Estimativa Laboratório de Líquido tróficas eficiências de transferência de PCB para Lake Trout ( Salvelinus namaycush) De sua rapina

O objetivo geral do experimento a seguir é estimar as eficiências líquidas de transferência trófica de congêneres de PCB para trutas de lago de suas presas e, em seguida, determinar se o grau de cloração ou o grau de solubilidade lipídica do congênere de PCB tem efeito em sua eficiência líquida de transferência trófica. Isso é conseguido primeiro conduzindo um experimento de laboratório no qual as trutas do lago são alimentadas com um alimento natural, como o blo, por um período de pelo menos quatro meses. Como segunda etapa, a extração e limpeza são usadas para extrair os PCBs dos tecidos da truta do lago e do blo e preparar os extratos para o procedimento de quantificação.

Em seguida, a espectrometria de massa por cromatografia gasosa usando ionização química negativa é usada para determinar as concentrações de congêneres de PCB nos tecidos dos peixes. Os resultados mostram que as eficiências líquidas de transferência trófica de congêneres de PCB para trutas de lago de suas presas não são significativamente afetadas pelo grau de cloração dos congêneres de PCB. Os resultados também mostram que a atividade da truta lacustre não parece ter um efeito significativo na eficiência de transferência trófica líquida.

A principal vantagem desta técnica sobre os métodos existentes, como a injeção do contaminante diretamente nos peixes SIVs ou na comida dos peixes SIVs, é que o peixe SS acumula o contaminante de uma maneira que melhor imita o processo de acúmulo de contaminantes nos peixes selvagens em seu ambiente natural. A demonstração visual deste método é crítica, pois as etapas de concentração e extração requerem muito cuidado para serem executadas corretamente. Essas etapas são melhor aprendidas por meio da observação visual.

Demonstrando este procedimento estará Jim O'Keefe, um químico do meu laboratório. Primeiro, descongele uma quantidade adequada de presas previamente armazenadas em um freezer de 30 graus Celsius negativos. Corte a presa descongelada em pedaços pesando cerca de um a cinco gramas usando uma faca de chef.

Em seguida, pese a quantidade de presas a serem colocadas em cada um dos tanques e solte as peças em cada tanque. Depois de permitir que o peixe predador se alimente por cerca de uma hora, remova a comida comida e deixe-a secar ao ar por cerca de 20 minutos. Uma vez que o alimento une tenha sido pesado, registre a quantidade de comida colocada em cada tanque e a quantidade de comida ingerida para cada um dos tanques.

Depois de sacrificar e congelar o peixe predador, selecione um conjunto de compósitos de predadores, peixes e/ou presas para descongelamento e permita que os compósitos descongelem parcialmente usando a homogeneização de tamanho apropriado. Cada um dos compostos. Para cada compósito, coloque uma amostra de 50 a 100 gramas do homogenato em um frasco limpo, de acetona, enxaguado e rotulado.

Depois de tampar o frasco, armazene-o a 30 graus Celsius negativos até o momento do processamento para a extração. Pesar 20 gramas de tecido de peixe homogeneizado descongelado num copo de 200 mililitros, depois cerca de 40 gramas de sulfato de sódio e misturar bem com uma espátula. Adicione uma solução de espigão substituto contendo CONGÊNERES 30, 61, 161 e 166 em uma concentração que produza uma concentração final de 20 nanogramas por mililitro.

No extrato. Deixe a amostra secar à temperatura ambiente enquanto mistura A cada 20 minutos após a amostra atingir uma consistência de areia seca. Configure um aparelho de extração de soli com um frasco de 500 mililitros contendo lascas de fervura de Teflon, uma meia, sl e um condensador.

Em seguida, adicione a mistura de peixe seco a um dedal de vidro com fundo de disco grosso e frito. Adicione 150 mililitros de uma solução pré-misturada de 50% de hexano e 50% de clorometano ao copo usado para a amostra e mexa enquanto raspa as paredes do copo. Com uma espátula, transferir o solvente para o topo do solit, deixando-o percorrer o solit e entrar no frasco.

Depois de repetir o passo anterior, coloque a meia acesa com o frasco acoplado em um elemento de aquecimento e conecte um condensador. Em seguida, ligue o elemento de aquecimento, levando o solvente a uma fervura suave. Em seguida, extraia o solvente por no mínimo 16 horas, certificando-se de que a água fria seja fornecida aos condensadores.

