齧歯動物識別私

Lab Animal Research

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Overview

ソース: ケイ ・ スチュワート、RVT、RLATG、CMAR;ヴァレリー A. シュレーダー、RVT、RLATG。ノートルダムのノートルダム大学

生物医学研究の基本的な要件は、研究動物の適切な識別。右の動物がプロシージャとデータ収集のために使用されているが不可欠です。実験用マウスやラットは次の永久的な方法で識別できる: 耳タグ、耳パンチ コード、マイクロ チップの注入、成体マウスのテール入れ墨および新生児のためのつま先の入れ墨。染料・ マーキングペンの一時的な方法は、急性の研究も使用できます。このビデオでは、タグ付けと動物の調査の種類について、それぞれのメリットと同様に、マウスおよびラットの耳の技術的な側面をカバーしています。(別のビデオで説明) 各動物の基本的なマニュアル抑制技術の知識はこれらの識別方法を正しく完了するために必要です

Cite this Video

JoVE Science Education Database. ラボ動物研究の必需品. 齧歯動物識別私. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Principles

耳タグは、安価で簡単に行うには、結果として、個々 のマウスおよびラットの同定に一般的に使用されます。タグは、一連の数字と文字の組み合わせでオーダーメイドすることができます。マウス/ラット系統またはに原則捜査官 (PI)、記録管理やデータベース管理、特に大規模な繁殖コロニーでの側近に特定のコードを割り当てることがある複数の系統や小僧。また、市販のタグのさまざまながあります。金属タグそれらに刻まれた文字であります。このエッチングは明らかに、それをマウスを使って作業がしばしばタグのサイズが小さいためタグのコードを読むためにそれを拾う必要があります。他のオプションは、数字や鮮やかな色の背景の文字とプラスチックのタグまたはプラスチック表面にバーコードのタグします。これらのオプションの両方は、動物を扱うことがなく読めるようにタグを許可します。さらにプラスチック製のタグには、mri との互換性

耳にタグの位置が重要なあるいくつかの不幸な結果を持つことができます不適切な配置。タグする必要があります動物に干渉、耳介に曲げを発生しないことなどを配置、' s 移動、つまり、ケージングの任意の部分をキャッチ。タグがあまりにも近くに配置されている場合引き裂かれた耳介の組織から簡単に耳の端。頭に余りに近く位置し、頸部の皮膚は炎症、痛み、運動制限が作成されますタグでキャッチできます。これは、タグ、耳からリッピングまたはタグに巻き込まれる左足負傷動物から自己トラウマに可能性があります。適切な配置とテクニックのトレーニングは不可欠です。1

タグは、マウスやラットの個人識別子を提供、絶対ではありません。タグは戦い、過剰グルーミング、自己外傷や感染症、感受性系統の皮膚炎のため失われます。2 ラット特に耳タグさほど寛大は、しばしば自己トラウマを与えた、それらを削除します。ラットのより積極的な繁殖行動は、耳介から引き裂かれて耳タグにつながることができます。マウスやラットは、ペアやグループは建物、1 つ以上の動物の耳タグの損失があれば面倒です。識別 - タグ、あるいは尻尾や足指のタトゥーの反対側の耳で使用されるパンチ コードなどの二次形態は、この問題を回避するために-使用する必要があります。施設はタグ耳の選択と他の耳やつま先に使用されるコードの両方を標準化する必要があります。すべてのコードは、ケージに示される必要カード

耳パンチ コードの使用は、迅速かつ簡単な識別法が、法の制限があります。一般的に使用されるコード使用、通常 100 に 399 の最大可能な数の上限があります。耳パンチ コードを読み取る、ほとんどの動物は、首筋に把握する必要があります。パンチが同時に達成されるべき動物の同定と遺伝子型サンプリングを可能にする PCR 遺伝子型の組織サンプルとして倍増できます。繰り返し処理から、動物にストレスの少ないでこの結果します。3

耳パンチの 3 つの様式がある: はさみパンチ、親指パンチとレバー パンチ。すべてが均等に有効であるが、それぞれに長所と短所があります。たとえば、ラットの年齢として彼らの耳の皮膚が厚くなります。彼らが引き離される幼若ラットの耳パンチを実行することをお勧めします。、身分証明書を必要とする大人のラットの吸入麻酔の使用を考えるべきです。人間工学に基づいて、レベルのパンチは特に、古いラットの厚い耳の親指パンチよりも使いやすいです。ただし、これらのパンチの両方はつまむ指の動きが必要です。はさみパンチ手根管の疲労や怪我を避けるため、つまむ動きを必要としない人間工学的利点があります。対照的に、親指パンチは、エッペン チューブにサンプル、組織材料のヒントとして収まるジェノタイピングを収集するため便利です。使用するパンチのスタイルは、タスクおよびラットの年齢を実行する個人によって決められるべきです

