हम इस प्रोटोकॉल में प्रदर्शित कैसे बनाना और एक माइक्रो ड्राइव सरणी, जो चूहों में पुरानी electrophysiological रिकॉर्डिंग के लिए डिजाइन किया गया था के साथ उपयोग के लिए शर्त tetrodes. इसके अलावा, हम माइक्रो ड्राइव सरणी निर्माण, जो जमीन तारों और एक सुरक्षात्मक शंकु स्थापित शामिल की अंतिम चरण वर्णन.
Abstract
tetrode, चार इलेक्ट्रोड का एक बंडल, vivo में कई न्यूरॉन्स की एक साथ रिकॉर्डिंग के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण साबित हो गया है. tetrode के चैनलों पर कार्रवाई संभावित हस्ताक्षर के अंतर आयाम बहु इकाई संकेतों से एकल इकाई गतिविधि के अलगाव के लिए अनुमति देता है. ठीक stereotaxic स्थान और tetrode की गहराई को नियंत्रित करने की क्षमता मस्तिष्क क्षेत्रों के पार समन्वित तंत्रिका गतिविधि के अध्ययन के लिए महत्वपूर्ण है. एक माइक्रो ड्राइव सरणी के साथ संयोजन में, यह संभव है सटीक और सप्ताह के लिए दिनों के पाठ्यक्रम पर कई tetrodes के स्थिर नियंत्रण स्थान हासिल है. इस प्रोटोकॉल में, हम का प्रदर्शन कैसे बनाना और हालत tetrodes बुनियादी उपकरणों और सामग्री का उपयोग, एक बहु ड्राइव पुरानी tetrode सरणी में tetrodes स्थापित में vivo चूहे में रिकॉर्डिंग, माइक्रो – ड्राइव सरणी के लिए जमीन तार कनेक्शन बनाने, और माइक्रो ड्राइव सरणी पर एक सुरक्षात्मक शंकु देते हैं क्रम में करने के लिए पर्यावरण के साथ शारीरिक संपर्क से tetrodes की रक्षा.
Protocol
1. Tetrodes के निर्माण एक 50 सेमी लंबे समय प्राप्त करने के द्वारा एक tetrode का निर्माण शुरू polyimide अछूता, एक 12.5 माइक्रोन व्यास कोर के साथ तार नी क्रोम. आधे में तार मोड़ो. जोड़ी के साथ अपनी उंगलियों को चलाने के लिए उन्?…
Discussion
इस प्रोटोकॉल एक दो भाग प्रोटोकॉल की दूसरी किस्त है: माइक्रो ड्राइव सरणी और tetrode का संयोजन एक जाग में कई न्यूरॉन्स की एक साथ रिकॉर्डिंग प्राप्त करने के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है, "में vivo रिकॉर्डिंग जीर्ण …
Acknowledgements
हम अपने डिजाइन और स्वत:, motorized tetrode भांजनेवाला वीडियो में चित्रित डिवाइस के निर्माण के लिए जून यामामोटो स्वीकार करते हैं करना चाहते हैं. इसके अलावा, हम माइक्रो ड्राइव और tetrode प्रयोगशाला में प्रौद्योगिकी विकास के लिए उनके योगदान के लिए सब अतीत और वर्तमान विल्सन लैब के सदस्यों को स्वीकार करना चाहते हैं.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Panavise
Tool
Panavise
Model 301
Holds either micro-drive array or serrated scissors
Modified Xcelite 378M Pliers
Tool
Newark
96F8903
For inserting connector board pins. To make, remove 2mm from one tip of the pliers.
Slow Cure Glue
Material
Great Planes (Champaign, IL)
GPMR6015
To glue the tetrode to the micro-drive
Gold Plating Solution
Material
Neuralynx
Sifco Selectron Gold NC
Contains gold particles for electroplating
Current Generator
Tool
World Precision Instruments
A365D-B
A.K.A. Stimulus Isolator. Used to electroplate gold solution onto electrode tips.
Impedance Meter
Tool
BAK Electronics
IMP-1 / 6662 / 2788
To check impedance of electrodes
Hot Air Gun
Tool
Steinel (Germany)
HG 3002 LCD
To fuse electrodes together to make tetrode
Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers
Tool
Aven (Ann Arbor, MI)
18768 (Pattern 304)
For handling tetrodes
Alligator Clip
Tool
Fine Science Tools
18050-35
A.K.A. Bulldog serrefine. To clip the tetrodes together during twisting
Micro Dissecting Scissors
Tool
Biomedical Research Instruments
25-1000
For general cutting of tetrode/electrode wire
Iris Toughcut Serrated Scissors
Tool
Fine Science Tools
14058-09
For final cut of tetrodes
Teflon Coated Stainless Steel Wire
Material
A-M Systems (Carlsborg, WA)
790500
Ground wire
12.5 micron nichrome wire
Material
Kanthal Palm Coast
Rediohm-800 1/4 HARD PAC COATING
Polyimide coated micro-wire for making tetrodes.
Tetrode Twister
Tool
Neuralynx
Tetrode Assembly Station
Increases the speed and consistency of tetrode fabrication.
Silver Paint
Material
GC Electronics
22-023
For connecting the micro-electrode wires of the tetrode to the connector pins (see Discussion)
Nguyen, D. P., Layton, S. P., Hale, G., Gomperts, S. N., Davidson, T. J., Kloosterman, F., Wilson, M. A. Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Tetrode Assembly. J. Vis. Exp. (26), e1098, doi:10.3791/1098 (2009).