Depois de arrefecer o solvente, verificar se algum dos frascos de amostra contém água. Para os frascos contendo água, adicione sulfato de sódio e agite até que a água seja absorvida. Em seguida, concentrar a amostra utilizando um concentrador de amostras de azoto.

Depois de a amostra ter um volume inferior a dois mililitros, transferi-la para um balão volumétrico de cinco ml. Em seguida, elevar o volume final para cinco mililitros usando cinco a sete pequenas lavagens de hexano para transferir a amostra residual da vidraria anterior para o balão volumétrico. Neste ponto, transfira a amostra para um frasco de 10 mililitros e rotule-a com as informações da amostra.

Prepare o gel de sílica acidificado adicionando 44 gramas de ácido sulfúrico concentrado a 100 gramas de gel de sílica ativado. Em seguida, adicione 10 gramas de sílica gel acidificada em uma pequena coluna de cromatografia contendo um pequeno tampão de lã de vidro na parte inferior. Após pré-limpar a coluna com 10 mililitros de hexano, adicionar um mililitro do extracto da amostra, eluir a coluna com 20 mililitros de hexano e recolher a amostra num tubo de vidro cónico de 20 mililitros.

Em seguida, coloque o tubo de vidro em um evaporador de nitrogênio ou aparelho NVAP sob uma corrente de nitrogênio e mergulhe-o em água quente. Uma vez concentrada a amostra a menos de um mililitro, transferi-la para um balão volumétrico de um mililitro. Em seguida, elevar o volume final para um mililitro usando duas a três pequenas lavagens de hexano para transferir a amostra residual do tubo para o balão volumétrico.

Em seguida, transfira a amostra para um frasco amostrador automático de 1,8 mililitro rotulado com as informações da amostra. Adicione quatro microlitros do padrão interno apropriado, que neste caso é deca cloro erva-doce ao frasco. Você usa os padrões apropriados para calibrar o instrumento.

Em seguida, configure o sistema de espectrometria de massa por cromatografia no modo de ionização química negativa com hidrogênio como gás transportador a um mililitro por minuto e metano como gás reagente. Utilizar uma coluna capilar de sílica fundida revestida com DB XLB a 0,25. Espessura do filme micrométrico para separação.

Injete um a dois microlitros da amostra usando o modo de injeção dividida. Neste ponto, analise todos os padrões e amostras pelo método do padrão interno usando erva-doce DECA chloro b marcada com carbono 13. Efectue uma verificação da calibração inicial executando um segundo padrão de fonte e seta Chlor 1242 e 1260 e, em seguida, compare os valores previstos para os congéneres de cloro de seta com as quantidades observadas a partir deste procedimento de verificação.

Uma vez que o procedimento de calibração inicial tenha sido realizado com sucesso, conclua a análise de todas as amostras. Execute uma verificação de calibração a cada 10 amostras usando qualquer uma das misturas de calibração da calibração inicial. A truta do lago Tre mostrou um crescimento substancial como a truta inicial do lago.

Os pesos médios variaram de 694 a 907 gramas, enquanto os pesos médios finais da truta do lago variaram de 853 a 1.566 gramas. As concentrações médias de congêneres de PCB na truta do lago aumentaram durante o experimento para todos os congêneres de PCB. A eficiência média de transferência trófica líquida para a truta ativa não diferiu significativamente da truta inativa.

truta ativa do lago reteve os congêneres de PCB dos alimentos que consumiram com quase a mesma eficiência que a truta inativa do lago para 66 dos 75 congêneres de PCB. O erro padrão sobre a estimativa média da eficiência líquida de transferência trófica foi pequeno para seis dos nove outros congêneres de PCB. Os erros padrão sobre a estimativa média da eficiência líquida de transferência trófica foram bastante baixos, pois as estimativas aumentadas do grau de cloração da eficiência líquida de transferência trófica mostraram uma ligeira diminuição.

No entanto, a eficiência de transferência trófica líquida não variou significativamente com o grau de cloração dos congêneres de PCB AS log KOW aumentou, a eficiência de transferência trófica líquida diminuiu exponencialmente. Essa taxa de declínio foi significativamente diferente de zero, mas foi igual a 7% por unidade de log KOW. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como estimar as eficiências de transferência trófica líquida de congêneres CB para peixes ous de suas presas usando um experimento de laboratório no qual o peixe ous é alimentado com um alimento natural.

Não se esqueça de que trabalhar com solventes orgânicos, como hexano e di clorometano, pode ser perigoso e precauções como ventilação adequada devem sempre ser tomadas ao realizar este procedimento.