、ラットの金属タグはよく使われますが、研究を示しているそれらを使用する影響があります。炎症、腫瘍性病変とも慢性的な痛みは、数ヶ月の金属の耳タグを着用している動物で観察されています。3,4,5,6 タグ速やかにすれば除去されるべき耳から、副作用があると調べ、治療、その後の負傷、必要に応じて獣医のスタッフによって

適切なケアとメンテナンスのパンチはその使用法を拡張します。パンチのすべてのタイプは、消毒剤でそれらをきれいにしアルコールで洗浄し勧め場合オートクレーブ、鈍くなります。その後、彼らは徹底的に錆を防ぐために乾燥が必要があります。PCR のパンチを使用している場合彼らべき浸し 3 分残留の DNA または RNA を削除するソリューション。使用前にアルコールで洗浄、乾燥拭いて

Procedure

1 です。 耳パンチ同定

耳パンチ コードは、個々 の動物のラベルに迅速かつ安価な方法として開発されています。耳パンチの 3 つの様式がある: はさみパンチ、親指パンチとレバー パンチ。動物 ' s 右耳は一桁、数十または数百のために耳の中央の左耳用します

  1. 動物を抑制は、耳が簡単にアクセスできるようにします。ほとんどのマウスは、耳離乳時の個体識別のためのタグです。彼らのより小さくより壊れやすいサイズのための穏やかな処理が必要です。いくつかのマウス、後肢がケージの上やカウンター トップなど表面に休むことができる場合は苦労する可能性が低くです
  2. 特定動物に対応するために必要な耳パンチ ' s 実験数またはケージ内でそれを識別します。
    1. ノッチまたは使用されるコードによって穴パンチになります
    2. 耳タグの最後の番号は身分証明書の第 2 の方法だと耳パンチ識別子として用い
    3. 動物が安定しておりグループでの短期留学の場合、彼らは連続番号を与えられることができます。耳のタグが存在しない場合多くの場合これは
  3. パンチの耳を作る。
    1. 耳の耳介の端にノッチをするためには、パンチを配置します
    2. 穴をするためには、目的の位置に耳介余白からパンチの穴が表示されるようパンチで耳を配置します
    3. 耳の皮膚を切って、しっかりと親指レバー パンチまたはシザー パンチすばやく閉じる圧力を適用します
    4. は、親指またはレバーのパンチを使用するときに耳からパンチをそっと持ち上げます。耳から削除するはさみパンチを開きます
    5. 引っ張るか、または耳をテアリングを防ぐためパンチのねじれを避ける
    6. パンチ時間後鈍いか。パンチは耳を切って、パンチをリリース、新しい耳パンチを選択すべき。同じ場所に新しいパンチの位置を変更します
  4. 使用後きれいにパンチ。
    1. オートクレーブ処理した場合、すべてのパンチの種類が鈍くなります。彼らは消毒剤で洗浄してアルコールで洗浄をお勧めします。錆を防ぐために徹底的にそれらを乾燥します
    2. PCR に使用する耳パンチは、残留の DNA または RNA を削除するソリューションで 3 分間定期的にぬれています。彼らはアルコールで洗浄され、乾燥拭いて使用する前にします

Figure 1
図 1。耳はさみパンチを用いたマウスでパンチングします

2。 耳のタグ識別

カスタマイズされた耳タグしることができます、アルファベットや数値のコード メーカーからマウス系統や探偵の差別化が可能。金属やプラスチックの耳タグを作ることが

  1. 選択耳タグを識別する動物に適しています。耳タグ製造業者から利用できる適用元の複数の様式があります。特定のサイズと使用されている耳タグのスタイル適用元を注文してください
  2. は軽く段ボール ホルダーからタグを削除して、applier の切欠きの範囲上の穴端が置かれたので、applier に方向づけし。タグの先の尖った端は切り込みの反対する必要があります
  3. は、耳が簡単にアクセスできるように、動物を抑制します。動物は少ない後肢がケージの上やカウンター トップなど、表面に休むことができる場合は苦労する可能性があります
  4. は、正しく配置の耳タグを配置します。
    1. 耳タグの位置を深く、できるだけ耳のコンチャにタグ番号顔動物の背中と
    2. 耳タグの数の動物の鼻に直面して、耳の裏に耳介の基部のタグの場所を持っている
  5. タグを適用します。
    1. しっかりとスクイズ applier は閉鎖。耳のタグが耳に突き刺さるし、一緒にロックします
    2. 、Applier を解放し、タグ付けの耳が applier の落ちる

