Мультианалитный иммуногранулатический анализ: метод проточного иммуноанализа для одновременного обнаружения нескольких подтипов антител в образце сыворотки крови человека
Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 4:45 мин. • July 8th, 2025
Мультианалитный иммуношариковый анализ использует несколько микросфер, покрытых антигенами, для одновременного распознавания соответствующих антител-мишеней.
Для начала этого анализа возьмите смесь микрошариков в пробирке, содержащей соответствующий буфер. Каждая бусина покрыта определенным антигеном на своей поверхности, что позволяет легко дифференцировать бусины друг от друга.
Пипеткой нанесите покрытую оболочкой смесь иммуногранул в лунки микротитрового аналитического планшета. Дополните лунки образцом сыворотки, содержащим различные изотипы антител-мишеней. Эти варианты имеют незначительные различия в структуре, что позволяет каждой лунке иметь несколько первичных антител.
Инкубация, позволяющая изотипам антител образца прикрепляться к специфическим антигенам, захваченным на соответствующих иммуногранулах. Промойте пробирным буфером для удаления несвязанных первичных антител. Добавьте в лунку вторичные антитела, меченные флуоресцентным красителем, соответствующие каждому варианту первичного антитела.
Каждое меченое вторичное антитело связывается с Fc-сайтом соответствующего первичного антитела. Множественные захваченные гранулами комплексы антиген-первичные антитела флуоресцен
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео