Анализ ретиноевой кислоты-индуцированной Neural дифференциации эмбриональных стволовых клеток мыши в двух и трех-мерных эмбриональных телец

Общая цель данной процедуры заключается в анализе экспрессии и продукции генов и белковых маркеров, соответственно, нейронной дифференцировки эмбриональных стволовых клеток мыши. Этот метод может помочь определить механизм, ответственный за ингибирование нейронной дифференцировки к сырому возрасту DPA, и привести к лучшим протоколам дифференцировки стволовых клеток в нейроны для терапевтических целей. Основное преимущество этой методики заключается в том, что она позволяет отслеживать процесс нейронной дифференцировки на уровне эмерина и белка, в том числе с помощью оптической микроскопии.

Демонстрировать процедуру будет доктор Цзюннинг Янг, научный сотрудник моей лаборатории. Начните формирование эмбриоидного тела путем забора эмбриональных стволовых клеток с 0,25% трипсина-ЭДТА в течение двух-пяти минут при температуре 37 градусов Цельсия и 5% углекислого газа. Добавьте свежую модифицированную среду Дульбекко от Iscove, или IMDM, с 15% FBS в отделяющиеся ячейки и перенесите клеточную суспензию в 15-миллилитровую пробирку.