig">Rysunek 1D).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Pozostaw odstęp około 2 mm, aby przymocować pierścienie żywiczne woskiem użytkowym i całkowicie zabezpiecz zewnętrzną część rozporowej przezroczystą żywicą. Ustaw żywicę na 5 minut w temperaturze RT. Po zakończeniu polimeryzacji wyjmij pokrętło rozporowej (<silna klasa="xfig">Rysunek 1E).</li>
</ol>
3. Protokół chirurgiczny
<ol>
	<li>Użyj 8 tygodniowych samców myszy.</li>
	<li>Znieczulenie należy wywołać wstrzyknięciem dootrzewnowym chlorowodorku medetomidyny w dawce 0,3 mg/g, midazolamu w dawce 4 mg/kg mc. i winianu butorfanolu w dawce 5 mg/kg masy ciała.
	<ol>
		<li>Ostrożnie ogolić i zdezynfekować obszar operacyjny 10% roztworem jodu, a następnie podać 0,5% chlorowodorek lidokainy na prawą kończynę dolną.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Wykonaj podłużne nacięcie skóry (o długości około 15 mm) w prawym podudziu za pomocą skalpela nr 15. Dosadnie oddziel leżące poniżej mięśnie, uważając, aby nie usunąć całej okostnej. Podejdź od zewnątrz, aby łatwo dotrzeć do kości strzałkowej. Przetnij kość strzałkową nożyczkami.</li>
	<li>Chwyć kostkę wąskimi, cienkimi, sterylnymi kleszczami i za pomocą sterylnej igły 27 G wykonaj otwór w kości około 5 mm od pięty. Igła powinna wnikać w skórę, kość i skórę w tej kolejności. Gdy igła wbije się w głąb, odetnij końcówkę i korzeń szczypcami tak, aby igła miała około 15 mm.
	<ol>
		<li>Wykonaj kolejny otwór w ten sam sposób, około 2–3 mm proksymalnie. Przytrzymaj wokół kostki i w ten sam sposób przełóż dwie igły 25 G pod kolanem. Po wbiciu igieł odetnij końcówki i korzenie szczypcami (<silna klasa="xfig">Rysunek 1F).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Umieść wykonany na zamówienie dystraktor tak, aby był równoległy do kierunku wysuwania. Przymocuj igły i urządzenie za pomocą wystarczającej ilości żywicy dentystycznej do polimeryzacji, aby wypełnić rowki urządzenia. Poczekaj na zakończenie polimeryzacji (około 5 minut) (<silna klasa="xfig">Rysunek 1G).</li>
	<li>Uważaj, aby nie uszkodzić otaczających tkanek. Przeciąć środek trzonu kości piszczelowej za pomocą bardzo cienkiej tarczy tnącej, nakładając roztwór soli fizjologicznej (1–2 ml).</li>
	<li>Zamknij ranę nylonowym szwem 4-0.</li>
	<li>Natychmiast po operacji należy podać podskórnie wstrzyknięcia buprenorfiny (0,1 mg/kg) w celu znieczulenia. Buprenorfinę należy kontynuować co 12 godzin do 7. dnia po operacji i w razie potrzeby.</li>
</ol>
4. Protokół rozproszenia uwagi
UWAGA: Istnieją różne raporty na temat okresu opóźnienia i wskaźnika rozproszenia, ale tutaj pokazane są reprezentatywne protokoły.
<ol>
	<li>Po upływie 5 dni opóźnienia rozpocznij rozpraszanie uwagi z szybkością 0,2 mm/12 godzin. Do przedłużenia użyj kołka dołączonego do szybkozłącznej. Przesuń kołek w kierunku żółtej strzałki przymocowanej do przedłużającej (<silna klasa="xfig">Rysunek 1E).</li>
	<li>Znieczulenie nie jest konieczne podczas przedłużania. Przytrzymaj ogon małym palcem i dłonią, a następnie zamocuj urządzenie przedłużające palcem wskazującym i kciukiem.</li>
	<li>Wykonaj wysunięcie (0,2 mm na 1/4 obrotu). Kontynuuj wydłużanie przez 8 dni, co spowoduje, że całkowita przerwa wyniesie 3,2 mm.</li>
</ol>
5. Analiza
<ol>
	<li>Analiza radiograficzna: Po zakończeniu przedłużania oceń regenerację kości za pomocą tomografii komputerowej w znieczuleniu ogólnym, stosując 2,0% izofluranu. 
	UWAGA: Jeśli zwrócono uwagę na położenie urządzenia przedłużającego, możliwa jest jego ocena za pomocą prostej radiografii nawet z założonym urządzeniem.</li>
	<li>Analiza histologiczna: Ostrożnie wyjąć aparat, aby nie spowodować rozproszenia uwagi złamań podczas pobierania próbek. Utrwalić próbkę w 10% neutralnej buforowanej formalinie na 24 godziny w temperaturze pokojowej. Odwapnić roztworem Morse'a (10% cytrynian sodu, 20% kwas mrówkowy) przez noc w temperaturze 4 °C.</li>
</ol>

