August 9th, 2012
Estádios cirúrgicos de aumento da bexiga são descritos utilizando 3-D andaimes em modelos murinos e de rato. Para testar a eficácia de configurações de biomateriais para utilização no aumento da bexiga, as técnicas para cistometria tanto acordado e anestesiados são apresentados.
O objetivo deste procedimento é avaliar o uso de biomateriais para aumento vesical por meio da aquisição de dados funcionais por citometria. Isso é feito primeiro aner mosin, o andaime para um defeito criado na bexiga. A segunda etapa do procedimento é tunelizar o tubo de cistostomia até o abdômen.
O terceiro passo é colocar o tubo de cistostomia na bexiga aumentada e prendê-lo no dorso do animal. A etapa final é realizar citometria para avaliar a bexiga aumentada do ponto de vista funcional. Em última análise, os resultados podem mostrar mudanças na capacidade e complacência da bexiga, pressões miccionais, tempos de ciclo nutricional e volumes residuais pós-miccionais por meio de citometria consciente.
As implicações dessa técnica se estendem à terapia de anomalias congênitas e adquiridas da bexiga ou uretra que levam ao comprometimento da capacidade, complacência e função geral da bexiga. Porque novos biomateriais usados para aumento da bexiga precisam ser avaliados funcionalmente. Depois de preparar um animal para a cirurgia abdominal, use um bisturi para fazer uma incisão na linha média inferior através da pele.
Usando uma pinça dentada, eleve o músculo reto e disseque a superfície posterior do músculo com metásseis finos e tesouras de bálsamo dimensionam o restante do músculo na linha média por todo o comprimento em que a incisão na pele entrega a bexiga através do local da ferida incisional. Uma vez ao dia, suture através da parede posterior da bexiga e depois através da parede anterior do local da bexiga. Suturas adicionais lateralmente na bexiga não amarram essas suturas.
Quando as suturas são mantidas em delito, a bexiga terá uma configuração quadrada medindo aproximadamente um centímetro quadrado de tamanho, a bexiga longitudinalmente através da parede anterior da bexiga, logo abaixo da cúpula da bexiga ao longo da linha média. Tenha cuidado para não ter muita tensão nessas suturas, pois elas podem ser facilmente puxadas através do tecido da bexiga Para esta etapa, a ampliação da alça é preferida para a anastomose do andaime. Usando uma tesoura fina, apare o andaime de seda até a área aproximada do defeito da bexiga.
Comece em um canto do andaime e suture-o na bexiga de forma contínua. Para criar uma vedação estanque em todo o defeito, é muito importante que o cirurgião realize uma anastomose estanque sem tensão do andaime à bexiga. Isso garantirá a contenção de toda a urina dentro da bexiga, pois qualquer vazamento intraperitoneal provavelmente resultará em mortalidade animal.
Como teste, use uma agulha hipodérmica de calibre 30 para carregar a bexiga com água. Se um vazamento for encontrado, feche-o com uma sutura adicional interrompida. Em seguida, reduza a bexiga reconstruída de volta ao abdômen antes do fechamento da parede abdominal.
Injete o músculo reto e o tecido subcutâneo com bupivacaína para anestesia local e feche a incisão. Em seguida, use uma sutura contínua para reaproximar o músculo reto e feche a pele com uma sutura contínua. Após limpar e secar a incisão, transfira o animal para uma gaiola quente e limpa para despertar da anestesia.
Antes de começar, crie uma âncora na extremidade de um tubo PE 50 de 10 centímetros para que não escorregue para fora da bexiga. Faça isso queimando a extremidade do tubo, expondo-o suavemente a uma chama. Em segundo lugar, verifique se o tubo não foi ocluído.
Injete a extremidade não queimada com solução salina e certifique-se de que ela flua. Depois de preparar um animal para a cirurgia, antes de expor a bexiga, faça uma incisão de um centímetro no dorso entre a escápula. Usando a tesoura de bálsamo metson, desenvolva um plano entre a pele e o músculo subjacente.
Em seguida, coloque as pontas da tesoura no avião e espalhe-as para criar um túnel subcutâneo para o abdômen ventral. Em seguida, vire o animal. Exponha e retorne a bexiga ao abdômen.
Voltando à incisão dorsal, coloque uma pequena pinça no túnel subcutâneo. Use os dedos para proteger o conteúdo intra-abdominal e, em seguida, use as pontas da pinça para perfurar a parede abdominal. Agora, segure a extremidade lisa do tubo alargado com a braçadeira e puxe-a de volta pela incisão dorsal.