Figure 2
図 2。マウス耳介に正しく配置されている耳タグを

  1. は、金属の耳タグを削除します
    。 注: 場合によっては、金属耳タグを引き起こす可能性が炎症や耳の腫れの。腫れや炎症をしばしば耳介の感染症に します。治療は、タグの除去を含める必要があります。ただし、重度の炎症や感染症の場合、動物は麻酔する必要があります。
    1. 消毒液で湿らせた綿の先端アプリケータとタグの周りから残骸を取除きなさい
    2. は、ワイヤー カッターのエッジからタグ ループの上部にカット。タグを圧縮、耳をつまむし、さらにダメージが平らな面にわたって切断しないでください
    3. 耳をテアリングを防ぐために削減しながらトルクを適用しないようにします
  2. 耳タグを離れての切り口を広げるため止血剤を使用します。
    1. 優しくガイド耳タグを- と止血剤を使用しての耳を。ピアスの穴と圧着端が耳を通過しませんのでそのうちタグを滑りの拡大を回避することによって外傷を減らす
    2. タグがなくなって、アプリケータ、防腐剤に浸した綿の棒で耳を拭く
    3. 、耳から膿性の分泌物がある場合必要がありますフォロー アップ治療と評価のための獣医のスタッフとの協議をお勧めします

実験動物を適切に識別、生物医学研究の基本的な要件です。捜査官正しい動物が実験手順やデータの収集のため使用されるように個々 の動物を区別できるようにするために不可欠です。科学者は、個々 の実験動物を識別するためにいくつかの恒久的かつ一時的な方法を開発しました。ここでは、我々 は 2 つの最も一般的に使用される方法を議論する予定です: 耳のタグ付けと耳抜き

耳抜きの手順を掘り下げる前に ' s 耳パンチ コード、利用可能なパンチの種類を紹介し、利点、この方法の欠点を説明します。想像のとおり、耳パンチ パンチ穴または動物の切り込みが含まれます ' s 外耳または耳介。この方法を標準化するために普遍的な耳パンチ コードが開発されている

の位置によっては、右耳を表す 1 桁、1、3、5 のようにノッチを表し、2 が二重切欠きを表す。これらのノッチのさまざまな組み合わせを使用して、各ノッチの値を加算、1 から 9 まで動物を付けることができます。同様に、左耳に同じノッチ数を表しています。もう一度、さまざまな組み合わせの範囲をカバーします90 から 10。右と左の耳介の中央の穴は、それぞれ 100 と 200 を表します。両方の穴を示す 300。したがって、たとえば、動物 173 にラベルを付ける場合は、するべき 100、70、および単位を表すトップの右の耳の切り込みを単一に総和左年 3 つのノッチのため右耳の中央に穴をパンチ ' s 場所 " 3 ".

さあ、' s 説明市販の耳パンチの 3 つのスタイル: はさみパンチ、親指パンチとレバー パンチ。これらのそれぞれが、長所と短所

親指パンチにつまむ動きが必要ですが小さい、エッペンに収まるように十分な管耳組織をより簡単に収集することができますように。人間工学に基づいて、レバー パンチは特に、古いラットの厚い耳の親指パンチよりも使いやすいです。はさみパンチが手根管の疲労や怪我を避けるため、つまむ動きを必要としません

同定の迅速かつ簡単な方法にもかかわらず、いくつかの制限があります耳パンチします。まず、前述の耳パンチ コードあります 399 は、いくつかの大規模研究でこのメソッドの使用を制限することができる数の上限です。別の制限は、ほとんどの動物は、コードを読むために首筋に把握する必要があります、彼らが処理される時間が増えています。ラット時代、彼らの耳の皮膚が厚くなるし、動物に重要な苦痛を引き起こすことがなく耳の穿孔器を実行することは困難です。したがって、彼らが引き離される幼若ラットの耳パンチを実行することをお勧めします。耳パンチの際、身分証明書を必要とする大人のラットの見なす吸入麻酔を使用します

耳パンチ コードと使用可能なツールの種類についていくつかの背景情報があるので、聞かせて ' s は、マウスでこのテクニックを実行する方法を学ぶ.

