Спаривание и стадирование яиц: метод получения эмбрионов и их сортировки по стадиям развития

0 просмотров2:52 мин • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- Начните с емкости для случки, емкости со съемной вставкой, которая позволяет яйцам проваливаться сквозь них. Добавьте двух самцов и трех взрослых самок рыб в разделенный брачный аквариум вечером перед сбором эмбрионов, чтобы они акклиматизировались друг к другу на ночь.

На следующее утро пересадите рыб в новый резервуар для спаривания, содержащий воду из системы, и снимите разделитель. Подождите от 15 до 30 минут, чтобы дать рыбе время для спаривания и нереста.

Теперь соберите эмбрионы и храните их в чашке Петри, содержащей среду для эмбрионов Хэнка. Выращивайте их при температуре 28,5 градусов по Цельсию на протяжении всего протокола. Изучите морфологию эмбрионов под исследуемым микроскопом.

Вы заметите несколько особенностей развития. Расщепление бластодиска приводит к образованию нескольких клеток. Бластодерма имеет форму перевернутой чашечки над желточной клеткой. Параксиальные сегменты мезодермы развиваются на дорсальной части эмбриона и так далее.

Через 24 часа после оплодотворения просто отсортируйте эмбрионы по общей длине тела. В примере протокола мы настроим спаривание трансгенных рыб-репортеров mCherry и отсортируем полученные эмбрионы.

- Для начала культивируйте эмбрионы до трехмесячного возраста, который является репродуктивной зрелостью. Отделите двух взрослых самцов и трех самок рыб от нужного штамма в отдельные брачные резервуары с пресной водой системы вечером накануне сбора эмбрионов. На следующее утро после того, как зажгется свет, снимите разделитель и дайте рыбам спариваться естественным образом, пока на дне аквариума не будут замечены эмбрионы.

Соберите эмбрионы с интервалом в 30 минут и разделите чашки Петри с эмбриональной средой до тех пор, пока не будет собрано нужное количество. Чтобы определить стадию эмбрионов, культивируйте их в группах от 50 до 75 на 10-сантиметровую чашку Петри, чтобы обеспечить согласованное время развития всех эмбрионов. Затем держите тарелки при температуре 28,5 градусов по Цельсию.

Измерьте возраст эмбриона с помощью сомитного числа после сегментации примерно через 24 часа после оплодотворения или HPF и разделите эмбрионы в зависимости от возраста развития.

13:01

Использование Light Sheet флуоресцентной микроскопии для изображения развития данио глаз

Похожие видео

0 Просмотры

10:38

Поколение парабиотического эмбрионов данио рерио хирургическим путем Fusion разработки Blastulae

Похожие видео

0 Просмотры

08:55

Визуализация сотовой электрической активности в Zebrafish ранних эмбрионов и опухоли

Похожие видео

0 Просмотры

08:22

Сбор и подготовка Drosophila Эмбрионы для Электрофизиологические Запись и другие процедуры

Похожие видео

0 Просмотры

13:48

Живая Препарирование Drosophila Эмбрионы: Упрощенная методы скрининга Мутант Коллекции антител Окрашивание

Похожие видео

0 Просмотры

11:02

Хроматин Иммунопреципитация Пробирной для тканеспецифические Гены использованием ранней стадии эмбрионы мыши

Похожие видео

0 Просмотры

11:56

Генерация Мыши, полученные из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток

Похожие видео

0 Просмотры

08:43

Убыт- и Gain-оф-функции подход к расследованию Early Cell Судьба определителям предимплантационной эмбрионов мыши

Похожие видео

0 Просмотры

11:19

Плоидность Манипуляция эмбрионов данио рерио с теплового шока 2 Лечение

Похожие видео

0 Просмотры

10:35

Поколение генома общесистемной Chromatin конформации захвата библиотек из плотно поставил раннего дрозофилы эмбрионов

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 1 августа 2026