Estabelecimento simples de um nicho osteogênico vascularizado da medula óssea usando hidrogéis pré-moldados de poli(etilenoglicol) (PEG) em uma microplaca de imagem
Simple Establishment of a Vascularized Osteogenic Bone Marrow Niche Using Pre-Cast Poly(ethylene Glycol) (PEG) Hydrogels in an Imaging Microplate
Estabelecimento simples de um nicho osteogênico vascularizado da medula óssea usando hidrogéis pré-moldados de poli(etilenoglicol) (PEG) em uma microplaca de imagem
A maioria dos estudos de vascularização in vitro utiliza matrizes derivadas naturalmente. Embora tipicamente muito condutor de processos biológicos, sua atividade biológica inerente complica o estudo de influências de parâmetros únicos. Aqui, podemos adicionar seletivamente nossos jogadores de interesse e avaliar como o sistema muda.
A semeadura sequencial de células em nossos hidrogéis sintéticos de ardósia em branco permite a formação de nichos muito definidos. Aqui, os hBMMSs colonizam os hidrogéis e depositam sua matriz extracelular inerente. Isso fornece o substrato para as células endoteliais subsequentemente semeadas.
Esta característica não é comumente encontrada em outros modelos 3D in vitro. A possibilidade de adicionar diferentes tipos celulares sequencialmente permite a criação de modelos in vitro compatíveis com alto rendimento e grande complexidade. Esses modelos podem ser adaptados para gerar nichos vascularizados osteogênicos mais específicos e investigar as funções de atores celulares e moleculares.
Summary
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Um modelo in vitro do nicho vascular da medula óssea é estabelecido pela semeadura de células mesenquimais e endoteliais em hidrogéis pré-moldados de PEG 3D. As redes endoteliais, os componentes da MEC e a atividade da FA dos nichos variam dependendo do fator de crescimento utilizado. A plataforma pode ser usada para modelos avançados de câncer.
Krattiger, L. A., Mitsi, M., Simona, B. R., Ehrbar, M. Simple Establishment of a Vascularized Osteogenic Bone Marrow Niche Using Pre-Cast Poly(ethylene Glycol) (PEG) Hydrogels in an Imaging Microplate. J. Vis. Exp. (195), e65413, doi:10.3791/65413 (2023).