Характеристика внеклеточного пространства в срезе мозга с помощью ионоселективных микроэлектродов и микроэлектродов ионофореза

Начните с записывающей камеры, содержащей защищенный толстый срез мозга, погруженный в искусственную спинномозговую жидкость или ФКСГ.

Этот срез мозга включает в себя интерстициальную жидкость и внеклеточный матрикс, образуя взаимосвязанное внеклеточное пространство, которое окружает клетки мозга.

Погрузите двухканальный ионоселективный микроэлектрод и микроэлектрод ионофореза в аКСФ.

Двухканальный ионоселективный микроэлектрод имеет чувствительный канал для ионов тетраметиламмония или ТМА и канал сравнения, в то время как микроэлектрод ионофореза содержит раствор ТМА.

Ионофорезный электрод высвобождает ионы ТМА, которые диффундируют по направлению к ионоселективному микроэлектроду.

Чувствительный канал обнаруживает эти ионы ТМА и генерирует электрический сигнал. Запишите это в качестве базового уровня.

Вставьте оба электрода в срез мозга, держа их немного друг от друга.

По мере того, как ионы ТМА диффундируют во внеклеточном пространстве, они достигают ионоселективного микроэлектрода.

Перезапишите сигнал и сравните его с базовым уровнем, чтобы проанализировать свойства внеклеточного пространства, такие как объемная доля и степень скручивания.

Поместите срез мозга толщиной 400 микр