Name: Constrição aórtica transversais em ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-04-21T18:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 25 s
Description: Aprenda a técnica de constrição aórtica transversal em camundongos para induzir hipertrofia cardíaca e insuficiência cardíaca. Este método padronizado permite estudar mecanismos moleculares da remodelação cardíaca com taxa de sobrevivência de 80-90%.

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XHTW é um WM Keck Foundation Scholar Distinguished Jovens em Pesquisa Médica, e também é suportado pelo NIH / NHLBI concede R01-R01-HL089598 e R01HL091947 e Muscular Dystrophy Association conceder # 69238. RJvO é o destinatário da Fellowship 2008-2010 American Physiological Society Pós-Doutorado em Physiological Genomics. Este trabalho também é suportado, em parte, pela Aliança para a Fondation Leducq CaMKII Sinalização no Coração.

Parte 1: Preparação do campo operatório <ol><li> O campo de operação é desinfetada com 75% de álcool isopropílico. </li><li> Certifique-se a almofada de aquecimento está ligado e na temperatura certa. Um sistema recomendado é uma bomba de água Gaymar circulando ligada a um bloco de terapia que é mantida a 37 ° C ± 1 ° C. É importante para manter a temperatura corporal normal durante a cirurgia, para evitar uma rápida diminuição da freqüência cardíaca. </li><li> Instrumentos cirúrgicos são esterilizados em estufa quente talão antes da cirurgia. Para este procedimento, você vai precisar dos seguintes instrumentos cirúrgicos: uma tesoura sem corte, é claro curvas forceps X 2, multa de 45 ° pinças anguladas X 2, tesoura primavera angulado, afastador peito, e porta-agulha. </li><li> Aplicadores de algodão deve estar na mão em caso de hemorragia. </li></ol> Parte 2: Preparação e intubação de Ratos <ol><li> Os ratos são anestesiados em uma câmara de indução com isoflurano a 2% misturado com 0,5 -1,0 L / min 100% O 2. </li><li> Cortar cabelo são usados ​​para raspar a pele do decote no peito ao nível médio. </li><li> O mouse é colocado em posição supina sobre uma almofada de aquecimento, a fim de manter a temperatura corporal. </li><li> A faixa de borracha é colocada sobre dentes do animal s da frente para estender o pescoço. Utilizando uma pinça curva em uma das mãos, a língua é delicadamente manipulado para o lado. Com a outra mão, a intubação traqueal é realizada utilizando tubos PE 90. O tubo endotraqueal é então ligado a um ventilador Harvard ciclismo volumétricos de roedores em 125-150 respirações / minuto e um volume corrente de 0,1-0,3 ml. Durante o procedimento cirúrgico, a anestesia é mantida em 1,5-2% com isoflurano 0,5-1,0 L / min 100% O 2. Nível correto de anestesia é verificada através da aplicação de pressão sobre o leito ungueal do mouse (tep pinch-reflex). </li><li> O campo cirúrgico é desinfetada com uma solução de betadine seguido pelo álcool 70%. Este procedimento é repetido três vezes. </li><li> Para evitar a contaminação do campo cirúrgico durante a operação, uma cortina estéril é colocado sobre o mouse, deixando apenas o campo de operação exposta. </li><li> Um conjunto de luvas estéreis é utilizada para cada rato individual. </li></ol> Parte 3: A ligadura da aorta transversa <ol><li> Toracotomia parcial para a segunda costela é realizada sob um microscópio cirúrgico eo esterno retraído com afastador peito. </li><li> Ponta fina 45 ° pinças anguladas são usados ​​para separar delicadamente o tecido do timo e gordura do arco aórtico. </li><li> Após a identificação da aorta transversa, um pequeno pedaço de um fio de seda 6.0 é colocado entre as artérias inominada e carótida esquerda (Figura 1). </li><li> Dois nós soltas são amarradas ao redor da aorta transversa e um pequeno pedaço de uma agulha de 27 ½ blunt indicador é colocado paralelamente à aorta transversa. O primeiro nó é rapidamente amarrado contra a agulha, seguido pelo segundo e da agulha prontamente removidos a fim de produzir uma constrição de 0,4 milímetros de diâmetro. Em camundongos do grupo controle, todo o procedimento é idêntico, exceto para a ligadura da aorta. </li><li> O afastador de tórax é removido e os de saída do ventilador pinched off por 2 segundos para re-inflar os pulmões. </li><li> A caixa torácica é fechado com uma sutura prolene 6.0 com um padrão de sutura interrompido. </li><li> A pele é fechada com uma sutura prolene 6.0 com um padrão de sutura contínua. </li></ol> Parte 4: recuperação pós-operatória <ol><li> Para analgesia pós-operatória, o mouse é injetado com buprenorfina (0,1 mg / kg) por via intraperitoneal. Se houver sinais de desidratação após a cirurgia, solução salina estéril é dada por via intraperitoneal. </li><li> A anestesia é gradualmente reduzido para a posição off e do tubo endotraqueal removido quando os sinais de respiração espontânea ocorrer. </li><li> O mouse é movido para a posição prona e permitiu recuperar em uma almofada de aquecimento. </li></ol> Parte 5: Confirmação de ligadura de sucesso da aorta transversa <ol><li> Uma semana após a TAC, o mouse é re-anestesiados para determinar o grau de sobrecarga de pressão induzida por ligadura da aorta transversa. Como descrito acima, a anestesia é mantida em 1,5-2% com isoflurano 0,5-1,0 L / min 100% O 2 e temperatura corporal mantida a 37 ° C ± 1 ° C. </li><li> A 20 MHz Doppler sonda é colocada sobre os lados esquerdo e direito do pescoço em um ângulo de 45 ° para detectar velocidades de fluxo. Um computador baseado em processador de sinal Doppler (Indus Instruments, Houston, TX) foi utilizado para exibir e armazenar sinais de Doppler 5. </li><li> Dependendo do grau de sobrecarga de pressão necessária para o protocolo experimental, os ratos apenas com um carótida direita (RC) / carótida esquerda (LC) relação de fluxo em um determinado intervalo estão incluídos para análise posterior. Por exemplo, um grau moderado de sobrecarga de pressão leva a uma proporção de 5-8, enquanto que um apertado constrição resultando em sobrecarga de pressão leva grave toa proporção de 8-10 (Figura 5.3A). Um animal sham (operado, mas não ligada), no entanto, espera-se ter uma proporção de aproximadamente 1 (Figura 5.3b). </li></ol> 6: Resultados Representante A sobrevivência típica de intervenção cirúrgica após TAC em camundongos selvagens é de cerca de 80-90%. Ligadura cirúrgica bem sucedida da aorta transversa levará a uma relação de velocidade de fluxo Doppler entre direita e esquerda da artéria carótida (RC / LC) de 5-10 (Figura 1). Comparado com o sham-operado camundongos (Figura 2A), ratos com sobrecarga de pressão devem desenvolver hipertrofia cardíaca dentro de 1-2 semanas, e dilatação cardíaca após 6-8 semanas, dependendo da tensão da constrição (Figura 2B). Mortalidade durante o primeiro mês após o TAC é tipicamente baixa (&lt;20%) em camundongos selvagens, apesar de camundongos geneticamente modificados podem apresentar diferentes taxas de sobrevivência 6,7. <img src="/files/ftp_upload/1729/1729fig1tmb.jpg" alt="Figura 1" border="0" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. Confirmação da Ligadura aorta transversa com Doppler medição de velocidade. Representante sinais de velocidade Doppler do direito (RC) e carótida esquerda (LC) artérias seis dias pós-TAC. Essas gravações demonstram uma ligadura de sucesso com uma taxa de fluxo de RC / LC de ~ 6.8. Por favor, <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1729/1729fig1.jpg">clique aqui</a> para ver uma versão ampliada da figura 1. <img src="/files/ftp_upload/1729/1729fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2. Representante Whole Imagens Coração Após TAC. A B. Sham operados coração de rato tipo selvagem.. Coração de rato tipo selvagem 16 semanas pós-TAC. Cada linha = 1 milímetro.

