Preparação de amostras de tumor embebidas em parafina fixadas em formalina: um protocolo para preservar amostras de tecido e citologia de câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC)

- Para começar, obtenha amostras de tumor de pulmão como amostras de tecido ou como amostras de citologia de lavagens brônquicas - uma lavagem salina contendo células do interior das vias aéreas. Para preparar amostras de tecido, transfira o tecido pulmonar recém-dissecado para um de incorporação. Fixe e preserve o tecido com a concentração adequada de formalina.

Para preparar amostras de citologia, primeiro trate as lavagens brônquicas com DL-ditiotreitol para homogeneização. Centrifugue e remova o sobrenadante. Em seguida, trate com uma solução mucolítica para liquefazer o muco e separar as células. Centrifugue para peletizar as células e fixá-las com formalina. Trate as células com um reagente de preparação de bloco celular adequado para concentrar a amostra enquanto trabalha com pequenos volumes de pellets.

Transfira o pellet para um de embutir. Processe ambos os tipos de amostra desidratando-os por meio de uma série de banhos de álcool graduados. Remova o álcool usando um agente de limpeza apropriado, seguido de infiltração de cera. Incorpore o em cera de parafina líquida e deixe-o solidificar. Isso forma uma camada ao redor do tecido, mantendo a amostra no lugar.

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