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DOI: 10.3791/51702-v
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Um vórtice microfluídico plataforma eletroporação assistida foi desenvolvido para entrega seqüencial de múltiplas moléculas em populações de células idênticas, com controle de dosagem precisa e independente. Tamanho com base etapa de purificação de células alvo eletroporação anterior do sistema auxiliado para aumentar a eficiência de entrega molecular e viabilidade celular processado.
O objetivo geral deste procedimento é fornecer vários tipos de moléculas biologicamente significativas de maneira sequencial e controlável por dosagem com alta eficiência usando o porer microfluídico assistido por vórtice, isso é realizado preparando primeiro quatro tubos de centrífuga de 50 mililitros contendo individualmente soluções de DPBS com células e biomoléculas, e anexando cada tubo ao seu respectivo suporte de frasco conectado ao sistema de controle de fluxo pneumático. O segundo passo é inserir os tubos de entrada de cada frasco respectivo no dispositivo microfluídico com os eletrodos de 15 pinos embutidos. Em seguida, as células são fluídas para o dispositivo, onde ficam presas em vórtices de microescala formados nas câmaras de eletroporação.
A etapa final é aplicar pulsos elétricos curtos nas células presas, seguida pela injeção das soluções contendo as biomoléculas a serem entregues no citosol. Em última análise, as células obtidas desse processo podem ser liberadas e coletadas para análise a jusante. A principal vantagem desta técnica sobre os métodos existentes é que a técnica proposta é capaz de fornecer sequencialmente uma quantidade controlada de múltiplas moléculas em uma população de células idênticas pré-selecionada com alta eficiência e viabilidade.
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