Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Técnicas Biológicas
0 visualizações • 3:56 min. • July 8th, 2025
Os enterócitos são células especializadas do intestino delgado que desempenham um papel crucial na absorção de nutrientes, incluindo a absorção de ferro.
Para avaliar a biodisponibilidade do ferro - a proporção de ferro ingerido acessível para funções fisiológicas - pegue uma solução acidificada contendo a amostra do alimento. Agora, adicione pepsina - uma enzima de digestão de proteínas, do estômago. Em pH ácido, a pepsina inicia a digestão gástrica quebrando proteínas dietéticas complexas em pequenos peptídeos.
Adicione bicarbonato de sódio para aumentar o pH e interromper a digestão gástrica. Adicione uma solução contendo enzimas pancreáticas e bile para simular a digestão intestinal. Transferir a mistura para a parte superior de um sistema de cultura celular de duas câmaras.
A câmara inferior contém enterócitos diferenciados do Caco-2 - uma linha celular de adenocarcinoma de cólon. Uma membrana de diálise separa a câmara superior da inferior. A membrana permite a difusão de espécies de baixo peso molecular.
A mistura de enzimas pancreáticas e bile na câmara superior decompõe carboidratos, proteínas e lipídios em subunidades menores - liberando ferro na forma de íons férricos.
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