Geração de cardiomiócitos Humanos: Um Protocolo de Diferenciação de Feeder livres Humanos células-tronco pluripotentes induzidas

O objetivo geral deste procedimento é diferenciar cardiomiócitos humanos de células IPS humanas cultivadas em condições livres de alimentador. Isso é feito primeiro colocando as células IPS em placas de fixação ultrabaixa para formar corpos embrionários. A segunda etapa do procedimento é transferir os corpos embrionários formados para placas revestidas de gelatina.

Quando as áreas de contração aparecem, elas são dissecadas manualmente sob o microscópio estéreo e semeadas em placas revestidas de fibronectina. Para maior diferenciação, a etapa final é a obtenção de cardiomiócitos únicos por digestão enzimática de aglomerados em contração. Em última análise, os resultados podem mostrar a diferenciação de células semelhantes a cardiomiócitos que expressam marcadores estruturais típicos, ou seja, troponina cardíaca por meio de microscopia de imunofluorescência.