De icke-mänskliga primater är en viktig translationella arter för vår förståelse av utveckling och åldrande. Den anatomiska organisation av primater näthinnan kan ge viktiga insikter i normala och patologiska tillstånd hos människor.
Abstract
Det visuella systemet hos människa anses porten till världen och spelar en huvudroll i den uppsjö av sensoriska, perceptuella och kognitiva processer. Det är därför inte förvånande att kvalitet vision är knuten till livskvalitet. Trots omfattande klinisk forskning och grundforskning kring orsakerna till synrubbningar, många former av synnedsättningar, såsom retinitis pigmentosa och makuladegeneration, saknar effektiva behandlingar. Icke-mänskliga primater har närmast allmänna dragen i ögats utveckling som människor. Inte bara de har en liknande vaskulär anatomi, men bland andra däggdjur, primater har den unika egenskapen att ha en region i den temporala näthinnan specialiserade för hög synskärpa, den fovea<sup> 1</sup>. Här beskriver vi en generell teknik för att dissekera de primater näthinnan att ge vävnad för retinal histologi, immunohistokemi, laser fånga microdissection, samt ljus-och elektronmikroskopi. Med den utökade användningen av icke-mänskliga primater som en translationell modell, är vår förhoppning att ökad förståelse av näthinnan kommer att ge insikter i effektiva metoder för att dämpa eller vända den negativa effekten av synrubbningar på livskvaliteten för drabbade individer.
Protocol
Del 1: Förbehandling av vävnad Vävnad skall vara väl perfusion med paraformaldehyd, glutaraldehyd eller formalin. Detta kan uppnås genom vanliga transcardial perfusion vanligtvis används för att skörda andra organ. Det rekommenderas att strax efter offer i ögonen injiceras med fixativ strax under linsen och lagras i fixativ. I den aktuella studien i ämnet var djupt sederad med ketamin hydroklorid (10 mg / kg im), avlivas med en överdos av natrium pentobarbital (25 mg / kg, iv) och perfusi…
Discussion
Beredningen av näthinnan som en wholemount möjliggör analys av topografi och rumsliga fördelning av antingen gangliecell lager eller endotelcellerna i näthinnans blodkärl 3. Kvantifiering av celltäthet i periferin av primat näthinnan är lätt uppnås. Men i perifoveal och foveal regioner, hindrar stapling av flera lager i ganglion cellager kvantifiering. För att kringgå detta eventuell bias kan fovea och perifoveal regionen skall dissekeras från wholemount förberedelser, inbäddade i Epon och ser…
Acknowledgements
Författarna vill tacka Ikiel Ptito för hans tekniska support. Vi är tacksamma till Frank Ervin, Roberta Palmour och personalen för beteendevetenskap Stiftelsen Laboratories i St Kitts, Västindien, för deras fortsatta stöd i vårt primat arbete.
Burke, M., Zangenehpour, S., Bouskila, J., Boire, D., Ptito, M. The Gateway to the Brain: Dissecting the Primate Eye. J. Vis. Exp. (27), e1261, doi:10.3791/1261 (2009).