Tomografia fotoacústica para imageamento de sangue e lipídios na aorta infrarrenal

O procedimento a seguir descreve os métodos necessários para configurar o VPAT para imagens de sangue e lipídios da aorta infrarenal em camundongos deficientes de apolipoprotein-E (apoE^-/-).

1. Acoplamento laser-ultrassom

1. Obtenha um laser oscilador óptico Nd:YAG pulsado e um sistema de ultrassom. Adquira um gerador de pulso, um cabo BNC e um conector D ligado a dois cabos BNC.
2. Usando a configuração do conector D, conecte o cabo BNC 'Fogo' à porta A do gerador de pulso e 'Q-switch' à porta B do gerador de pulso. Por fim, conecte um cabo BNC da porta C para 'acionar' na parte de trás do sistema de ultrassom.
3. Alinhe o cabo de fibra óptica com o laser e conecte as extremidades de fibra às laterais do transdutor de ultrassom de 40 MHz.
4. Ajuste o atraso das portas A, B e C aos valores listados aqui (Porta A: 0,00000000000000, Porta B: 0.00021440, Porta C: 0.00000910). Defina as portas A e B para o sinal invertido e a porta C ao sinal normal.

2. Preparação animal e Aquisição de Imagens

1. Anestesiar um apoE^-/- mouse usando 3% de isoflurano em uma câmara de indução de anestesia. Uma vez que o animal é anestesiado mova o rato para um cone de nariz para entregar 1-2% de isoflurane.
2. Aplique lubrificação ocular nos olhos dos animais para evitar a dessacação da córnea. Grave as patas do rato em eletrodos embutidos no estágio aquecido para monitorar a respiração e a frequência cardíaca do animal. Por fim, insira sonda retal para monitorar a temperatura corporal.
3. Aplique creme depilatório para remover o cabelo do abdômen do animal. Limpe depois dos 30 s com uma gaze.
4. Coloque o transdutor de ultrassom no abdômen do animal e localize a aorta infrarenal. A veia renal esquerda e a trifurcação aórtica na artéria traseira são dois marcos que ajudarão o usuário a localizar esta área.
5. Execute o laser para a saída de luz de 1100 nm para atingir o sangue seguido de luz de 1210 nm para atingir o lipídio. Use óculos de segurança a laser apropriados quando o laser estiver em uso.