Ensaio de Quantificação de Infecção Bacteriana: Um Método para Quantificar a Carga Bacteriana Intraocular em Modelo de Endoftalmite Bacteriana em Camundongo

A endoftalmite bacteriana é uma doença inflamatória ocular que ocorre quando o Bacillus cereus - uma bactéria patogênica - infecta a região intraocular.

Para quantificar a infecção bacteriana, coloque um modelo de camundongo eutanasiado de endoftalmite bacteriana lateralmente em uma mesa de operação. Aplique uma leve pressão sob o olho para ajudar a separar o globo ocular da órbita. Transfira o globo ocular para um tubo contendo um tampão apropriado suplementado com coquetel de inibidores de protease.

Homogeneizar o tecido ocular para desintegrá-lo, liberando bactérias na suspensão. Os inibidores de protease presentes no tampão inativam as proteases celulares liberadas para manter a viabilidade bacteriana. Em seguida, dilua em série a suspensão bacteriana para obter várias concentrações de Bacillus cereus.

Tomar uma placa de cultura angular contendo o meio de ágar-ágar enriquecido e demarcar as linhas correspondentes a cada concentração de diluição. Dispense algumas gotas da suspensão bacteriana no topo da linha designada e deixe escorrer até chegar ao final da placa, ajudando na disseminação uniforme das bactérias. Achate a placa e incuba.

Durante a incubação, cada bactéria usa os