Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 2:40 мин. • August 29th, 2025
Начните с седалищного нерва, изолированного от мыши.
Нейроны внутри нерва были трансфицированы для экспрессии флуоресцентных цитоплазматических белков.
Нерв был раздавлен, чтобы вызвать травму, на которую был наложен шов.
Поврежденные сегменты аксонов на участке вырождаются, а рекрутированные макрофаги очищаются от обломков.
Шванновские клетки пролиферируют, образуя направляющие пути и секретируя нейротрофические факторы, способствующие росту аксонов. Аксоны проходят по этим дорожкам, регенерируя нерв.
Зафиксируйте нерв, чтобы сохранить клеточные структуры, затем удалите все прикрепленные ненейрональные ткани.
Промойте буфером для устранения остатков фиксаторов.
Расположите нерв на предметном стекле микроскопа, нанесите монтажную среду и установите покровное стекло.
Расплющите нерв, чтобы расположить аксоны в одной фокальной плоскости для визуализации.
С помощью эпифлуоресцентного микроскопа проследите аксоны от места раздавливания до их дистальных концов, чтобы
измерить продолжительность регенерации.
Отделите DRG вместе с нервными корешками и седалищным нервом, осторожно с помощью микроножниц и микрощипцов под микроскопом для вскрытия.
Затем переведите седалищный нерв непосредственно в 4% PFA
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео