JoVE Encyclopedia of Experiments
Imunologia
0 vistas • 2:45 min • July 8th, 2025
Tome uma emulsão adjuvante contendo glicoproteínas de oligodendrócitos de mielina, ou MOGs - uma proteína da bainha de mielina nervosa e Mycobacterium tuberculosis inativado. Injete-o por via subcutânea nas costas do rato.
Em seguida, injete exotoxinas derivadas de bactérias por via intraperitoneal - perturbando a barreira hematoencefálica.
O Mycobacterium injetado por via subcutânea imita a infecção local, atraindo células imunes, incluindo células apresentadoras de antígenos ou APCs.
As APCs interagem com os MOGs, processando-os e apresentando-os nos principais complexos de histocompatibilidade, MHCs.
As APCs ativadas migram para os linfonodos, onde as células T interagem com as APCs, tornando-se células T autorreativas.
Essas células T entram na corrente sanguínea, atravessam a barreira e se infiltram no sistema nervoso central, o SNC.
No SNC, as células T autorreativas interagem com as células que expressam MOG, promovendo a infiltração de células imunes.
Os monócitos infiltrados se diferenciam em macrófagos, liberando citocinas inflamatórias e espécies reativas de oxigênio, causando a morte celular dos oligodendrócitos produtores de mielina.
As células B interagem com células T autorreativas, diferenciando-se em células plasmáticas e secretando autoanticorpos contra MOG, levando à degradação da bainha de mielina.
A desmielinização prejudica a transmissão do sinal nervoso, induzindo encefalomielite autoimune.
Comece injetando subcutaneamente camundongos fêmeas de 10 a 13 semanas de idade com 200 microgramas de glicoproteína de oligodendrócitos de mielina, emulsionados em 200 microlitros de adjuvante de Freund completo contendo 400 microgramas de Mycobacterium tuberculosis. Imediatamente, e 24 horas depois, injete intraperitonealmente nos camundongos 0,2 microgramas de toxina da coqueluche em 200 microlitros de PBS.
É essencial que os camundongos tenham sido adaptados tanto ao manuseio quanto ao ambiente experimental antes da indução para evitar a indução de estresse, o que pode prevenir o desenvolvimento de sintomas clínicos.
Uma semana após a injeção, examine os camundongos diariamente quanto a sintomas clínicos, conforme descrito na tabela.