Оценка подвижности бактерий с помощью микрофлюидного устройства

Возьмём микрофлюидное устройство, состоящее из впускной трубки, соединённой с микрофлюидной камерой, состоящей из пористых каналов для перемещения бактерий.

Камера подключена к наблюдательной камере, которая подключена к шприцовому насосу через выходную трубку.

Насытите камеры буфером, чтобы удалить пузырьки воздуха.

Поставьте устройство на ступень микроскопа и разместите объективную линзу над наблюдательной камерой.

Настройте настройки микроскопа, чтобы чётко визуализировать отдельные бактериальные клетки.

Поместите впускную трубку в суспензию с флуоресцентно маркированными бактериями.

Запустите поток, чтобы привлечь бактерии в микрофлюидную камеру, где они проходят через пористые каналы и попадают в наблюдательную камеру.

Сфотографируйте наблюдательную камеру с регулярными интервалами.

Сгенерировать кривую прорыва, которая отражает долю бактерий, проходящих через пористую матрицу со временем.

Вынимите микрофлюидик из вакуума и поместите его на стадию микроскопа. Используйте шприцовый насос, чтобы насытить его буфером подвижности.

Используя микроскопию Брайтфилда или фазовый контраст, отрегулируйте увеличение для визуализации отдельных бактериальных клеток и фокусируйтесь на центре наблюдательного канала. Переключите настройки света на флуоресцентную микроскопию. Регулируйте фокус через смещение и время экспозиции камеры, чтобы отделить отдельные бактериальные клетки, в данном случае — 100 миллисекунд.

Затем вставьте впускную трубку в двухмиллилитровую трубку с бактериальной суспензией. Поменяйте направление работы насоса и начните снимать подвеску с расходом один микролитр в минуту.

Просканируйте весь канал наблюдения, записывая изображение каждую минуту.