Метод эффективного складывая и очистки Хеморецепция лигандом привязки домена

18K просмотров

Цитируется: 5

14:25 мин.

12 декабря 2017 г.

10.3791/57092-v

12 декабря 2017 г.

18K просмотров

Mayra A. Machuca¹^,² , Anna Roujeinikova¹^,²^,³

¹Infection and Immunity Program, Monash Biomedicine Discovery Institute, ²Department of Microbiology, Monash University, ³Department of Biochemistry and Molecular Biology, Monash University

Процедура представлен складывая dCACHE периплазматическое лигандом привязки области Campylobacter jejuni Хеморецепция Tlp3 от включения органов и очистки приносить миллиграмм количества белка.

Больше видео

Рефолдинг белков

солюбилизация тел включений

солюбилизация с помощью мочевины

аффинная хроматография

эксклюзионная хроматография

спектроскопия кругового дихроизма

отщепление His6-метки

обработка TEV-протеазой

диализ для замены буфера

Chapters in this video

0:05

Название

0:46

Экспрессия His₆-Tlp3-LBD в E. coli

2:29

Выделение и денатурация тел включения

5:34

Рефолдинг белка

7:39

Очистка His₆-меченого белка с помощью аффинной хроматографии на иммобилизованных ионах металлов

8:49

Удаление His₆-метки с помощью TEV-протеазы и эксклюзионная хроматография Tlp3-LBD

11:06

Результаты: экспрессия, рефолдинг и очистка Tlp3-LBD

12:41

Заключение