Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:10 мин. • November 28th, 2025
Возьмём микрофлюидное устройство, состоящее из впускной трубки, соединённой с микрофлюидной камерой, состоящей из пористых каналов для перемещения бактерий.
Камера подключена к наблюдательной камере, которая подключена к шприцовому насосу через выходную трубку.
Насытите камеры буфером, чтобы удалить пузырьки воздуха.
Поставьте устройство на ступень микроскопа и разместите объективную линзу над наблюдательной камерой.
Настройте настройки микроскопа, чтобы чётко визуализировать отдельные бактериальные клетки.
Поместите впускную трубку в суспензию с флуоресцентно маркированными бактериями.
Запустите поток, чтобы привлечь бактерии в микрофлюидную камеру, где они проходят через пористые каналы и попадают в наблюдательную камеру.
Сфотографируйте наблюдательную камеру с регулярными интервалами.
Сгенерировать кривую прорыва, которая отражает долю бактерий, проходящих через пористую матрицу со временем.
Вынимите микрофлюидик из вакуума и поместите его на стадию микроскопа. Используйте шприцовый насос, чтобы насытить его буфером подвижности.
Используя микроскопию Брайтфилда или фазовый контраст, отрегулируйте увеличение для визуализации отдельных бактериальных клеток и фокусируйтесь на центре наблюдательного канала. Переключите настройки света на флуоресцентную микроскопию. Регулируйте фокус через смещение и время экспозиции камеры, чтобы отделить отдельные бактериальные клетки, в данном случае — 100 миллисекунд.
Затем вставьте впускную трубку в двухмиллилитровую трубку с бактериальной суспензией. Поменяйте направление работы насоса и начните снимать подвеску с расходом один микролитр в минуту.
Просканируйте весь канал наблюдения, записывая изображение каждую минуту.