手順を開始する前にそのパンチお勧めツールあります消毒液で洗浄、アルコールですすぎ、乾燥まで徹底的に。それは最終的にそれらを鈍くなるように耳パンチ、オートクレーブ

。 まず、

決定動物 ' s 実験的なコードと使用するパンチ。聞かせて ' コード 173 とシザーをここでは例としてパンチ s 使用。同じ手順は、他のコードやパンチに適用されます。準備ができたら、首筋に耳が簡単にアクセスできるようにそれを把握することにより、動物を抑制します。100 の穴を開始します。耳介余白からパンチの穴が表示されるように、パンチで右耳を配置します。次に、すぐにシザーを閉じ、しっかりと皮膚を切って圧力を適用されます。パンチを解放し、耳から削除します。引っ張るか、または耳をテアリングを防ぐためパンチのねじれを避けます。ノッチをするためには、上部の右の耳の場合の正しい場所で耳介端にパンチを配置、" 3 " コード ' s ユニットを置くと同じことを行う - 迅速かつしっかりした圧力を適用し、するシザーを開き、それを削除します。他の耳のための 2 - 3 つのノッチをパンチで同じ手順を繰り返します " 20 " 付近の外側の隅と 1 つの " 50 " 内側の隅近くにコードを合計 " 70 ".

は、正しいコードを裏では動物を檻に追加する前に殴られたことを確認します。もう一度、きれいに消毒剤でパンチ、アルコールですすぎ、錆を防ぐために徹底的にそれを乾燥します

さあ、' s へ耳のタグ付け、マウスおよびラットの個体識別のための別の安価で容易に行う方法であります。さまざまな市販の耳タグがあります。これらが含まれます: 一連の数字と文字の組み合わせ、それらに刻まれたタグや文字や鮮やかな色の背景のバーコードとプラスチックのタグを金属

金属タグの 1 つの欠点は、コードを読むために動物をピックアップする必要があります、です。対照的に、プラスチックのタグが、動物を扱うことがなく読みやすいです。プラスチック製のタグに別の利点は、mri との互換性です。タグは、マウスまたはラットの個々 の id を提供する、彼らは絶対ではありません。タグは、過剰グルーミング、皮膚炎や感染症により失われることが、不耐症のためタグを削除しようとすると、喧嘩、そして積極的な繁殖行動自己トラウマを与えた。いくつかの動物は、同じケージに収容されて、耳にタグの損失が面倒することができます。この問題を回避するために反対側の耳にパンチ コードなどタグの識別の二次形態を活用すべき。タグ耳の選択と他の耳に使用されるコードの両方を施設すべき標準化し、すべてのコードは、ケージに示される必要カード

さあ ' s はいくつかの不幸な結果を持つことができます不適切な位置決め耳タグを適切に適用する方法を学ぶ。次のアプリケーションでは、またタグ アプリケーションによる感染症の場合通常行われる耳タグの削除を説明します

最初のステップを識別する動物のための適切なタグを選択することです。ここでは、マウスの手順をデモンストレーションするのに金属製のタグを使用します。必ず、特定のサイズと使用されて耳タグのスタイルに適して適用元を注文してください。そっと段ボール ホルダーからタグを削除、applier の切欠きの範囲上の穴端が置かれたので、applier にそれを方向づけます。タグの先の尖った端は切り込みの反対する必要があります

耳タグを適用する準備ができたらは、耳が簡単にアクセスできるように、動物を抑制します。動物は、後肢がケージの上やカウンター トップなど表面に休むことができる場合は苦労するより可能性があります。動物を拘束すると、一度位置を耳タグの深く耳のコンチャにので、タグ番号顔動物の背中。その後、しっかりとスクイズ applier を閉じる;耳のタグは、一緒に耳とロックを突き刺すでしょう。離すと、タグの耳が applier の落ちる。タグがきちんと置かれ、適用されることを確認します。耳のタグの数の動物の鼻に直面して、耳の裏に耳介の基部にタグのポイントを置き、場所でタグをロックするを絞るしたいかどうか

タグする必要があります動物に干渉配置し耳に曲げを発生しないように、' s 移動、つまり、ケージングの任意の部分をキャッチ。あまりにもタグを配置した場合、耳の端に近いそれすることができます簡単に引き裂かれます。頭に余りに近く位置し、頸部の皮膚は炎症、痛み、および自己外傷につながることができますし、制限の動きを作成するタグでキャッチできます。金属タグすることができます炎症や耳の腫れが原因あります。これは多くの場合、耳介の感染症につながるし、すぐに治療は、タグの除去を含める必要があります

タグを削除、消毒液と綿棒を湿らせてからタグの周りの任意の残骸を削除する使用のために。感染症の重症の場合、動物は麻酔する必要があります。その後、ワイヤー カッターを使用して、エッジからエッジへのタグのループの上部にカットします。重要なは、カットしないでください平らな面全体をタグを圧縮し、耳をつまんで、耳に損傷を与えると。止血剤を使用して、ゆっくりと耳の耳タグとガイドします。クリンプ エンドがトラウマとピアスの穴の拡大を引き起こしているを通過しませんので、うちタグをスリップします。タグがなくなって、防腐剤に浸した綿棒の棒で耳を拭くし、そのケージに動物を返します。耳から膿性の分泌物がある場合、必要がありますフォロー アップ治療と評価のための獣医のスタッフとの協議をお勧めします

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耳タグとパンチを使用して実験動物をマークする方法を知っているので ' s は、これらの方法に役に立ついくつかの実験を確認します。耳パンチ コードを使用しての主な利点の 1 つは、パンチは繰り返し処理が原因で発生動物にストレスを減らす、遺伝子型の組織サンプルが兼ねることができます。しかし、PCR のサンプルを収集するため、パンチを使用する場合は、最初に削除残留 DNA または RNA の少なくとも 3 分の表面の decontaminant ソリューションに装置を浸漬し、使用前にアルコールで洗い流しに覚えて

同定法 ' s の重要性は更に増加する実験が数日間持続する場合。たとえば、この実験で科学者はまず金属タグを使用して動物をラベルし、彼らはルシフェラーゼ蛋白を発現するトランスジェニック腫瘍細胞の懸濁液で坐骨神経を注入します。次に、癌の進行を定量化するために、彼らは 1 つ、10、18 日ポスト噴射で生物発光を用いた動物をイメージします

あなた ' ve はちょうどゼウスを見た ' 2 つを一般的示す s プレゼンテーションは齧歯動物での識別方法を使用: タグを耳し、耳をパンチ。今耳を理解する必要がありますコードをパンチ、市販の齧歯動物の耳のタグの種類を知っている、かなりの動物の不快感を引き起こすことがなくこれらの手順を正確に実行できる必要があります

覚えて、それぞれの手法には、長所と短所は、あなたの実験の必要性に関連して考慮する必要があります。に加えてコストを考えると、技術の使いやすさと、動物に痛みのレベルはずいくつか主要な考慮事項の適切な識別方法を選択するときです。いつも、見てくれてありがとうとして!

Summary

多くの要因を熟慮する必要があります適切な識別方法を選択するとき。各テクニックは、長所と短所が実験のニーズに関連して考慮する必要があります。コストは、他の要因と共に検討する必要があります、技術の使いやすさと、動物に不快感のレベルには、主要な考慮事項が必要があります。3, 4

耳パンチ/ノッチ、マウスで使用されます少しコストがあるのでラットし、処置が簡単に。399 に 100 の上限を持っているほとんどのコードで使用できるコードは限られています。耳パンチ コードを読み取る、ほとんどの動物は、首筋に把握する必要があります。しかし、パンチは、繰り返し処理から動物にストレスの少ないため、PCR 遺伝子の多型の同定と遺伝子型サンプリング、同時に達成できるための組織サンプルとして倍増できます。5

References

  1. Robinson, V., Morton, D.B., Anderson, D., Carver, J.F.A., Francis R.J., Hubrecht, R., Jenkins, E., Mathers, K.E., Raymond, R., Rosewell, I., Wallace, J., and Wells, D.J. 2003. Refinement and reduction in production of genetically modified mice. Laboratory Animals. 37:S1-S50.
  2. Cover, C.E., Keenan, C.M., and Bettinger, G.E. 1989. Ear tag-induced Staphylococcus infection in mice. Laboratory Animals. 23:229-233.
  3. Kitagaki, M., Suwa, T., Yanagi, K., and Shiratori, K. 2003. Auricle chondritis in young ear-tagged Crj:CD(SD)IGS rats. Laboratory Animals. 37:249-253.
  4. Kasanen, H.E., Voipio, H.M., Leskinen, H., Luodonpää, M., and Nevalainen, T.O. 2011. Comparison of ear tattoo, ear notch and microtattoo in rats undergoing cardiovascular telemetry. Laboratory Animals. 45:154-159.
  5. Dalhborn, K., Bugnon, P., Nevalainen, T., Raspa, M., Verbost, P., and Spangenberg, E. 2013. Report of the Federation of European Laboratory Animal Science Associations Working Group on animal identification. Laboratory Animals. 47:2-11.
  6. Waalkes, M.P., Rehm, S., Kasprzak, K.S., et al. 1987. Inflammatory, proliferative, and neoplastic lesions at the site of metallic identification ear tags in Wistar [Crl:(WI)BR] rats. Cancer Research. 47:2445-2450.