<ol><li>Rockman, H. A., Ross, R. S., Harris, A. N., Knowlton, K. U., Steinhelper, M. E., Field, L. J., Ross, J. Jr, Chein, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+USA%22%5BJournal%5D)">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 88, 8277-8281 (1991).</li>
<li>Heineke, J., Molkentin, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+cardiac+hypertrophy+by+intracellular+signaling+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Mol.+Cell.+Biol%22%5BJournal%5D)">Regulation of cardiac hypertrophy by intracellular signaling pathways.</a> Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 7, 589-600 (2006).</li>
<li>Hartley, C. J., Reddy, A. K., Madala, S., Michael, L. H., Entman, M. L., Taffett, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doppler+estimation+of+reduced+coronary+flow+reserve+in+mice+with+pressure+overload+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+Med.+Biol%22%5BJournal%5D)">Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy.</a> Ultrasound Med. Biol. 34, 892-901 (2008).</li>
<li>Reddy, A. K., Taffett, G. E., Li, Y. -H., Lim, S. -W., Pham, T. T., Pocius, J. S., Entman, M. L., Michael, L. H., Hartley, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Doppler+signal+processing+for+use+in+mice%3A+applications%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Trans.+Biomed.+Eng%22%5BJournal%5D)">Doppler signal processing for use in mice: applications.</a> IEEE Trans. Biomed. Eng. 52, 1771-1783 (2005).</li>
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<li>Tarnavski, O., McMullen, J. R., Schinke, M., Nie, Q., Kong, S., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+cardiac+surgery%3A+comprehensive+techniques+for+the+generation+of+mouse+models+of+human+diseases+and+their+application+for+genomic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies.</a> Physiol Genomics. 16, 349-360 (2004).</li>
</ol>

TAC, que imita estenose aórtica humana, é um método comum para induzir hipertrofia cardíaca e insuficiência cardíaca em camundongos. Locais alternativos para a constrição da aorta incluem a aorta ascendente e abdominal. Ascendente constrição aórtica fornece uma sobrecarga extrema e mais rápida sobre o ventrículo esquerdo (LV). Em contraste, a constrição da aorta abdominal deixa intacta uma porção maior da circulação como meio de compensação possível. 8 Portanto, TAC é muitas vezes o modelo preferido em que pr...

<table><tbody><tr><td>Bomba Gaymar T/pump</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Modelo TP-500</td><td>Bomba de circulação de água</td></tr><tr><td>Almofadas de terapia térmica</td><td>Harvard Apparatus</td><td>60-3414</td><td></td></tr><tr><td>Esterilizador por esfera quente</td><td>Fine Science Tools</td><td>18000-45</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura romba</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5980</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura de mola angular</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5668</td><td></td></tr><tr><td>Retrator torácico</td><td>Fine Science Tools</td><td>17002-02</td><td></td></tr><tr><td>Pinça curva grossa</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5138</td><td></td></tr><tr><td>Pinça fina Dumont angular de 45&amp;#x00B0;</td><td>Fine Science Tools</td><td>11253-25</td><td></td></tr><tr><td>Porta-agulha</td><td>Fine Science Tools</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>Aparador elétrico</td><td>GE Healthcare</td><td></td><td>Para depilar o pelo do camundongo</td></tr><tr><td>Tubo PE 90</td><td>BD Biosciences</td><td>427420</td><td>Para intubação</td></tr><tr><td>MiniVent (ventilador)</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Tipo 845</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Fisher Scientific</td><td>19-027132</td><td>Pode ser adquirido em lojas de material médico</td></tr><tr><td>Luvas estéreis</td><td>Mckesson</td><td>20-1565</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio estereoscópico</td><td>Unico</td><td>ZM186</td><td></td></tr><tr><td>Sutura de seda 6-0</td><td>Fine Science Tools</td><td>18020-60</td><td></td></tr><tr><td>Agulha de calibre 27 &amp;frac12;</td><td>BD Biosciences</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>Sutura prolene 6-0</td><td>Mckesson</td><td>3286</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>Facilidade Institucional para Animais</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

constrição aórtica transversais em ratos

Transverse Aortic Constriction in Mice

Constrição aórtica transversal (TAC) no rato é um modelo experimental comumente usado para a pressão de sobrecarga induzida hipertrofia cardíaca e insuficiência cardíaca.<sup&gt; 1</sup&gt; TAC inicialmente leva a hipertrofia compensada do coração, que muitas vezes está associada a um aumento temporário da contratilidade cardíaca. Ao longo do tempo, no entanto, a resposta à sobrecarga hemodinâmica crônica torna-se maladaptive, resultando em dilatação cardíaca e insuficiência cardíaca.<sup&gt; 2</sup&gt; O modelo murino TAC foi validado por Rockman<em&gt; Et al</em&gt;.<sup&gt; 1</sup&gt;, E desde então tem sido amplamente utilizado como uma ferramenta valiosa para imitar humanos doenças cardiovasculares e elucidar fundamentais processos de sinalização envolvidos na resposta hipertrófica cardíaca e desenvolvimento de insuficiência cardíaca. Quando comparado a outros modelos experimentais de insuficiência cardíaca, tais como oclusão completa da descendente anterior esquerda (DAE) da artéria coronária, TAC fornece um modelo mais reprodutível de hipertrofia cardíaca e um curso de tempo mais gradual no desenvolvimento de insuficiência cardíaca. Aqui, descrevemos um procedimento passo-a-passo para realizar TAC cirúrgica em camundongos. Para determinar o nível de sobrecarga de pressão produzida pela ligadura da aorta, uma sonda de alta freqüência Doppler é usado para medir a relação entre velocidades de fluxo sanguíneo nas artérias carótidas direita e esquerda.<sup&gt; 3, 4</sup&gt; Com as taxas de sobrevivência cirúrgica de 80-90%, aórtico transverso bandagem é uma técnica eficaz de induzir a hipertrofia ventricular esquerda e insuficiência cardíaca em camundongos.

Constrição aórtica transversal (TAC) no rato é um modelo experimental comumente usado para estudar os mecanismos subjacentes a hipertrofia cardíaca eo desenvolvimento de insuficiência cardíaca. Aqui, descrevemos os procedimentos a constrição da aorta para criar um grau reprodutível de hipertrofia cardíaca em camundongos.

Constrição aórtica transversais em ratos

A constrição aórtica transversa (TAC) em camundongos é um modelo experimental comumente utilizado para a hipertrofia cardíaca induzida por sobrecarga de pressão e insuficiência cardíaca...

Este procedimento começa com a anestesia de um camundongo, o preparo para cirurgia asséptica e a colocação na posição supina sobre uma placa aquecida. A intubação endotraqueal é realizada utilizando tubo PE 90, que então é conectado a um ventilador para roedores. Em seguida, realiza-se uma toracotomia parcial até a segunda costela e retrai-se o esterno.A aorta transversa é identificada e posteriormente ligada entre as artérias inominada e carótida esquerda. A caixa torácica é fechada, seguida pela pele com um padrão de sutura contínua. Por fim, o tubo endotraqueal é removido e o camundongo é deixado em recuperação.Olá, sou Angela Dal Meda do laboratório do Dr. Zander Wars, do Departamento de Fisiologia Molecular e Biofísica do Baylor College of Medicine. Hoje vamos mostrar a vocês o procedimento de constrição aórtica transversa em camundongos. Utilizamos este procedimento em nosso laboratório para estudar os mecanismos subjacentes ao desenvolvimento da hipertrofia cardíaca e da insuficiência cardíaca.Então vamos começar. Antes de iniciar a constrição aórtica transversa ou cirurgia tax, desinfete o campo operatório com álcool isopropílico a 75%. Ligue o tapete aquecedor e ajuste-o à temperatura adequada.O sistema que recomendamos é uma bomba de água circulatória para jogos conectada a uma almofada de terapia térmica mantida a 37 mais ou menos um grau Celsius. Esterilize os instrumentos cirúrgicos em um esterilizador de contas quentes antes da cirurgia. Para o procedimento cirúrgico de retirada de tecido, são necessários os seguintes instrumentos cirúrgicos.Uma tesoura romba, duas pinças curvas grossas para localizar pinças em ângulo de 45 graus, um par de tesouras em ângulo com mola, um retrator torácico e um porta-agulhas. Aplicadores de algodão também devem estar à mão em caso de sangramento. Com o campo cirúrgico preparado, podemos prosseguir para a intubação do camundongo.Em preparação para a intubação, o camundongo é anestesiado em uma câmara de indução e tesouras elétricas são usadas para raspar os pelos da linha do pescoço até o nível do tórax médio. Coloque o camundongo em posição supina sobre o tapete aquecido. É importante manter a temperatura corporal normal durante a cirurgia para evitar uma diminuição rápida da frequência cardíaca e possível morte súbita.Aplicar pressão sobre o leito ungueal do camundongo para confirmar que o animal está completamente anestesiado. Colocar uma tira de borracha sobre os dentes da frente do animal para estender o pescoço. Com uma pinça curva em uma das mãos, manipular suavemente a língua para o lado com a outra mão. Inserir o tubo de PE 90 na traqueia.Em seguida, conecte o tubo endotraqueal a um ventilador de roedores com ciclo volumétrico Harvard. O ventilador deve operar entre 125 e 150 ciclos por minuto, com um volume corrente de 0,1 a 0,3 mililitros, dependendo do peso corporal do camundongo. Desinfete a pele dentro do campo cirúrgico com solução de Betadine, seguida por álcool 70%. Repita este procedimento três vezes para prevenir contaminação do campo cirúrgico durante a operação e coloque um campo estéril sobre o camundongo, deixando exposto apenas o local da cirurgia.Agora estamos prontos para realizar a ligadura da aorta transversa durante este procedimento cirúrgico. A anestesia é mantida entre 1,5 e 2% de isoflurano com oxigênio a 0,5 a um litro por minuto, 100%. Verifique o nível correto de anestesia aplicando pressão sobre a polpa da unha do camundongo.Para confirmar a ausência do reflexo do token. Inicie a cirurgia realizando uma toracotomia parcial. Corte o esterno começando pela extremidade craniana até o nível da segunda costela.Usando um microscópio cirúrgico, retrair o esterno com um afastador torácico. Em seguida, usar uma pinça fina com ponta em ângulo de 45 graus para separar suavemente o timo e o tecido adiposo do arco aórtico. Após identificar a aorta transversa, colocar um pequeno pedaço de sutura de seda 6,0 entre as artérias anônima e carótida esquerda.Faça dois nós soltos ao redor da aorta transversa e posicione um pequeno pedaço de uma agulha romba de calibre 27 e meio paralelamente à aorta de transferência. Amarre rapidamente o primeiro nó contra a agulha, seguido pelo segundo nó, e então remova imediatamente a agulha para obter uma constrição de 0,4 milímetros de diâmetro.Uma vez que a aorta transversa tiver sido ligada, remova o afastador torácico e pinça o fluxo de saída do ventilador por dois segundos. Para reinflar cuidadosamente os pulmões, feche a caixa torácica usando uma sutura de prolen 6,0 com padrão de sutura interrompido. Finalmente, feche a pele usando uma sutura de prolen 6,0 com padrão de sutura contínuo.Para analgesia pós-operatória. Injetar o camundongo por via intraperitoneal com buprenorfina. Se houver sinais de desidratação após a cirurgia, administrar de 0,3 a um mililitro de solução salina estéril por via intraperitoneal.Reduza gradualmente a anestesia até a posição desligada. Quando ocorrerem sinais de respiração espontânea, remova o tubo endotraqueal, em seguida posicione o camundongo em decúbito ventral e permita que se recupere sobre uma placa aquecida. Uma semana após a constrição aórtica transversa, o camundongo é reanestesiado para determinar o grau de sobrecarga de pressão induzida pela constrição da aorta transversa.A anestesia e a temperatura corporal são mantidas conforme demonstrado anteriormente. Posicione uma sonda Doppler de 20 megahertz nos lados esquerdo e direito do pescoço em um ângulo de 45 graus. Para detectar as velocidades do fluxo sanguíneo na artéria carótida, utilizamos um processador de sinal Doppler baseado em computador para exibir e armazenar os sinais Doppler.Dependendo do grau de sobrecarga de pressão necessário para o protocolo experimental, apenas camundongos com uma razão entre o fluxo da carótida direita ou RC e o da carótida esquerda ou LC dentro de uma determinada faixa são incluídos para análises posteriores. Por exemplo, um grau moderado de sobrecarga de pressão resulta em uma razão de cinco a oito, enquanto uma constrição mais acentuada, resultando em sobrecarga de pressão grave, leva a uma razão de oito a 10. Um animal submetido a procedimento simulado, no entanto, deve apresentar uma razão de aproximadamente um.A sobrevida cirúrgica típica após TAC em camundongos selvagens é de cerca de 80 a 90% bem-sucedida. A ligadura cirúrgica da aorta transversa levará a uma razão de velocidade do fluxo Doppler entre a artéria carótida direita e a esquerda, ou RC sobre LE, de cinco a dez em comparação com camundongos submetidos a cirurgia simulada. Espera-se que camundongos com sobrecarga de pressão desenvolvam hipertrofia cardíaca dentro de uma a duas semanas e dilatação cardíaca após seis a oito semanas, dependendo do grau de constrição.Acabamos de mostrar como realizar a constrição aórtica transversa em camundongos, mas é importante manter a temperatura corporal normal e minimizar a perda sanguínea durante este procedimento. É isso aí. Obrigado por assistir e boa sorte com seus experimentos.

