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DOI: 10.3791/57636-v
Anaïs Bouissou*1, Amsha Proag*1, Marion Portes1, Vanessa Soldan2, Stéphanie Balor2, Christophe Thibault3,4, Christophe Vieu3,4, Isabelle Maridonneau-Parini1, Renaud Poincloux1
1Institut de Pharmacologie et Biologie Structurale,IPBS, Université de Toulouse, CNRS, UPS, 2METi, 3CNRS, LAAS, 4Univ de Toulouse, INSA
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Aqui, detalhamos as técnicas experimentais utilizadas para avaliar as forças de saliência que podosomes aplicar sobre um filme compatível, desde a preparação do filme para a análise automatizada de imagens topográficas.
O objetivo geral deste procedimento é quantificar as forças de protrusão usando microscopia de força atômica. Isso é feito primeiro preparando as grades revestidas com fórmula e medindo a espessura desse filme. A terceira etapa desse processo consiste em assentar as células nas grades e deixá-las aderir.
A etapa final do procedimento é obter imagens do filme sob as células usando microscopia de força atômica. Ao aderir ao substrato, os micrófagos formam estruturas de adesão submicrométricas chamadas podossomos. Por fim, a deformação do filme utilizado pelos podossomos será quantificada e convertida em forças usando um modelo mecânico caseiro.
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