<ol><li>Watson, J. T. <a target="_blank" href="https://journals.lww.com/jaaos/Fulltext/2006/00001/Distraction_Osteogenesis.37.aspx">Distraction osteogenesis.</a> The Journal of the American Academy of Orthopaedic Surgeons. 14, 168-174 (2006).</li>
<li>Ilizarov, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+tension-stress+effect+on+the+genesis+and+growth+of+tissues%3A+Part+II.+The+influence+of+the+rate+and+frequency+of+distraction%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Orthopaedics+and+Related+Research%22%5BJournal%5D)">The tension-stress effect on the genesis and growth of tissues: Part II. The influence of the rate and frequency of distraction.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 239, 263-285 (1989).</li>
<li>Wan, C., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18184809">Activation of the hypoxia-inducible factor-1 alpha pathway accelerates bone regeneration.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (2), 686-691 (2008).</li>
<li>Fujio, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stromal+cell-derived+factor-1+enhances+distraction+osteogenesis-mediated+skeletal+tissue+regeneration+through+the+recruitment+of+endothelial+precursors%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Stromal cell-derived factor-1 enhances distraction osteogenesis-mediated skeletal tissue regeneration through the recruitment of endothelial precursors.</a> Bone. 49 (4), 693-700 (2011).</li>
<li>Tong, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+adhesion+kinase+expression+during+mandibular+distraction+osteogenesis%3A+evidence+for+mechanotransduction%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+reconstructive+surgery%22%5BJournal%5D)">Focal adhesion kinase expression during mandibular distraction osteogenesis: evidence for mechanotransduction.</a> Plastic and reconstructive surgery. 111 (1), 211-222 (2003).</li>
<li>Rhee, S. T., El-Bassiony, L., Buchman, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+signal-+related+kinase+and+bone+morphogenetic+protein+expression+during+distraction+osteogenesis+of+the+mandible%3A+in+vivo+evidence+of+mechanotransduction+mechanism+for+differentiation+and+osteogenesis+by+mesenchymal+precursor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+reconstructive+surgery%22%5BJournal%5D)">Extracellular signal- related kinase and bone morphogenetic protein expression during distraction osteogenesis of the mandible: in vivo evidence of mechanotransduction mechanism for differentiation and osteogenesis by mesenchymal precursor cells.</a> Plastic and reconstructive surgery. 117 (7), 2243-2249 (2006).</li>
<li>Isefuku, S., Joyner, C. J., Simpson, A. H. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11062353">A murine model of distraction osteogenesis.</a> Bone. 27 (5), 661-665 (2000).</li>
<li>Tay, B. K., Le, A. X., Gould, S. E., Helms, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histochemical+and+molecular+analyses+of+distraction+osteogenesis+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Histochemical and molecular analyses of distraction osteogenesis in a mouse model.</a> Journal of Orthopaedic Research. 16 (5), 636-642 (1998).</li>
<li>Carvalho, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+angiogenesis+in+a+murine+tibial+model+of+distraction+osteogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">The role of angiogenesis in a murine tibial model of distraction osteogenesis.</a> Bone. 34 (5), 849-861 (2004).</li>
<li>Osawa, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activated+FGFR3+promotes+bone+formation+via+accelerating+endochondral+ossification+in+mouse+model+of+distraction+osteogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Activated FGFR3 promotes bone formation via accelerating endochondral ossification in mouse model of distraction osteogenesis.</a> Bone. 105, 42-49 (2017).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Gdy duże zwierzę jest używane jako model eksperymentalny, można użyć gotowego urządzenia przedłużającego i łatwo jest uzyskać dobre utrwalenie i ocenić samą operację wyprostowania oraz wielkość wyprostu. Jednak, gdy mysz jest używana jako model eksperymentalny, konieczne jest opracowanie części lub całości sprzętu. Isefuku i wsp. oraz Tay i wsp. wykonali urządzenie i stworzyli model myszy 7,8. Carvahjo i wsp. przyjęli metodę polegającą ...

