RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
pt_BR
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/69588-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Aqui, apresentamos um protocolo para automatizar a análise de modificação pós-translacional de histonas de célula única usando uma estratégia de rotulagem isotópica de dois plexos e digestão com ArgC. Esse fluxo de trabalho permite um perfil quantitativo, reproduzível e de alta sensibilidade da heterogeneidade da cromatina e respostas epigenéticas em resolução de célula única.
Estamos avançando a proteômica de célula única com um método automatizado de multiplexação para estudar a heterogeneidade global da cromatina para modificações pós-traducionais. O que torna esse protocolo desafiador é a preparação proteômica em escala picograma, a marcação multiplex, bem como a resolução de peptidos histonas modificados combinatórios complexos. Para começar, reconstitua as células hepatocelulares do carcinoma Hep G2/C3A em uma concentração final de 200 a 500 células por microlitro em PBS gelado.
Ajuste a largura de pulso e a tensão de acionamento de cada bico nos valores fornecidos pelo fabricante. Para máxima eficiência do captador, certifique-se de que o deslocamento Z entre os dois bicos diferia em menos de 50 micrômetros. Identifique a posição ótima de contato para cada bico e compare as leituras de altura Z na aba de configuração do bico.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
24:02
Related Videos
18.8K Views
08:34
Related Videos
19.2K Views
11:02
Related Videos
30.5K Views
10:41
Related Videos
10.9K Views
09:43
Related Videos
22.2K Views
08:04
Related Videos
4K Views
06:24
Related Videos
4.2K Views
08:12
Related Videos
4.5K Views
05:52
Related Videos
1.7K Views
08:53
Related Videos
1K Views