Методы количественного определения антител-индуцированной активации комплемента по ЭРИТРОЦИТОВ

Общей целью данного эксперимента является оценка активации комплемента антителами против эритроцитов или эритроцитов в сыворотке крови пациента. Это достигается путем инкубации эритроцитов с сывороткой крови пациента в присутствии блокирующих антител к С-5 для индуцирования отложения С-4 и С3 на поверхности эритроцитов. Затем эритроциты окрашивают флуоресцентно мечеными антителами против С-4 и анти-С3, а количество отложений комплемента на эритроцитах затем можно проанализировать с помощью проточной цитометрии альтернативным методом.

Эритроциты инкубируются с сывороткой крови пациента в отсутствие анти-С-5 для индуцирования опосредованного комплементом лизиса. Процент лизированных эритроцитов может быть затем определен путем измерения количества гемоглобина, выделяемого клетками с помощью спектрометрии. Основное преимущество этой новой методики перед существующими методами, такими как гемолиз или тест на антиглобулины, используемые в рутинной диагностике, заключается в том, что она носит количественный характер, и мы можем обнаружить неоптимальные различия в активации комплемента.