Osteogeneza rozproszenia (DO) jest uznaną metodą leczenia różnych zaburzeń szkieletowych, takich jak rozbieżności w długości kończyn, wady kostne i deformacje kończyn1. Ta unikalna strategia leczenia opiera się na "zasadzie napięcia-stresu" zaproponowanej przez Ilizarowa. Metoda wymaga kilku dni na opóźnienie, kilku tygodni na aktywne rozproszenie i kilka miesięcy na konsolidację, aż dojrzała kość zostanie uformowana2.
Miejscowe niedotlenienie spowodowane zablokowaniem przepływu krwi3,4 i stymulacja mechaniczna5,6 są szczególnie ważne w procesie gojenia DO. Angiogeneza wywołana niedotlenieniem przenosi tlen, składniki odżywcze, czynniki rozpuszczalne i komórki niezbędne do naprawy tkanek lokalnie poprzez przepływ krwi. Stymulacja mechaniczna przez operację przedłużającą powoduje reakcje biologiczne, takie jak różnicowanie mezenchymalnych komórek macierzystych, tworzenie kości, zwapnienie i przebudowę. Seryjne leczenie DO pozwala na tworzenie nie tylko tkanek twardych, ale także tkanek miękkich, w tym nerwów, mięśni, naczyń krwionośnych i tkanek skóry, bez konieczności przeszczepu komórek macierzystych. Dlatego model DO jest uważany za doskonały model do analizy regeneracji różnych tkanek.
Króliki i psy są najczęściej wykorzystywanymi zwierzętami w podstawowych badaniach dla DO; jednak dostępnych jest niewiele narzędzi analitycznych dla tych zwierząt. Wykorzystanie mysiego modelu DO ułatwia bardziej szczegółową analizę. Szczególnie nadaje się do eksperymentów z wykorzystaniem myszy z nokautem. Jednak w przypadku używania myszy jako zwierzęcia doświadczalnego należy stworzyć urządzenie przedłużające. Tutaj prezentujemy model DO piszczelowej myszy opracowany przy użyciu niestandardowego dystraktora stworzonego przy użyciu narzędzia i techniki laboratorium dentystycznego, która została wykorzystana w poprzednim badaniu.

<table><tbody><tr><td>Wosk parafinowy</td><td>YAMAHACHI DENTAL MFG. CO.</td><td>-</td><td>Do przygotowania formy do pierścieni żywicznych</td></tr><tr><td>Labocone putty</td><td>GC</td> <td>Corporation-Do</td> <td>przygotowania formy do pierścieni żywicznych</td></tr><tr><td>Wosk użytkowy</td><td>GC</td> <td>Corporation-Do</td> <td>przygotowania formy do pierścieni żywicznych</td></tr><tr><td>Śruba rozporowa</td><td>Ortho Dentaurum</td><td>600-301-30</td><td>Element dystraktora</td></tr><tr><td>na zamówienie Unifast III</td><td>GC Corporation</td><td>-</td><td>Żywica do natychmiastowej polimeryzacji Składnik dystraktora</td></tr><tr><td>na zamówienie Ortho Crystal</td><td>NISSIN-Przezroczysta</td><td></td> <td>żywica Składnik dystraktora na zamówienie</td></tr><tr><td>Igła 25 G</td><td>TERUMO</td><td>NN-2516R</td><td>Do dystraktora na zamówienie</td></tr><tr><td>Igła 27 G</td><td>TERUMO</td><td>NN-2719S</td><td>Do mysz ICR dystraktora na zamówienie</td></tr><tr><td></td><td>Chubu Kagaku Shizai Corporation-Experimental</td><td></td><td> zwierzę</td></tr><tr><td>Somnopentyl</td><td>Kyoritsu Seiyaku-sól</td><td></td> <td>sodowa pentopirbitalu</td></tr><tr><td>Izofluran</td><td>FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation</td><td>099-06571</td><td>Izofluran roztwór do inhalacji</td></tr></tbody></table>

model osteogenezy rozpraszającej uwagę myszy

A Mouse Distraction Osteogenesis Model

Osteogeneza rozproszenia (DO) to zabieg chirurgiczny, który polega na regeneracji tkanki szkieletowej bez przeszczepu komórek. Model DO składa się z następujących trzech faz: fazy utajenia po osteotomii i umiejscowienia dystraktora zewnętrznego; faza rozproszenia, w której oddzielone końce kości są stopniowo i w sposób ciągły rozpraszane; oraz etap konsolidacji. Ten wykonany na zamówienie dystraktor używany do DO składa się z dwóch niekompletnych pierścieni z żywicy akrylowej i rozporowej. Proces został zainicjowany od wykonania formy z silikonowego materiału wyciskowego, a następnie stworzenia dystraktora na zamówienie. Żywicę dentystyczną wlano do szalunku wykonanego z silikonowego materiału wyciskowego i dopuszczono do polimeryzacji w celu wytworzenia niekompletnych pierścieni żywicznych wymaganych dla dystraktora wykonanego na zamówienie. Pierścienie te zostały przymocowane za pomocą rozporowej za pomocą przezroczystej żywicy. Wykonany na zamówienie dystraktor stworzony w ten sposób został przymocowany do kości piszczelowej myszy. Piszczel została przymocowana do urządzenia za pomocą jednej pary igieł 25 G proksymalnie, jednej pary igieł 27 G dystalnie i żywicy akrylowej. Po okresie opóźnienia wynoszącym 5 dni rozproszenie uwagi zostało zainicjowane z szybkością 0,2 mm/12 h. Wydłużanie kontynuowano przez 8 dni, w wyniku czego uzyskano łączną przerwę wynoszącą 3,2 mm. Myszy zostały złożone w ofierze 4 tygodnie po odwróceniu uwagi. Tworzenie się kości w szczelinie dywersyjnej potwierdzono zarówno za pomocą radiografii, jak i histologii.

Rysunki 1A i 1B przedstawiają niepełne pierścienie (średnica zewnętrzna 20 mm; średnica wewnętrzna 10 mm; grubość 5 mm) z wosku parafiny. Dwa wzorce woskowe odciśnięto w silikonowym materiale do wycisków, tworząc formę dla pierścieni żywicznych (Rysunek 1C). Spolimeryzowaną żywicę wlano natychmiast do tej formy, otrzymując pierścienie żywiczne (Rysunek 1D). Dystr...

Prezentujemy model osteogenezy rozproszenia kości piszczelowej myszy opracowany przy użyciu specjalnie wykonanego dystraktora. Wykorzystanie myszy jako celu analizy jest korzystne dla postępu badań.

Model osteogenezy rozpraszającej uwagę myszy

Distraction osteogenesis (DO) is a surgical procedure that involves skeletal tissue regeneration without cell transplantation. A DO model consists of the ...

Ta metoda może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie regeneracji tkanek twardych i miękkich. Główną zaletą tej techniki jest to, że użycie myszki pozwala na szczegółową analizę regeneracji kości. Zacznij od w pełni znieczulonej myszy dorosłej.Ostrożnie ogolić i zdezynfekować obszar operacyjny 10% roztworem jodu. Następnie podaj 0,5% chlorowodorek lidokainy na prawą kończynę dolną. Następnie, po wykonaniu 15-milimetrowego podłużnego nacięcia skóry w prawym podudziu skalpelem numer 15, tępo oddziel leżące pod spodem mięśnie, uważając, aby nie usunąć całej okostnej.Następnie przetnij kość strzałkową nożyczkami. Chwyć kostkę wąskimi, cienkimi kleszczami i użyj igły o rozmiarze 27, aby zrobić dziurę w kości, około pięciu milimetrów od pięty. Igła powinna wnikać w skórę, kość i skórę w tej kolejności.Gdy igła całkowicie wbije się w głąb, odetnij końcówkę i korzeń szczypcami tak, aby igła miała około 15 milimetrów. Zrób kolejny otwór w ten sam sposób, około dwóch do trzech milimetrów proksymalnie. Następnie przytrzymaj wokół kostki i w ten sam sposób przełóż igłę o rozmiarze 25 pod kolanem.Po wbiciu igły odetnij końcówkę i korzeń szczypcami. Zrób kolejny otwór w ten sam sposób, około dwóch do trzech milimetrów dystalnie. Umieść wykonany na zamówienie dystraktor tak, aby był równoległy do kierunku wysuwania.Przymocuj igły i urządzenie za pomocą wystarczającej ilości żywicy dentystycznej do polimeryzacji, aby wypełnić rowki urządzenia. Poczekaj na zakończenie polimeryzacji, co powinno zająć około pięciu minut. Następnie, bardzo uważając, aby nie uszkodzić otaczających tkanek, przeciąć środek trzonu kości piszczelowej za pomocą bardzo cienkiej tarczy tnącej, nakładając roztwór soli fizjologicznej.Zamknij ranę nylonowym szwem 4-0. Natychmiast po zabiegu należy wykonać podskórne wstrzyknięcia buprenorfiny w celu znieczulenia. Istnieją różne raporty dotyczące okresu opóźnienia i wskaźnika rozproszenia, ale tutaj pokazane są reprezentatywne protokoły.Po upływie pięciu dni opóźnienia rozpocznij procedurę odwrócenia uwagi. Do przedłużenia użyj kołka dołączonego do szybkozłącznej. Przesuń kołek w kierunku żółtej strzałki przymocowanej do przedłużającej.Przytrzymaj ogon małym palcem i dłonią, a następnie zamocuj urządzenie przedłużające palcem wskazującym i kciukiem. Wykonaj wyprost, przesuwając kołek w kierunku żółtej strzałki o 0,2 milimetra o ćwierć obrotu. Kontynuuj wydłużanie w tempie 0,2 milimetra co 12 godzin przez osiem dni, co spowoduje całkowitą przerwę 3,2 milimetra.To zdjęcie pokazuje typowe wyniki radiograficzne po czterech tygodniach od rozproszenia w modelu. Nowo utworzona kość jest widoczna w miejscu rozproszenia. Wyniki barwienia hematoksyliną i eozyną można zobaczyć tutaj.Zaobserwowano nowo powstały most kostny, a nowo powstałą kość można było łatwo odróżnić od kości rodzimej. Zaprezentowaliśmy model DO piszczelowej myszy opracowany przy użyciu specjalnie wykonanego dystraktora. Wykorzystanie mysiego modelu DO ułatwia bardziej szczegółową analizę.Szczególnie nadaje się do eksperymentów z wykorzystaniem myszy z nokautem.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Biologia rozwojowa

Niniejszy artykuł opisuje metodę stabilizacji złamań kości długich opartą na zastosowaniu zmodyfikowanych zewnętrznych stabilizatorów Ilizarova 1-3. Po zastosowaniu stabilizatorów i wywołaniu urazu kostnego można oceniać proces gojenia, przeprowadzać osteogenezę dystrakcyjną lub tworzyć staw rzekomy bądź defekt o rozmiarze krytycznym w celu badania interwencji terapeutycznych.

Tworzenie sztywno stabilizowanych złamań do oceny kostnienia błonowego, osteogenezy dystrakcyjnej lub gojenia ubytków o rozmiarze krytycznym

Modele zwierzęce są często wykorzystywane do naśladowania poważnych uszkodzeń kości w badaniach biomedycznych. Ze względu na ich niewielkie rozmiary, ustalenie ustabilizowanych zmian kostnych u myszy wykracza poza możliwości większości grup badawczych. W tym artykule opisujemy prostą metodę ustalania i analizowania eksperymentalnych wad kości udowej u myszy.

