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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Isolation of Glomeruli and In Vivo Labeling of Glomerular Cell Surface Proteins

Isolamento de glomérulos e In Vivo de rotulagem das proteínas de superfície celular Glomerular

Full Text
10,042 Views
09:12 min
January 18, 2019

DOI: 10.3791/58542-v

Eva Königshausen1, Sebastian A. Potthoff1, Raphael Haase1, Catherine Meyer-Schwesinger2, Ernest Kaufmann1, L. Christian Rump1, Johannes Stegbauer1, Lorenz Sellin1, Ivo Quack1, Magdalena Woznowski1

1Department of Nephrology, Medical Faculty,Heinrich-Heine-University, 2Institute of Cellular and Integrative Physiology,University Medical Center Hamburg-Eppendorf

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Aqui nós apresentamos um protocolo para murino na vivo rotulagem das proteínas de superfície celular glomerular com biotina. Este protocolo contém informações sobre como perfundir os rins do rato, isolar glomérulos e executar endógena imunoprecipitação da proteína de interesse.

Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave no campo da nefrologia sobre o papel do tráfico de proteínas superficiais celulares na doença renal proteinúrica e não proteinúrica. As principais vantagens dessa técnica são que facilita o estudo do tráfico de proteínas superficiais celulares in vivo e que mais de uma proteína pode ser analisada por experimento. Embora este método possa fornecer informações sobre o tráfico de superfície celular glomerular, também pode ser aplicado a outros sistemas de órgãos que são perfumados e são acessíveis por técnicas de isolamento.

Comece confirmando a falta de resposta ao aperto do dedo do dedo do dedo do dedo e desinfetando o lado ventral do mouse anestesiado com isopropílico de 70%. Faça um corte mediano através da pele da pelve para o esterno e use pinças para remover a pele da fáscia abdominal. Corte a pele em ambos os lados da linha média abdominal e faça um médio através da camada muscular abdominal da bexiga para o xiphoide.

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