Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 6:25 мин. • July 8th, 2025
Для количественного определения специфического белка в лизате мозга мыши с помощью электрохемилюминесценции, ЭКЛ, иммуноферментного анализа начинают с многолуночного аналограммного планшета.
Скважины состоят из токоведущих рабочих и противоэлектродов, замыкающих электрическую цепь. Диэлектрический слой разделяет электроды, повышая чувствительность анализа.
Добавьте в лунки первичные мышиные моноклональные антитела против целевого белка. Рабочие электроды, обладая большей связывающей способностью, облегчают иммобилизацию антител на них.
Инкубировать с белоксодержащим раствором, связываясь с оставшимися связующими поверхностями лунки, уменьшая фоновую интерференцию.
Добавьте лизат ядерной фракции мозга мыши. Целевой белок в лизате специфически связывается с моноклональными антителами.
Добавьте немеченые поликлональные антитела, узнавающие и связывающиеся с эпитопами на белке, который связывается с первичными моноклональными антителами на электроде. Добавьте специфические вторичные антитела, меченные комплексом рутения, связывающиеся с немечеными антителами. Добавьте подходящий буфер, содержащий поверхностно-активное вещество, обеспечивающее подходящую среду для генерации ECL, и трипр
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео