Выделение Т-клеток на основе флотации с использованием сортировки клеток, активируемых плавучестью

Чтобы изолировать Т-клетки — белые кровяные клетки, необходимые для иммунной системы — с помощью сортировки клеток, активируемых плавучестью, BACS, берут суспензию мононуклеарных клеток периферической крови, PBMCs. PBMC содержат целевые Т-клетки и нецелевые клетки, такие как В-клетки, моноциты, естественные киллеры и дендритные клетки.

Добавьте буфер, содержащий достаточное количество биотинилированных анти-CD3 антител, и инкубируйте в течение необходимого времени. Антитело связывается с комплексом CD3 — мультимерным белковым комплексом на поверхности клетки, что является определяющей особенностью Т-клеток.

Добавьте функционализированные микропузырьки — мелкие сферические частицы, покрытые стрептавидином — для положительного отбора Т-клеток, связанных с антителами. Ядро каждого микропузырька представляет собой полую сферу, что делает их частицами низкой плотности, способными плавать в водном растворе.

Инкубируйте смесь при перемешивании, давая микропузырькам и образцу тщательно перемешаться. Во время инкубации стрептавидин на микропузырьках связывается с биотином на Т-клеточном антителе, иммобилизуя клетки на микропузырьках.

Центрифугируйте пробирку. Нецелевые ячейки отделяются от