Não puxe a extremidade da âncora alargada além da parede abdominal com o tubo através da incisão. Coloque um ponto de corda na cúpula da bexiga. Deixe uma pequena braçadeira na ponta solta da sutura para que não seja puxada inadvertidamente pelo ponto.
Além disso, não puxe a sutura esticada. Agora, a agulha de calibre 18 da UE para perfurar a parede da bexiga no centro da sutura da corda da bolsa apenas o suficiente para ser intraluminal. Em seguida, coloque a pinça fina na abertura e espalhe-a suavemente para alargar o orifício.
Insira a extremidade alargada do cateter no defeito da bexiga até que seja intraluminal. Puxe a sutura do cordão da bolsa com mais força ao redor do cateter e amarre-o. Em seguida, enrole a sutura livre ao redor do cateter uma vez e amarre-o.
Agora, teste a bexiga injetando lentamente solução salina nela através do tubo. Se houver fluxo da uretra, aspire a solução salina para descomprimir a bexiga. Outra vez. Se for encontrado um vazamento, este deve ser reparado com sutura, um vazamento de urina pode resultar em mortalidade.
Feche a incisão abdominal conforme demonstrado anteriormente. Em seguida, prossiga com o fechamento da incisão dorsal. O procedimento para fechar a incisão dorsal é diferente para ratos e camundongos.
Para ratos, use uma tesoura para cortar o tubo do cateter no nível da pele. Em seguida, insira uma agulha de ponta romba de calibre 22 no tubo. Use suturas contínuas para fechar a pele sobre o tubo, deixando o cubo da agulha extrudado.
Agora coloque uma tampa intravenosa na agulha romba e prenda a ponta do cateter na pele. Depois, limpe a incisão e permita que o animal se recupere em um ambiente quente. Em camundongos, o cateter deve ser preso da seguinte forma, deixar o cateter longo e ocluir a extremidade do cateter derretendo-o com uma chama.
Enrole a extremidade do tubo e deixe-o na bolsa subcutânea no dorso do animal. Feche a pele sobre o tubo de forma contínua. Antes da análise cítrica, aguarde pelo menos cinco a sete dias de recuperação pós-operatória para ratos ou camundongos.
Após a recuperação no dia da citometria. Para camundongos, é necessário primeiro abrir a incisão dorsal sob anestesia e remover o tubo enrolado da bolsa subcutânea. Após remover o tubo, feche esta incisão e espere que o camundongo desperte completamente da anestesia antes de realizar a citometria comece colocando os animais em gaiolas metabólicas suspensas sobre escamas.
Agora acesse os cateteres suprapúbicos com uma agulha de calibre 27 conectada por meio de um ttu ao transdutor de pressão e à bomba de infusão. Comece a infusão de solução salina fisiológica. Permita que o traçado do padrão de micção se estabilize.
Nos próximos 10 a 20 minutos, a pressão da bexiga aumenta primeiro, e isso é seguido por um vazio. Em seguida, registre os ciclos de ção por 15 a 120 minutos, ou pelo menos três ou quatro ciclos de micção durante o procedimento. Fique atento a dobras do cateter e outras complicações.
Os traçados urodinâmicos podem então ser analisados para derivar parâmetros como volumes anulados, complacência, pressões miccionais de pico em contração, intervalo, tempo de ciclo miccional e volumes residuais pós-miccionais. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como aumentar a bexiga usando qualquer biomaterial. Você também saberá como avaliar a função de qualquer bexiga de roedor usando citometria consciente e desenfreada.
Este artigo descreve os estágios cirúrgicos de aumento da bexiga usando andaimes 3-D em modelos murinos e de rato. A eficácia das configurações de biomateriais para o aumento da bexiga é testada através de técnicas de cistometria em animais acordados e anestesiados.
Functional evaluation of biomaterials for bladder augmentation requires standardized animal models and cystometric analysis to assess capacity, compliance, and voiding dynamics. This approach enables preclinical de-risking of scaffold designs by linking structural properties to functional outcomes prior to large animal or clinical studies. The methodology supports target validation in urological regenerative medicine by providing quantitative, translatable readouts for go/no-go decisions in biomaterial development pipelines.
The method integrates into the discovery continuum from early biomaterial screening through lead identification to preclinical validation, providing functional data that informs progression decisions.