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Biology

तैयारी और प्रेत घावों का उपयोग करने के लिए ठीक सुई आकांक्षा बायोप्सी अभ्यास

doi: 10.3791/1404 Published: September 29, 2009

Summary

प्रशिक्षुओं द्वारा ठीक सुई आकांक्षा बायोप्सी (FNAB) के अभ्यास अपेक्षाकृत चुनौतीपूर्ण है, एक आसानी से उपलब्ध है, उचित घाव की कमी के कारण है. FNAB प्रक्रिया और माहिर प्रवीणता अभ्यास के लिए एक ए वी प्रेत घाव की तैयारी अपेक्षाकृत आसान है.

Abstract

वर्तमान में, निवासियों और साथियों सहित स्वास्थ्य कार्यकर्ताओं को एक उपयुक्त प्रेत ठीक सुई आकांक्षा बायोप्सी प्रक्रिया (FNAB) अभ्यास मॉडल नहीं है. अतीत में, हम मानकीकृत एक लाटेकस दस्ताने FNAB अभ्यास के लिए नए सिरे से मवेशियों जिगर युक्त से मिलकर मॉडल. हालांकि, इस मॉडल को संगठित करने और अल्प सूचना पर तैयार ताजा मवेशी सबसे चुनौतीपूर्ण पहलू जा रहा है जिगर की खरीद के साथ मुश्किल है. प्रदूषण से संबंधित समस्याओं के साथ जिगर की हैंडलिंग भी वापस एक महत्वपूर्ण आकर्षण है. इसके अलावा, कुछ सुई के बाद दस्ताने सामग्री लीक गंदगी जिसके परिणामस्वरूप के साथ गुजरता है,.

हम एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध सिलिकॉन रबर गहनी करना सॉसेज या केले का एक छोटा सा टुकड़ा embedding के एक उपन्यास सरल विधि की स्थापना की है. इस मॉडल की अनुमति देता है सामग्री के वैक्यूम सील और आकांक्षा एम्बेडेड नमूना से, नैदानिक ​​जन घावों पर एक वास्तविक FNAB प्रक्रिया जैसी की अवधारण.

सुई केंद्र में aspirated सामग्री एक वास्तविक FNAB प्रक्रिया के दौरान खरीद नमूनों के समान संसाधित किया जा सकता है, स्मियर तैयारी और धुंधला में अतिरिक्त प्रवीणता की सुविधा.

Protocol

  1. प्रेत घाव की तैयारी (38 से 48 घंटे के बारे में प्रेत या FNA प्रवीणता (चित्रा 1) के वास्तविक अभ्यास सत्र के लिए पहले तैयार FNA स्रोत, संयुक्त राज्य अमेरिका से 'ए वी प्रेत' का उपयोग करने के लिए तैयार उपयोग प्रेत घाव (ठंड के बिना प्रशीतन तहत संग्रहीत) रखा भी 3 से 4 दिन पहले तैयार सत्र अभ्यास.
  2. FNA प्रवीणता अभ्यास: हालांकि हम Shidham (कार्यात्मक वाल्व के साथ ऊतक हारवेस्टर) THFV (FNA स्रोत, संयुक्त राज्य अमेरिका) का उपयोग कर प्रक्रिया का प्रदर्शन किया है, किसी भी अन्य FNA प्रणाली अभ्यास (चित्रा 2) के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
  3. फैल और गिलास स्लाइड पर aspirate (चित्रा 3) प्रसंस्करण.

