Выделение нескольких типов клеток из мозга мыши путем механической гомогенизации
Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 3:27 мин. • July 8th, 2025
Начните с размещения компонентов измельчителя на льду. Это устройство включает в себя ступку и два пестика разного диаметра.
Насыпьте в раствор охлажденный солевой буфер, а затем добавьте мозговую ткань мыши.
Буфер поддерживает осмотический баланс, сохраняя структуру и функцию клеток.
Измельчите ткань несколькими легкими движениями с помощью пестика меньшего диаметра, который механически разрезает ткань на более мелкие кусочки.
Далее ударьте пестиком большего диаметра, способствуя дальнейшему расщеплению ткани на составляющие ее клетки.
Переложите смесь в пробирку и центрифугу.
Удалите надосадочную жидкость.
Добавьте охлажденную соль в буфер и сделайте воркс, чтобы разбить клеточные комки и миелин.
Далее добавляем градиент плотности среды и центрифугу.
Из-за различий в форме и массе клетки будут селиться в нижнем слое, в то время как мусор и миелин накапливаются в верхнем слое.
Выбросьте надосадочную жидкость.
Добавьте подходящий раствор, чтобы получить многоклеточную суспензию для дальнейшего использования.
Для гомогенизации тканей добавьте 3 миллилитра предварительно охлажденного HBSS в предварительно охлажденный стеклянный раствор измельчителя тканей Dounce и перенесите половину
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео