A técnica de fotoconversão para explorar a dinâmica celular inflamatória em pupas de insetos

Comece com um prato com fundo de vidro contendo pupas transgênicas de Drosophila carregando epitélio ferido marcado com suas proteínas de superfície celular exibindo fluorescência verde.

As células imunes das pupas - ou hemócitos expressam fluoróforos verdes fotoconversíveis no citoplasma e proteínas fluorescentes vermelhas no núcleo, facilitando o rastreamento celular.

As células feridas liberam quimioatraentes - ou moléculas inflamatórias, atraindo os hemócitos para o local ferido.

A microscopia confocal revela a área ferida circundada por células epiteliais verdes.

Durante a cicatrização, hemócitos verdes com núcleos vermelhos próximos à ferida estendem as saliências da membrana - filopódios e lamelipódios e migram em direção à área ferida.

Com o tempo, à medida que o quimioatraente se difunde, os hemócitos distantes migram em direção à ferida, criando uma onda de células imunológicas.

Ilumine a subpopulação de hemócitos migratórios com um comprimento de onda de 405 nanômetros. Isso converte irreversivelmente o fluoróforo fotoconversível dos hemócitos de verde para vermelho.

Esses hemócitos fotoconvertidos reparam o epitélio ferido e se afastam do local da ferida, diferenciando