January 24th, 2012
Cateterização crônica dos vasos sangüíneos no rato é muitas vezes necessária para a administração de substâncias, obter amostra de sangue durante um período de tempo ou para medições de pressão direta consciente sangue. Cateterismo arterial femoral do rato e medidas correspondentes da pressão arterial em que o animal consciente será demonstrado.
O objetivo geral deste procedimento é ilustrar a metodologia para cateterismo da artéria femoral e venoso para usos crônicos e agudos. Isso é feito preparando primeiro uma bolsa na parte inferior da perna para o cateter para colocação. O segundo passo é isolar a artéria e a veia femoral e prepará-las para a colocação do cateter.
O terceiro passo é inserir e prender os cateteres dentro da veia e artéria femoral. A etapa final é o envolvimento cirúrgico, incluindo a fixação dos cateteres para evitar seu movimento durante o movimento ou crescimento do animal. Fechamento das incisões e colocação do animal na jaqueta tipo amarração com técnicas cirúrgicas assépticas cuidadosas e colocação e manutenção do cateter.
É possível manter cateteres crônicos patentes para futuras coletas de sangue, administração de medicamentos ou medidas de pressão arterial e frequência cardíaca. A demonstração visual desse método é crítica. As ilustrações e protocolos de texto disponíveis atualmente carecem de grande parte da representação visual detalhada necessária para implementar esse método.
Demonstrando o procedimento será a Dra. Carrie Northcott Depois de anestesiar, raspar e esfregar o animal experimental, coloque uma cortina estéril sobre as áreas cirúrgicas. Em seguida, inicie o procedimento fazendo uma incisão horizontal de aproximadamente um a um centímetro e meio na parte de trás do pescoço do rato, na altura das omoplatas, usando uma tesoura de ponta romba. Disseque a bolsa subcutânea aproximadamente do tamanho de um quarto nas costas do animal.
Cubra a incisão com um pedaço de gaze embebido em solução salina estéril. Então, depois de virar o rato de costas, faça uma incisão de aproximadamente um a um centímetro e meio ao longo do ângulo da pata traseira. Agora, segurando a tesoura de ponta romba em um ângulo de 45 graus, disseque dentro da incisão para separar o tecido conjuntivo até que a artéria e a veia femoral fiquem expostas.
Depois de dissecar outra pequena bolsa do tamanho de um quarto abaixo da pele, desta vez ao longo da parte interna da perna, coloque afastadores na área da incisão para que a artéria e a veia possam ser visualizadas completamente. Em seguida, usando uma pinça de ponta fina, separe suavemente o nervo que está ao longo da artéria femoral, longe da artéria e da veia, tomando cuidado para não danificar o nervo. Em seguida, separe a artéria e a veia em uma unidade expondo cerca de meio a um centímetro de comprimento de ambos os vasos.
Agora, segurando a pinça perpendicular aos vasos, separe os vasos em paralelo para evitar danificá-los. Para começar, primeiro mergulhe uma gaze dois a dois em solução salina estéril. Depois de colocar a gaze sobre as incisões, vire o rato de bruços, certificando-se de que a parte superior dos hemostáticos esteja apontada para cima, não voltada para a coluna.
Insira a dor de Rochester longa e reta. Quatro passos na incisão nas costas do animal e guiá-los subcutaneamente pelas costas até o nível dos quadris aproximadamente na região do quadril. Vire os hemostáticos em direção à incisão e empurre a ponta dos hemostáticos para fora da incisão da perna preparada.
Em seguida, segure suavemente as extremidades dos cateteres opostas às extremidades a serem inseridas com a pinça. Puxe cuidadosamente os cateteres pelas costas e pelo pescoço. Incisão. Encha as seringas de agulha embotadas com 20 unidades por mililitro de solução salina de heparina e, em seguida, coloque-as nas extremidades dos cateteres, tomando cuidado para garantir que não haja bolhas de ar, encha os cateteres e verifique se os cateteres estão pérvios.
Por fim, deixando as seringas presas ao final das linhas, vire o rato em sua embalagem. Mais uma vez. Primeiro coloque um pedaço dobrado de seda estéril sob a veia femoral e, em seguida, corte a seda na extremidade dobrada, fazendo dois pedaços de seda sob a veia.
Em seguida, separe os dois pedaços de seda puxando um pedaço distalmente em direção à perna do animal e puxando o outro proximalmente em direção ao corpo. Com a sutura no lado proximal, mais próximo do corpo, amarre uma ligadura frouxa. Não aperte totalmente.
Agora segure a seda no nó com pequenos hemostáticos puxando-a sem apertar o nó. Puxe o outro pedaço de seda o mais longe possível em direção à perna para obter um bom comprimento de vaso para trabalhar. Usando fórceps.
Amarre esta sutura em um nó triplo. Ocluindo o vaso. Coloque uma a duas gotas de lidocaína na veia usando a tesoura de microdissecação van.
Faça uma pequena incisão em um ângulo de 45 graus e aproximadamente um terço a um quarto do caminho na veia. Em seguida, use uma pinça para segurar cuidadosamente o cateter venoso. Em seguida, coloque uma ponta fina com uma pinça de 45 graus na incisão.
Abra suavemente a pinça de 45 graus dentro da veia e, em seguida, coloque cuidadosamente o cateter venoso sob a pinça e insira o cateter na veia. Depois que o cateter estiver no vaso, certifique-se de pendurá-lo com um conjunto de pinças o tempo todo até que esteja seguro no animal, ou é provável que o cateter saia quando a ligadura for alcançada. Afrouxe o nó ajustando os hemostáticos para que a seda não fique mais esticada e o cateter possa ser totalmente inserido.
Quando o cateter estiver totalmente inserido, aperte a ligadura proximal ao redor da veia no cateter dando um nó triplo usando a seda perto da perna. Para uma ligadura distal, amarre a seda ao redor do cateter. Em seguida, puxe lentamente a seringa para trás até que haja uma pequena quantidade de sangue visível no cateter para garantir que o nó não esteja muito apertado.
Depois de verificar se o cateter está funcionando, pressione o êmbolo até que o sangue não seja mais visível. E termine de dar um nó triplo na seda para garantir que o cateter não saia da veia. Em seguida, cateterize a artéria femoral de maneira semelhante.
Coloque brevemente quatro oh seda sob a artéria. Em seguida, separe os dois pedaços de seda puxando um pedaço distalmente em direção à perna do animal e puxando o outro proximalmente em direção ao corpo. Ao contrário da veia, ao cateterizar a artéria primeiro, puxe o pedaço distal de seda em direção à perna e amarre essa sutura.
Com um nó triplo ocluindo o vaso devido ao sangue que flui do coração para a perna. Isso fará com que o vaso aumente. Agora, com o pedaço de seda proximal restante, amarre uma ligadura solta, segure a seda no nó com pequenos hemostáticos puxando-a sem apertar o nó.
Em seguida, coloque uma a duas gotas de lidocaína na artéria. Faça uma pequena incisão em um ângulo de 45 graus, aproximadamente um terço a um quarto do caminho através da artéria, usando uma pinça para manter o lúmen aberto, deslize o cateter para dentro da artéria. Em seguida, usando a ligadura proximal, dê um nó triplo ao redor da artéria e do cateter.
Em seguida, verifique o fluxo sanguíneo no cateter e amarre a ligadura distal como antes. Depois de verificar se o cateter está funcionando, pressione o êmbolo até que o sangue não seja mais visível e termine de dar um nó triplo na seda. Para garantir que o cateter não saia, faça um laço de dez centavos a um quarto nos cateteres e coloque-os na parte interna da perna.
Depois de colocar os dois cateteres, prenda-os com um a dois pontos de cinco suturas cirúrgicas na camada muscular. Feche a incisão com suturas ininterruptas usando quatro oh lon, e depois de virar o rato de bruços, faça outro laço nos cateteres do tamanho de um quarto e coloque-o na bolsa dissecada nas costas do animal. Feche a incisão com suturas.
Em seguida, usando uma gota de vínculo veterinário, prenda os cateteres na parte de trás. Prenda os cateteres perto da incisão posterior com hemostáticos acolchoados e remova as seringas das extremidades. Por fim, coloque no rato uma jaqueta tipo amarra, alimentando os cateteres através da mola na jaqueta.
Coloque as seringas de volta nos cateteres. Remova os hemostáticos e aperte a jaqueta. Em seguida, substitua os hemostáticos e corte os cateteres.
Agora tampe os cateteres para manter o bloqueio da heparina e remova os hemostáticos. Comece apertando o cateter com pinça acolchoada. Em seguida, remova o cateter.
Conecte uma agulha de ponta romba e coloque uma seringa de ponta romba com solução de bloqueio no cateter, solte a pinça e, em seguida, encha o cateter com 0,3 mililitros de solução de bloqueio rec. Prenda o cateter e remova a seringa. Em seguida, recoloque o plugue do cateter e solte a pinça.
Por fim, empurre suavemente o plugue levemente para garantir que não haja sangue na ponta do cateter. Após a recuperação cirúrgica, as medições da pressão arterial podem ser obtidas do animal acordado em movimento livre. Os equipamentos utilizados para essas medições incluem o laboratório de potência, oito sp, a ponte quádrupla e o transdutor de pressão arterial, conforme indicado com as linhas pontilhadas.
Neste experimento, fenil, rine e agonista do receptor alfa um adrenérgico foram administrados na linha da veia femoral. A pressão arterial do animal foi medida simultaneamente a partir da linha arterial femoral e, como pode ser visto na figura, a pressão de pulso representada no gráfico superior e a pressão arterial média representada no gráfico inferior aumentaram imediatamente em resposta à droga. A frequência cardíaca, no entanto, caiu temporariamente e aumentou gradualmente para os níveis pré-droga após a administração da fenilefrina.
Então, após a recuperação dos efeitos do agonista alfa adrenérgico, a administração do antagonista alfa adrenérgico não seletivo, a fentolamina indicada com a segunda linha pontilhada fez com que a pressão arterial do animal diminuísse. Mais uma vez, uma vez dominada, essa técnica pode ser feita em 20 a 30 minutos.
Este artigo demonstra a metodologia para o cateterismo crônico da artéria e veia femoral em ratos. O procedimento permite medições de pressão arterial e coleta de amostras de sangue em animais conscientes.