1 です。 耳パンチ同定

耳パンチ コードは、個々 の動物のラベルに迅速かつ安価な方法として開発されています。耳パンチの 3 つの様式がある: はさみパンチ、親指パンチとレバー パンチ。動物 ' s 右耳は一桁、数十または数百のために耳の中央の左耳用します

  1. 動物を抑制は、耳が簡単にアクセスできるようにします。ほとんどのマウスは、耳離乳時の個体識別のためのタグです。彼らのより小さくより壊れやすいサイズのための穏やかな処理が必要です。いくつかのマウス、後肢がケージの上やカウンター トップなど表面に休むことができる場合は苦労する可能性が低くです
  2. 特定動物に対応するために必要な耳パンチ ' s 実験数またはケージ内でそれを識別します。
    1. ノッチまたは使用されるコードによって穴パンチになります
    2. 耳タグの最後の番号は身分証明書の第 2 の方法だと耳パンチ識別子として用い
    3. 動物が安定しておりグループでの短期留学の場合、彼らは連続番号を与えられることができます。耳のタグが存在しない場合多くの場合これは
  3. パンチの耳を作る。
    1. 耳の耳介の端にノッチをするためには、パンチを配置します
    2. 穴をするためには、目的の位置に耳介余白からパンチの穴が表示されるようパンチで耳を配置します
    3. 耳の皮膚を切って、しっかりと親指レバー パンチまたはシザー パンチすばやく閉じる圧力を適用します
    4. は、親指またはレバーのパンチを使用するときに耳からパンチをそっと持ち上げます。耳から削除するはさみパンチを開きます
    5. 引っ張るか、または耳をテアリングを防ぐためパンチのねじれを避ける
    6. パンチ時間後鈍いか。パンチは耳を切って、パンチをリリース、新しい耳パンチを選択すべき。同じ場所に新しいパンチの位置を変更します
  4. 使用後きれいにパンチ。
    1. オートクレーブ処理した場合、すべてのパンチの種類が鈍くなります。彼らは消毒剤で洗浄してアルコールで洗浄をお勧めします。錆を防ぐために徹底的にそれらを乾燥します
    2. PCR に使用する耳パンチは、残留の DNA または RNA を削除するソリューションで 3 分間定期的にぬれています。彼らはアルコールで洗浄され、乾燥拭いて使用する前にします

Figure 1
図 1。耳はさみパンチを用いたマウスでパンチングします

2。 耳のタグ識別

カスタマイズされた耳タグしることができます、アルファベットや数値のコード メーカーからマウス系統や探偵の差別化が可能。金属やプラスチックの耳タグを作ることが

  1. 選択耳タグを識別する動物に適しています。耳タグ製造業者から利用できる適用元の複数の様式があります。特定のサイズと使用されている耳タグのスタイル適用元を注文してください
  2. は軽く段ボール ホルダーからタグを削除して、applier の切欠きの範囲上の穴端が置かれたので、applier に方向づけし。タグの先の尖った端は切り込みの反対する必要があります
  3. は、耳が簡単にアクセスできるように、動物を抑制します。動物は少ない後肢がケージの上やカウンター トップなど、表面に休むことができる場合は苦労する可能性があります
  4. は、正しく配置の耳タグを配置します。
    1. 耳タグの位置を深く、できるだけ耳のコンチャにタグ番号顔動物の背中と
    2. 耳タグの数の動物の鼻に直面して、耳の裏に耳介の基部のタグの場所を持っている
  5. タグを適用します。
    1. しっかりとスクイズ applier は閉鎖。耳のタグが耳に突き刺さるし、一緒にロックします
    2. 、Applier を解放し、タグ付けの耳が applier の落ちる

Figure 2
図 2。マウス耳介に正しく配置されている耳タグを

  1. は、金属の耳タグを削除します
    。 注: 場合によっては、金属耳タグを引き起こす可能性が炎症や耳の腫れの。腫れや炎症をしばしば耳介の感染症に します。治療は、タグの除去を含める必要があります。ただし、重度の炎症や感染症の場合、動物は麻酔する必要があります。
    1. 消毒液で湿らせた綿の先端アプリケータとタグの周りから残骸を取除きなさい
    2. は、ワイヤー カッターのエッジからタグ ループの上部にカット。タグを圧縮、耳をつまむし、さらにダメージが平らな面にわたって切断しないでください
    3. 耳をテアリングを防ぐために削減しながらトルクを適用しないようにします
  2. 耳タグを離れての切り口を広げるため止血剤を使用します。
    1. 優しくガイド耳タグを- と止血剤を使用しての耳を。ピアスの穴と圧着端が耳を通過しませんのでそのうちタグを滑りの拡大を回避することによって外傷を減らす
    2. タグがなくなって、アプリケータ、防腐剤に浸した綿の棒で耳を拭く
    3. 、耳から膿性の分泌物がある場合必要がありますフォロー アップ治療と評価のための獣医のスタッフとの協議をお勧めします

