O primata não-humano é uma importante espécie de translação para a nossa compreensão do desenvolvimento e envelhecimento. A organização anatômica da retina de primatas pode fornecer importantes insights sobre condições normais e patológicas nos seres humanos.
Abstract
O sistema visual em humanos é considerada a porta de entrada para o mundo e desempenha um papel principal na infinidade de sentidos, processos perceptivos e cognitivos. Portanto, não é surpreendente que a qualidade de visão está ligada à qualidade de vida. Apesar da pesquisa clínica e básica generalizada sobre as causas de distúrbios visuais, muitas formas de deficiência visual, tais como retinite pigmentosa e degeneração macular, a falta de tratamentos eficazes. Primatas não-humanos têm o mais próximo características gerais do desenvolvimento do olho ao dos humanos. Não só eles têm uma anatomia semelhante vascular, mas entre outros mamíferos, os primatas têm a característica única de ter uma região na retina temporal especializados para a acuidade visual de alta, a fóvea<sup> 1</sup>. Aqui nós descrevemos uma técnica geral para dissecção da retina de primatas para fornecer tecido para histologia da retina, imuno-histoquímica, microdissecção de captura de laser, assim como a luz e microscopia eletrônica. Com o uso prolongado do primata não-humano como um modelo de translação, a nossa esperança é que uma melhor compreensão da retina irá fornecer insights sobre abordagens eficazes para atenuar ou reverter o impacto negativo dos distúrbios visuais na qualidade de vida dos indivíduos afetados.
Protocol
Parte 1: Pré-processamento de tecido Tecido deve ser bem perfundidos com paraformaldeído, glutaraldeído ou formalina. Isto pode ser conseguido através de perfusão transcardial padrão normalmente utilizado para a colheita de outros órgãos. Recomenda-se que logo após o sacrifício dos olhos ser injetado com o fixador apenas sob a lente e armazenados em fixador. No presente estudo o assunto estava profundamente sedado com cloridrato de cetamina (10 mg / kg, im), sacrificados com uma overdose d…
Discussion
A preparação da retina como um wholemount permite a análise da topografia e distribuição espacial de uma camada de células do gânglio ou as células endoteliais dos vasos sanguíneos da retina 3. Quantificação da densidade de células na periferia da retina de primatas é facilmente realizado. No entanto, em regiões perifoveal e foveal, o empilhamento de múltiplas camadas na camada de células ganglionares obstrui quantificação. Para contornar esse viés potencial, a fóvea e região perifoveal p…
Acknowledgements
Os autores gostariam de agradecer Ikiel Ptito por seu apoio técnico. Somos gratos a Frank Ervin, Palmour Roberta e ao pessoal da Fundação Ciências Comportamentais Laboratories localizado em São Cristóvão, West Indies, por seu apoio contínuo do nosso trabalho de primatas.
Burke, M., Zangenehpour, S., Bouskila, J., Boire, D., Ptito, M. The Gateway to the Brain: Dissecting the Primate Eye. J. Vis. Exp. (27), e1261, doi:10.3791/1261 (2009).