Ensaio de Imunoesferas Multianalita: Uma Técnica de Imunoensaio Baseada em Fluxo para Detecção Simultânea de Vários Subtipos de Anticorpos em Amostra de Soro Humano

O ensaio de imunoesferas multianalitas usa várias microesferas revestidas de antígeno para reconhecer seus anticorpos alvo correspondentes simultaneamente.

Para iniciar este ensaio, pegue uma mistura de microesferas em um tubo contendo o tampão apropriado. Cada grânulo é revestido com um antígeno específico em sua superfície, permitindo fácil diferenciação dos grânulos uns dos outros.

Pipetar a mistura de imunoesferas revestida para os alvéolos de uma placa de ensaio de microtitulação. Suplementar os alvéolos com a amostra de soro contendo diferentes isotipos de anticorpos alvo. Essas variantes têm diferenças sutis em suas estruturas, permitindo que cada poço tenha vários anticorpos primários.

Incubar, para permitir que os isotipos de anticorpos da amostra se liguem a antígenos específicos capturados nas respectivas esferas imunológicas. Lave com um tampão de ensaio para remover anticorpos primários não ligados. Adicione anticorpos secundários marcados com corante fluorescente, correspondentes a cada variante do anticorpo primário, no poço.

Cada anticorpo secundário marcado se liga ao sítio Fc do respectivo anticorpo primário. Vários complexos de anticorpos primários de antígeno ca