実験動物を適切に識別、生物医学研究の基本的な要件です。捜査官正しい動物が実験手順やデータの収集のため使用されるように個々 の動物を区別できるようにするために不可欠です。科学者は、個々 の実験動物を識別するためにいくつかの恒久的かつ一時的な方法を開発しました。ここでは、我々 は 2 つの最も一般的に使用される方法を議論する予定です: 耳のタグ付けと耳抜き

耳抜きの手順を掘り下げる前に ' s 耳パンチ コード、利用可能なパンチの種類を紹介し、利点、この方法の欠点を説明します。想像のとおり、耳パンチ パンチ穴または動物の切り込みが含まれます ' s 外耳または耳介。この方法を標準化するために普遍的な耳パンチ コードが開発されている

の位置によっては、右耳を表す 1 桁、1、3、5 のようにノッチを表し、2 が二重切欠きを表す。これらのノッチのさまざまな組み合わせを使用して、各ノッチの値を加算、1 から 9 まで動物を付けることができます。同様に、左耳に同じノッチ数を表しています。もう一度、さまざまな組み合わせの範囲をカバーします90 から 10。右と左の耳介の中央の穴は、それぞれ 100 と 200 を表します。両方の穴を示す 300。したがって、たとえば、動物 173 にラベルを付ける場合は、するべき 100、70、および単位を表すトップの右の耳の切り込みを単一に総和左年 3 つのノッチのため右耳の中央に穴をパンチ ' s 場所 " 3 ".

さあ、' s 説明市販の耳パンチの 3 つのスタイル: はさみパンチ、親指パンチとレバー パンチ。これらのそれぞれが、長所と短所

親指パンチにつまむ動きが必要ですが小さい、エッペンに収まるように十分な管耳組織をより簡単に収集することができますように。人間工学に基づいて、レバー パンチは特に、古いラットの厚い耳の親指パンチよりも使いやすいです。はさみパンチが手根管の疲労や怪我を避けるため、つまむ動きを必要としません

同定の迅速かつ簡単な方法にもかかわらず、いくつかの制限があります耳パンチします。まず、前述の耳パンチ コードあります 399 は、いくつかの大規模研究でこのメソッドの使用を制限することができる数の上限です。別の制限は、ほとんどの動物は、コードを読むために首筋に把握する必要があります、彼らが処理される時間が増えています。ラット時代、彼らの耳の皮膚が厚くなるし、動物に重要な苦痛を引き起こすことがなく耳の穿孔器を実行することは困難です。したがって、彼らが引き離される幼若ラットの耳パンチを実行することをお勧めします。耳パンチの際、身分証明書を必要とする大人のラットの見なす吸入麻酔を使用します

耳パンチ コードと使用可能なツールの種類についていくつかの背景情報があるので、聞かせて ' s は、マウスでこのテクニックを実行する方法を学ぶ.

手順を開始する前にそのパンチお勧めツールあります消毒液で洗浄、アルコールですすぎ、乾燥まで徹底的に。それは最終的にそれらを鈍くなるように耳パンチ、オートクレーブ

。 まず、

決定動物 ' s 実験的なコードと使用するパンチ。聞かせて ' コード 173 とシザーをここでは例としてパンチ s 使用。同じ手順は、他のコードやパンチに適用されます。準備ができたら、首筋に耳が簡単にアクセスできるようにそれを把握することにより、動物を抑制します。100 の穴を開始します。耳介余白からパンチの穴が表示されるように、パンチで右耳を配置します。次に、すぐにシザーを閉じ、しっかりと皮膚を切って圧力を適用されます。パンチを解放し、耳から削除します。引っ張るか、または耳をテアリングを防ぐためパンチのねじれを避けます。ノッチをするためには、上部の右の耳の場合の正しい場所で耳介端にパンチを配置、" 3 " コード ' s ユニットを置くと同じことを行う - 迅速かつしっかりした圧力を適用し、するシザーを開き、それを削除します。他の耳のための 2 - 3 つのノッチをパンチで同じ手順を繰り返します " 20 " 付近の外側の隅と 1 つの " 50 " 内側の隅近くにコードを合計 " 70 ".

