Контрастность Enhanced Imaging судна использованием MicroCT

Целью данной методики визуализации сосудов с контрастным усилением с помощью микроскопической компьютерной томографии или микрокомпьютерной томографии является обеспечение оптимального метода для получения высококачественных наборов данных для анализа сосудистых сеток у живых мышей. Это достигается путем внутривенного введения рентгеноконтрастного контрастного вещества in vivo. Затем животное подготавливают к микрокомпьютерной томографии путем введения анестезии и безопасного позиционирования животного в мультимодальной камере для уменьшения артефактов движения во время микрокомпьютерной томографии.

После сканирования данные микрокомпьютерной томографии реконструируются и загружаются в программное обеспечение для визуализации. Заключительным этапом процедуры является корректировка параметров функции двумерного переноса для улучшения видимости кровеносных сосудов и придания различных цветов кровеносным сосудам, костям и мягким тканям с целью различения. В конечном счете, могут быть получены результаты, которые показывают сосудистую сеть у живых животных с помощью КТ, непрозрачной контрастной визуализации и рендеринга двумерной функции переноса.

Здравствуйте, меня зовут Сью Реш, PJA Patti из Центра визуализации мелких животных в отделении Института исследований детского рака Кхе в Центре медицинских наук Техасского университета, Сан-Антонио. Меня зовут Чарльз Келлер, я также работаю в Научно-исследовательском институте детского рака Грихи при Центре медицинских наук Техасского университета в Сан-Антонио. Сегодня мы покажем вам процедуру визуализации кровеносных сосудов у живых животных с помощью рентгеноконтрастного вещества для бассейна крови.

Мы используем эту процедуру в наших лабораториях для изучения промежуточных и крупных сосудов сложных спонтанных опухолей у наших трансгенных мышей. Итак, приступим. Чтобы начать эту процедуру, получите 0,2 миллилитра на 20 грамм 20 миллиграммов йода на миллилитр йодированной крови Контрастное вещество Xia one 60 xl с помощью низкого мертвого пространства 28 и половины куб.см инсулинового шприца.

Введите контрастное вещество живой мыши через дистальную хвостовую вену. Через 10 минут после инъекции. Подготовьте животных к микрокомпьютерной томографии.

Во-первых, обезболите животных в акриловой коробке, соединенной с 2% изофтора в 100% кислороде со скоростью 2,5 литра в минуту. Через несколько минут выполните щипнение пальцев ног, чтобы убедиться в глубине анестезии. Затем, чтобы свести к минимуму артефакты движения, стабилизируйте мышь, поместив ее в специально построенную, коммерчески доступную мультимодальную камеру с возможностью подачи воздуха и выхлопа.

Поддерживайте подачу воздуха с содержанием 2% изофтора и 100% кислорода, чтобы обеспечить непрерывную анестезию животного во время сканирования. После того, как мышь подготовлена, ее можно отсканировать на микрокомпьютерной томографии, способной выполнять сканирование живых животных. Подсоедините мультимодальную камеру, в которой находится мышь, к вытяжным трубкам для побегов.

С помощью объемного компьютерного томографа GE Explorer locus животное можно отсканировать с разрешением 93 микрометра. В этом объемном сканере используется ПЗС-детектор 3,500 на 1750 для реконструкции конусного луча Feld Camp, который задает независимые от платформы параметры постоянными при токе 450 микроампер, напряжении DP килонапряжения и времени экспозиции 100 миллисекунд. Для достижения превосходного контраста между костными и мягкими тканями сосуда стандартные параметры могут варьироваться от пяти до восьми кадров на изображение и от 360 до 720 снимков для полного поворота на 360 градусов, используя общее время сканирования примерно от 15 до 20 минут после компьютерной томографии.

Реконструируйте изображения с помощью запатентованного производителем программного обеспечения EVS beam. Продолжайте следить за мышью до тех пор, пока она полностью не оправится от анестезии. После реконструкции данные микрокомпьютерной томографии могут быть использованы для усовершенствования одномерной или двумерной функции переноса изоповерхности.

Рендеринг изображений с помощью программного обеспечения SEG для обработки 3D-изображений для рендеринга двухмерной проекции трехмерного набора данных использует функцию двумерного переноса, которая еще больше улучшает различие между сосудом и костью. Во время рендеринга изображения назначайте цвета и непрозрачность образцу луча на основе передаточной функции, которая, в свою очередь, зависит от значения CT и величины градиента. Вручную настраивайте передаточные функции на основе гистограмм значений ТТ, чтобы выделить отображаемые области и объекты, представляющие интерес.

Вот репрезентативные результаты, показывающие отображение двумерной функции переноса на микрокомпьютерной томографии мыши дикого типа, введенной Xia one 60 xl. Мы только что показали, как генерировать высококачественные наборы данных для анализа сосудистых сетей у живых мышей. Этот метод вполне может быть использован для качественной и количественной оценки антиангиогенеза в доклинических исследованиях с использованием как трансгенных, так и ксенотрансплантатных мышей.

При выполнении этой процедуры важно помнить о необходимости идеальной инъекции контрастного вещества в хвостовую вену и расположить животное таким образом, чтобы свести к минимуму артефакт движения, который может возникнуть из-за дыхания. Вот и все. Спасибо за просмотр и удачи в ваших экспериментах.