이 프로토콜에서는 쥐에서 만성 electrophysiological 레코딩을 위해 설계되었습니다 마이크로 드라이브 어레이와 함께 사용하기 위해 조작 및 조건 tetrodes하는 방법을 보여줍니다. 또한, 우리는 지상 설치 와이어 및 보호 원추형을 포함 마이크로 드라이브 배열 건설의 마지막 단계를 보여줍니다.
Abstract
tetrode, 넷 전극의 번들, – 생체내 여러 뉴런의 동시 녹음 가치있는 도구로 입증되었습니다. tetrode의 채널을 통해 행동 가능성이 서명의 차동 진폭 멀티 유닛 신호의 단일 유닛 활동의 절연을 허용합니다. 정확하게 tetrode의 stereotaxic 위치와 깊이를 제어하는 능력은 두뇌의 지역에 걸쳐 조정 신경 활동을 공부에 중요합니다. 마이크로 드라이브 어레이와 함께, 그것은 주 일 과정을 통해 정확한 배치와 많은 tetrodes의 안정적인 제어를 달성하는 것이 가능합니다. 이 프로토콜에서는, 우리는 조작 및 기본 도구와 재료를 사용하여 조건 tetrodes은, 만성의 멀티 드라이브 tetrode 배열에 tetrodes를 설치하는 방법을 보여줍니다 인 생체내 밀고에서 녹음, 마이크로 드라이브 배열 접지 와이어 연결을 확인하고, 환경과 물리적인 접촉에서 tetrodes를 보호하기 위해 마이크로 드라이브 어레이에 보호 원추형을 이메일에 첨부해주십시오.
Protocol
1. tetrodes의 제작 NI – 크롬 와이어 12.5 마이크론 직경 코어와 절연 polyimide, 길이 50cm를 취득하여 한 tetrode의 건설을 시작합니다. 절반 와이어를 접으십시오. 그들이 뭉쳐 만들 쌍을 함께 손가락을 실행합니다. 와이어의 쌍 그들의 전체 길이에 걸쳐 좋은 연락 방법을 가지고 있는지 확인하십시오. 함께 두 끝을 잡고 의해 다시 쌍을 접으십시오. 한쪽에 형성 루프가 kinked 있지 않은?…
Discussion
이 프로토콜은 두 부분 프로토콜의 두 번째 할부이다 : "에 – 생체내 녹음 만성위한 마이크로 드라이브 배열입니다."마이크로 드라이브 배열과 tetrode의 조합이 깨어있는 많은 뉴런의 동시 녹음을 얻기위한 강력한 도구입니다, 동물 준비 행동. 자신의 실험실에서 electrophysiological 레코딩을 시작하거나 개선하기 위해 필요한 것이다 바라건대, 우리는 필요한 모든 정보를 제공하고 있습니다. </…
Acknowledgements
우리는 비디오에 묘사된 자동, 전동 tetrode 트위스터 장치 자신의 설계 및 시공에 대한 Jun 야마모토을 인정하고 싶습니다. 또한, 마이크로 드라이브와 연구실에 tetrode 기술 개발에 자신의 공헌에 대한 모든 과거와 현재 윌슨 연구소 회원을 인정하고 싶습니다.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Panavise
Tool
Panavise
Model 301
Holds either micro-drive array or serrated scissors
Modified Xcelite 378M Pliers
Tool
Newark
96F8903
For inserting connector board pins. To make, remove 2mm from one tip of the pliers.
Slow Cure Glue
Material
Great Planes (Champaign, IL)
GPMR6015
To glue the tetrode to the micro-drive
Gold Plating Solution
Material
Neuralynx
Sifco Selectron Gold NC
Contains gold particles for electroplating
Current Generator
Tool
World Precision Instruments
A365D-B
A.K.A. Stimulus Isolator. Used to electroplate gold solution onto electrode tips.
Impedance Meter
Tool
BAK Electronics
IMP-1 / 6662 / 2788
To check impedance of electrodes
Hot Air Gun
Tool
Steinel (Germany)
HG 3002 LCD
To fuse electrodes together to make tetrode
Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers
Tool
Aven (Ann Arbor, MI)
18768 (Pattern 304)
For handling tetrodes
Alligator Clip
Tool
Fine Science Tools
18050-35
A.K.A. Bulldog serrefine. To clip the tetrodes together during twisting
Micro Dissecting Scissors
Tool
Biomedical Research Instruments
25-1000
For general cutting of tetrode/electrode wire
Iris Toughcut Serrated Scissors
Tool
Fine Science Tools
14058-09
For final cut of tetrodes
Teflon Coated Stainless Steel Wire
Material
A-M Systems (Carlsborg, WA)
790500
Ground wire
12.5 micron nichrome wire
Material
Kanthal Palm Coast
Rediohm-800 1/4 HARD PAC COATING
Polyimide coated micro-wire for making tetrodes.
Tetrode Twister
Tool
Neuralynx
Tetrode Assembly Station
Increases the speed and consistency of tetrode fabrication.
Silver Paint
Material
GC Electronics
22-023
For connecting the micro-electrode wires of the tetrode to the connector pins (see Discussion)
Nguyen, D. P., Layton, S. P., Hale, G., Gomperts, S. N., Davidson, T. J., Kloosterman, F., Wilson, M. A. Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Tetrode Assembly. J. Vis. Exp. (26), e1098, doi:10.3791/1098 (2009).