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Neste vídeo, demonstramos um protocolo experimental para constrição aórtica transversa minimamente invasiva em camundongos para examinar a insuficiência cardíaca induzida por sobrecarga de pressão.

Bandagem do Arco Aórtico Transverso em Modelo de Camundongo: Uma Técnica Minimamente Invasiva em Camundongos para Indução de Alta Pressão no Ventrículo Esquerdo

O objetivo deste protocolo é avaliar de forma não invasiva alterações cardíacas estruturais e funcionais em um rato modelo da doença de coração criado por constrição aórtica transversal, usando B e M-mode ecocardiografia e cor / impulso de imagem onda Doppler.

Avaliação da morfológicas e funcionais cardíacas Mudanças no Modelo rato de Transverse aórtica constrição por ecocardiográfica de imagem

Um modelo de rato de constrição da aorta abdominal que induz hipertrofia e remodelamento cardíaco é descrito. Um método eficiente, altamente reprodutível e minimamente invasivo é usado para fornecer uma plataforma simples, mas útil, para pesquisa em hipertrofia e disfunção miocárdica.

Um Modelo de Cardiologia remodela Através constrição da Aorta Abdominal em Ratos

Minimamente invasiva constrição aórtica transversal (MTAC) conserva o essencial da constrição aórtica transversal regulares (TAC), eliminando o uso de um ventilador com intubação traqueal. Ele revela-se um método altamente desejável para os estudos de alto rendimento sobre a sobrecarga do ventrículo esquerdo, particularmente em estudos translacionais.

Minimamente Invasiva transversal aórtica constrição em Ratos

O objectivo do presente protocolo é descrever passo a passo a técnica de constrição da aorta transversa minimamente invasiva (TAC) em camundongos. Pela eliminação de intubação e ventilação que são obrigatórios para o procedimento padrão comumente usado, TAC minimamente invasiva simplifica o procedimento operatório e reduz o esforço de colocar o animal.

Técnica de constrição da aorta minimamente invasiva transversal em camundongos para indução de Hipertrofia Ventricular Esquerda

Aqui, apresentamos um protocolo de constrição transversal da aorta (TAC) através de uma toracotomia lateral. Esta técnica é um procedimento cirúrgico minimamente invasivo, fechado no peito, com o objetivo de simular a sobrecarga de pressão e de insuficiência cardíaca em ratos utilizando as configurações padrão de laboratório de TAC.

Um modelo de peito fechado para induzir a constrição da aorta transversa em ratos

Este protocolo apresenta um método aprimorado para obter hipertrofia miocárdia transitória com sutura absorvível, simulando diminuição da hipertrofia ventricular esquerda após a remoção da sobrecarga de pressão. Pode ser valioso para os estudos sobre pré-condicionamento hipertrófico do miocárdio.

Constrição aórtica transversal operacional com sutura absorvível para obter hipertrofia miocárica transitória

O presente protocolo descreve uma técnica modificada e simplificada com procedimento minimamente invasivo de constrição transversa da aorta (TAC) utilizando um afastador de fabricação própria. Esse procedimento pode ser realizado sem ventilador ou microscópio e introduz sobrecarga pressórica, eventualmente levando à hipertrofia cardíaca ou insuficiência cardíaca.

Técnica Modificada para Constrição Aórtica Transversa em Camundongos

O rato modelo de transplante cardíaco heterotópico tem sido comprovada por muitos pesquisadores de ser um método importante para o estudo dos mecanismos de rejeição e de resposta imune. No entanto, as técnicas envolvidas são ainda um desafio. Ao modificar as técnicas padrão que temos tido sucesso com mais de 1.000 transplantes.

Transplante cardíaco heterotópico em ratos

O rato modelo de transplante de intestino delgado tem sido reconhecida como uma importante ferramenta para estudar mechanismes da rejeição imunológica e tela novas drogas imunossupressoras. No entanto, este modelo é limitado a usar, porque as técnicas envolvidas é um desafio extremamente técnico. Agora vamos introduzir a técnica modificada.

Transplante de intestino delgado em ratos

Aprenda a técnica de constrição aórtica transversal em camundongos para induzir hipertrofia cardíaca e insuficiência cardíaca. Este método padronizado permite estudar mecanismos moleculares da remodelação cardíaca com taxa de sobrevivência de 80-90%.

Constrição aórtica transversais em ratos

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