Sequenciamento de Amplicon usando as tecnologias de sequenciamento de leitura longa

Investigo se o sequenciamento portátil de leitura longa pode fornecer resultados de suscetibilidade à tuberculose resistentes a medicamentos em ambientes com recursos limitados, com precisão comparável ao método dos padrões ouro, avançando diagnósticos acessíveis e de alta qualidade para tuberculose. Utilizando sequenciamento direcionado de próxima geração como ferramenta diagnóstica para tuberculose resistente a medicamentos, oferecendo um perfil abrangente de resistência diretamente de amostra clínica sem expertise em bioinformática. Nosso protocolo, utilizando sequenciamento de leituras longas, tem potencial para fornecer tempos de resposta mais rápidos, fluxo de trabalho mais simples do que na detecção de resistência em tempo real, facilitando diagnósticos abrangentes de TB e aprimorando o rastreamento de surtos em ambientes com recursos limitados e infraestrutura mínima.

Para começar, calcule 100 nanogramas de cada amostra de amplicão com base na concentração e transfira o volume necessário para um tubo PCR limpo. Para determinar a massa total dos amplicons na amostra, use a fórmula fornecida. Ajuste o volume total de cada amostra para 12,5 microlitros usando água sem nuclease.