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Microescala Electroporator para entrega Sequential Molecular assistida por Vortex
Microescala Electroporator para entrega Sequential Molecular assistida por Vortex
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JoVE Journal Bioengineering
Microscale Vortex-assisted Electroporator for Sequential Molecular Delivery

Microescala Electroporator para entrega Sequential Molecular assistida por Vortex

Full Text
9,031 Views
10:51 min
August 7, 2014

DOI: 10.3791/51702-v

Dwayne A. L. Vickers1, Soojung Claire Hur1

1The Rowland Institute,Harvard University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Um vórtice microfluídico plataforma eletroporação assistida foi desenvolvido para entrega seqüencial de múltiplas moléculas em populações de células idênticas, com controle de dosagem precisa e independente. Tamanho com base etapa de purificação de células alvo eletroporação anterior do sistema auxiliado para aumentar a eficiência de entrega molecular e viabilidade celular processado.

O objetivo geral deste procedimento é fornecer vários tipos de moléculas biologicamente significativas de maneira sequencial e controlável por dosagem com alta eficiência usando o porer microfluídico assistido por vórtice, isso é realizado preparando primeiro quatro tubos de centrífuga de 50 mililitros contendo individualmente soluções de DPBS com células e biomoléculas, e anexando cada tubo ao seu respectivo suporte de frasco conectado ao sistema de controle de fluxo pneumático. O segundo passo é inserir os tubos de entrada de cada frasco respectivo no dispositivo microfluídico com os eletrodos de 15 pinos embutidos. Em seguida, as células são fluídas para o dispositivo, onde ficam presas em vórtices de microescala formados nas câmaras de eletroporação.

A etapa final é aplicar pulsos elétricos curtos nas células presas, seguida pela injeção das soluções contendo as biomoléculas a serem entregues no citosol. Em última análise, as células obtidas desse processo podem ser liberadas e coletadas para análise a jusante. A principal vantagem desta técnica sobre os métodos existentes é que a técnica proposta é capaz de fornecer sequencialmente uma quantidade controlada de múltiplas moléculas em uma população de células idênticas pré-selecionada com alta eficiência e viabilidade.

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