Criação de dois aneurismas saculares digeridos por elastase com hemodinâmicas diferentes em um coelho

Nosso protocolo descreve uma técnica reprodutível para criar um modelo de aneurismas de coelho com hemodinâmica de coto e bifurcação e condição de parede degenerada em um único animal e durante uma única abordagem cirúrgica com baixas taxas de morbidade e mortalidade e altas taxas de perviedade. O modelo permite uma comparação direta do curso natural dos aneurismas saculares em relação ao papel da hemodinâmica, bem como o teste de dispositivos endovasculares em duas configurações distintas de aneurisma e condição de fluxo. A principal desvantagem deste método permanece a mesma que para a criação do modelo clássico de bifurcação e aneurismas de coto, a necessidade de equipamentos laboratoriais sofisticados e habilidades microcirúrgicas específicas.

Use um bisturi para fazer uma incisão mediana da pele do osso hioide até 1,5 centímetros caudal para o esterno manúbrio. Prepare o tecido subcutâneo e adiposo da incisão medial enquanto realiza hemostasia meticulosa. Liberte o músculo esternocefálico do tecido conjuntivo aderente e aplique a lidocaína topicamente para evitar a mioclonia.

Exponha a artéria carótida comum direita, ou CCA, medialmente do músculo esternocefálico e mantenha-a molhada com cotonetes molhados. Prepare as partes lateral e proximal do músculo esternocefálico e recrai-o medialmente com uma alça do vaso para expor o CCA. Identifique a veia jugular externa e proteja-a com um micro cotonete molhado.

Dissecar o tecido conjuntivo cuidadosamente ao longo do CCA até a bifurcação do tronco braquiocefálico para expor a artéria. Se pequenos ramos estão emergindo da artéria, coagule-os com o cauterizador. Aplique dois clipes temporários, com o primeiro na origem do CCA e o segundo dois centímetros distal dele.

Coloque uma almofada de borracha sob o recipiente e enxágue com cloridrato de papaverina para vasodilatação. Remova a adventícia cuidadosamente usando microtesouras. Realize uma arteriotomia abaixo do clipe distal com um cateter de quatro calibres 22 e insira o cateter caudalmente até o clipe proximal.

Lavar o segmento por via intraluminal com cloreto de sódio heparinizado até que não haja sangue visível. Em seguida, fixe o cateter com uma ligadura 4-0. Através do cateter, injete de 0,1 a 0,2 mililitros de elastase no segmento da artéria e incube por 20 minutos.

Após 20 minutos de tempo de incubação com elastase, limpe a solução de elastase e troque a seringa para enxaguar o segmento da artéria cerca de 10 vezes com solução salina a 0,9%. Aplicar duas ligaduras, sendo a primeira a cinco milímetros distal do clipe proximal e a segunda apenas proximalmente sob a arteriotomia. Corte o vaso a cerca de três milímetros acima da primeira ligadura e mais uma vez entre a segunda ligadura e o clipe distal.

Manter este enxerto autólogo em solução heparinizada até a criação do aneurisma de bifurcação. Abra cuidadosamente o primeiro clipe proximal e meça o aneurisma. Para criar um aneurisma de bifurcação, remova a adventícia com cuidado e faça cerca de uma incisão longitudinal de dois milímetros lateralmente no coto da CCA direita.

Aplique dois clipes temporários no CCA esquerdo para delimitar o segmento de cerca de um centímetro e remova a adventícia no meio. Realize uma arteriotomia com uma agulha de calibre 23. Em seguida, lave o segmento com cloreto de sódio heparinizado.

Aumente a arteriotomia usando microtesoura para cerca de quatro a cinco milímetros para permitir a sutura do CCA direito e da bolsa de aneurisma. Para a realização da anastomose, sutura da parede posterior proximal da carótida direita com cinco pontos, iniciando-se na borda proximal da arteriotomia na CCA esquerda. Em seguida, suture a parte de trás da bolsa de aneurisma com quatro a cinco pontos, começando na borda distal da arteriotomia na CCA esquerda.

Continue com a parte de trás distal ao nível da incisão da boca do peixe até a sutura com a parte traseira vertical do enxerto de aneurisma com três pontos. Suture a parte frontal da incisão da boca do peixe com três pontos, começando para cima e movendo-se para baixo. Finalize com a sutura frontal entre a CCA esquerda e frontal do enxerto de aneurisma e a CCA direita com cerca de seis pontos.

Antes de terminar a anastomose, enxaguar os vasos com solução salina heparinizada a 0,9% por via intraluminal. Remova o clipe no CCA direito enquanto pressiona a anastomose com os micro cotonetes para hemostasia. Em seguida, continue removendo o clipe distal do CCA esquerdo.

Se não houver sangramento maior, continue retirando o clipe proximal no CCA esquerdo para permitir o fluxo sanguíneo. No seguimento, a perviedade do aneurisma foi confirmada por angiografia por ressonância magnética. Uma sequência TOF tridimensional adquirida com uma ressonância magnética de três teslas focada nas artérias do pescoço é mostrada.

O aneurisma do coto é observado na artéria subclávia direita, e o aneurisma de bifurcação é observado na bifurcação criada pela anastomose da CCA direita na artéria subclávia esquerda. A perviedade do aneurisma também foi confirmada pela inspeção macroscópica após a extração tecidual. Os sulcos principais no clipe indicam um milímetro e os sulcos menores indicam 0,5 milímetros.

A análise microscópica dos aneurismas de coto e bifurcação foi realizada após coloração das amostras com hematoxilina-eosina. Duas etapas são críticas durante a cirurgia, primeiro, a exposição e dissecção da artéria carótida direita até o tronco braquiocefálico e, segundo, a proteção de estruturas vitais como traqueia, veia jugular e nervo laríngeo.