Prosty model ubytku kości udowej o krytycznej wielkości u myszy

Chociaż modele mysie są nieocenionymi narzędziami do inżynierii tkanki kostnej, modele długich wad kostnych są rzadkie. Ta potrzeba zmotywowała do opracowania obecnego protokołu, który wykorzystuje płytkę blokującą z czterema i dedykowanym przyrządem do wykonania i ustabilizowania powtarzalnego ubytku udowego o krytycznej wielkości przy niskiej zachorowalności.

Ustalenie segmentalnego modelu ubytku krytycznej wielkości kości udowej u myszy stabilizowanych przez osteosyntezę płytkową

To badanie opisuje powtarzalny i szczegółowy protokół wykorzystujący nowo opracowany zewnętrzny stabilizator do osteogenezy dywersyjnej (DO) w modelu szczura kości udowej, który pozwala na fizjologiczne obciążanie zwierzęcia po usunięciu zewnętrznego stabilizatora.

Skuteczny i powtarzalny protokół osteogenezy dyfuzyjnej w modelu szczurzym prowadzący do funkcjonalnej regeneracji kości udowej

Ten protokół opisuje mysi model chirurgii ortopedycznej, który był używany do badania mechanizmów pooperacyjnego zapalenia nerwów i zmian w zachowaniu, a w połączeniu z parabiozą, do badania regeneracji tkanek podczas starzenia.

Mysi model chirurgii ortopedycznej do badania pooperacyjnych dysfunkcji poznawczych i regeneracji tkanek

Ten protokół opisuje minimalnie inwazyjną technikę osteosyntezy wykorzystującą śródszpikową do standaryzowanej stabilizacji złamań kości udowej, która może być wykorzystana do analizy endochrzęstnego gojenia kości u myszy.

Minimalnie inwazyjny model do analizy gojenia złamań śródchrzęstnych u myszy w standaryzowanych warunkach biomechanicznych

Tutaj prezentujemy protokół jatrogennego złamania trzonu kości udowej szczurów albinosów Wistar i śledzenia rozwoju modzela. Ten model osteotomii kości udowej może pomóc naukowcom ocenić proces gojenia się złamań i zbadać, w jaki sposób lek może wpływać na gojenie złamań.

Protokół opracowania modelu osteotomii kości udowej u szczurów albinosów Wistar

Ten protokół opisuje procedurę chirurgiczną mającą na celu wykrycie złamania trzonu w kości udowej myszy, która jest stabilizowana drutem śródszpikowym, do badań nad gojeniem złamań.

Ustalenie modelu złamania kości udowej trzonu u myszy

Ten protokół przedstawia ustandaryzowany model myszy do rozszerzania szwów oraz metodę wizualizacji 3D do badania mechanobiologicznych zmian szwu i przebudowy kości pod wpływem siły rozciągającej.

Technika wizualizacji 3D do przebudowy kości w mysim modelu rozszerzania szwów

Ten protokół przedstawia ekonomiczną i efektywną metodę ilościowej oceny mikroarchitektury kości w mysim modelu osteoporozy poprzez połączenie barwienia Hematoxylin-Eosin (HE) i technik mikrotomografii komputerowej (Micro-CT).

Ocena mikroarchitektury kości beleczkowej w mysim modelu osteoporozy

Ten protokół przedstawia kompleksową i efektywną metodę analizy naprawy kości żuchwy. Opisujemy powtarzalną technikę nieustabilizowanego złamania żuchwy w modelu mysim, pozwalającą na analizę procesu naprawy kości śródchrzęstnej przy minimalnym uszkodzeniu tkanek i ubytku kości.

Mniej inwazyjna technika niestabilizowanego złamania żuchwy w modelach mysich

Poznaj model osteogenezy rozpraszającej uwagę myszy z wykorzystaniem niestandardowego dystraktora. Ta metoda umożliwia szczegółową analizę regeneracji kości i tkanek miękkich u myszy.

Model osteogenezy rozpraszającej uwagę myszy

Przeglądaj więcej filmów