は、正しいコードを裏では動物を檻に追加する前に殴られたことを確認します。もう一度、きれいに消毒剤でパンチ、アルコールですすぎ、錆を防ぐために徹底的にそれを乾燥します

さあ、' s へ耳のタグ付け、マウスおよびラットの個体識別のための別の安価で容易に行う方法であります。さまざまな市販の耳タグがあります。これらが含まれます: 一連の数字と文字の組み合わせ、それらに刻まれたタグや文字や鮮やかな色の背景のバーコードとプラスチックのタグを金属

金属タグの 1 つの欠点は、コードを読むために動物をピックアップする必要があります、です。対照的に、プラスチックのタグが、動物を扱うことがなく読みやすいです。プラスチック製のタグに別の利点は、mri との互換性です。タグは、マウスまたはラットの個々 の id を提供する、彼らは絶対ではありません。タグは、過剰グルーミング、皮膚炎や感染症により失われることが、不耐症のためタグを削除しようとすると、喧嘩、そして積極的な繁殖行動自己トラウマを与えた。いくつかの動物は、同じケージに収容されて、耳にタグの損失が面倒することができます。この問題を回避するために反対側の耳にパンチ コードなどタグの識別の二次形態を活用すべき。タグ耳の選択と他の耳に使用されるコードの両方を施設すべき標準化し、すべてのコードは、ケージに示される必要カード

さあ ' s はいくつかの不幸な結果を持つことができます不適切な位置決め耳タグを適切に適用する方法を学ぶ。次のアプリケーションでは、またタグ アプリケーションによる感染症の場合通常行われる耳タグの削除を説明します

最初のステップを識別する動物のための適切なタグを選択することです。ここでは、マウスの手順をデモンストレーションするのに金属製のタグを使用します。必ず、特定のサイズと使用されて耳タグのスタイルに適して適用元を注文してください。そっと段ボール ホルダーからタグを削除、applier の切欠きの範囲上の穴端が置かれたので、applier にそれを方向づけます。タグの先の尖った端は切り込みの反対する必要があります

耳タグを適用する準備ができたらは、耳が簡単にアクセスできるように、動物を抑制します。動物は、後肢がケージの上やカウンター トップなど表面に休むことができる場合は苦労するより可能性があります。動物を拘束すると、一度位置を耳タグの深く耳のコンチャにので、タグ番号顔動物の背中。その後、しっかりとスクイズ applier を閉じる;耳のタグは、一緒に耳とロックを突き刺すでしょう。離すと、タグの耳が applier の落ちる。タグがきちんと置かれ、適用されることを確認します。耳のタグの数の動物の鼻に直面して、耳の裏に耳介の基部にタグのポイントを置き、場所でタグをロックするを絞るしたいかどうか

タグする必要があります動物に干渉配置し耳に曲げを発生しないように、' s 移動、つまり、ケージングの任意の部分をキャッチ。あまりにもタグを配置した場合、耳の端に近いそれすることができます簡単に引き裂かれます。頭に余りに近く位置し、頸部の皮膚は炎症、痛み、および自己外傷につながることができますし、制限の動きを作成するタグでキャッチできます。金属タグすることができます炎症や耳の腫れが原因あります。これは多くの場合、耳介の感染症につながるし、すぐに治療は、タグの除去を含める必要があります

タグを削除、消毒液と綿棒を湿らせてからタグの周りの任意の残骸を削除する使用のために。感染症の重症の場合、動物は麻酔する必要があります。その後、ワイヤー カッターを使用して、エッジからエッジへのタグのループの上部にカットします。重要なは、カットしないでください平らな面全体をタグを圧縮し、耳をつまんで、耳に損傷を与えると。止血剤を使用して、ゆっくりと耳の耳タグとガイドします。クリンプ エンドがトラウマとピアスの穴の拡大を引き起こしているを通過しませんので、うちタグをスリップします。タグがなくなって、防腐剤に浸した綿棒の棒で耳を拭くし、そのケージに動物を返します。耳から膿性の分泌物がある場合、必要がありますフォロー アップ治療と評価のための獣医のスタッフとの協議をお勧めします

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耳タグとパンチを使用して実験動物をマークする方法を知っているので ' s は、これらの方法に役に立ついくつかの実験を確認します。耳パンチ コードを使用しての主な利点の 1 つは、パンチは繰り返し処理が原因で発生動物にストレスを減らす、遺伝子型の組織サンプルが兼ねることができます。しかし、PCR のサンプルを収集するため、パンチを使用する場合は、最初に削除残留 DNA または RNA の少なくとも 3 分の表面の decontaminant ソリューションに装置を浸漬し、使用前にアルコールで洗い流しに覚えて

同定法 ' s の重要性は更に増加する実験が数日間持続する場合。たとえば、この実験で科学者はまず金属タグを使用して動物をラベルし、彼らはルシフェラーゼ蛋白を発現するトランスジェニック腫瘍細胞の懸濁液で坐骨神経を注入します。次に、癌の進行を定量化するために、彼らは 1 つ、10、18 日ポスト噴射で生物発光を用いた動物をイメージします