आवश्यक सामग्री

  1. साफ़ सिलिकॉन रबर गहनी करना - कई निर्माण / घर सुधार दुकानों पर उपलब्ध है. कई ब्रांडों GETM, डीएपी, लाल शैतान, व्हाइट लाइटनिंग, और स्थानीय श्रृंखला ब्रांडों सहित उपलब्ध हैं. हम साफ़ सिलिकॉन रबर, व्हाइट लाइटनिंग उत्पाद, क्लीवलैंड, इस्तेमाल किया ओहियो, संयुक्त राज्य अमेरिका, http://www.wlcaulk.com/products/all_purpose/silicone_rubber/wl09010.html )
  2. Caulking बंदूक
  3. प्लास्टिक लपेटो शीट का एक टुकड़ा (हम इस्तेमाल सरन प्लस लपेटें, अनुसूचित जाति जॉनसन एंड बेटा इंक, रैसीन, WI, संयुक्त राज्य अमेरिका चिपटना http://www.saranbrands.com/plastic-wrap/index.asp
  4. लेटेक्स दस्ताने
  5. वाइड व्यास केला या सॉसेज.
  6. फर्म और फ्लैट बेस प्लेट (लगभग 6 इंच एक्स 6 इंच) मोटी कार्ड बोर्ड, एक्रिलिक थाली, या अन्य के बने.
  7. FNA उपकरणों प्रदर्शन
    • 25 गेज चमड़े के नीचे सुई
    • Shidham THFV FNA प्रदर्शन के लिए (या अन्य घटकों)
    • कांच स्लाइड
    • धुंधला किट

कदम दर कदम विवरण

प्रेत घाव तैयार (प्रेत तैयार 1 से 2 दिन पहले FNA प्रवीणता (चित्रा 2) अभ्यास या FNA स्रोत, संयुक्त राज्य अमेरिका से 'ए वी प्रेत' का उपयोग करने के लिए तैयार उपयोग.

  1. एक 6 x 6 इंच बोर्ड का समर्थन करने के आकार का काटें.
  2. एक 2.5 इंच 'प्रेत घाव कोर' (केला या सॉसेज) की लंबी खंड कट.
  3. 0.5 इंच बेस प्लेट पर गहनी करना की मोटी परत को निष्कासित.
  4. 'प्रेत घाव कोर' हल्के प्रेस गहनी करना इस परत के लिए .
  5. 'प्रेत घाव कोर' पर अधिक गहनी करना इतना है कि यह पूरी तरह से गहनी करना के टीले में एम्बेडेड है, हवा बुलबुले को फँसाने के बिना जोड़ें.
  6. समायोजित करें और दस्ताने हाथ के साथ 'प्रेत घाव कोर' पर गहनी करना आकार .
  7. एक 6 x 6 इंच प्लास्टिक की चादर के आकार टुकड़ा ले लो और गहनी करना टीले को कवर और एक साफ, दस्ताने हाथ के साथ एक चिकनी मध्योन्नत विन्यास में टीले की सतह को समायोजित.
  8. गहनी करना टीले इलाज 6-8 इलाज उत्पाद के निर्देशों के तहत उल्लेख किया है समय की तुलना में अब घंटे के लिए (आमतौर पर 24 घंटे के लिए) गर्म स्थान में, चलो.
  9. इलाज करने के बाद, गहनी फर्म है, और प्लास्टिक की चादर से खुली किया जा सकता है आसानी से.
  10. FNA प्रेत घाव के बारे में 8 घंटे जब गहनी करना के पूरे टीले को पूरी तरह से 'प्रेत घाव कोर' (केला या सॉसेज) युक्त केंद्र ठीक है FNA प्रक्रिया के बाद अभ्यास के लिए इस्तेमाल किया जा करने के लिए तैयार है.

बी अभ्यास ए.वी. प्रेत घाव पर FNA प्रवीणता.

उच्च गुणवत्ता प्राप्त करने में किसी भी दृष्टिकोण, अच्छी गुणवत्ता सीधे कोशिका विज्ञान स्मीयरों के साथ पर्याप्त FNA रेस्पायरेट्रस महत्वपूर्ण निम्नलिखित पते चाहिए अंक -

  1. सुई - गेज के रूप में प्रक्रिया के शीर्षक में निहित है, महीन सुई (उच्च गेज संख्या) कम से कम रक्त कमजोर पड़ने के साथ बेहतर रेस्पायरेट्रस उपज. लाभ और सीमाओं के महत्वपूर्ण संतुलन के लिए, 22 से 25 गेज सुई सुई का इष्टतम यांत्रिक स्थिरता के लिए FNA aspirate गुणवत्ता को प्रभावित किए बिना पसंद कर रहे हैं.
  2. FNA दौरान वैक्यूम आवेदन और रिलीज में उचित दृश्यों नियंत्रण प्रक्रिया यह महत्वपूर्ण है क्रम में के लिए सुई हब की दिशा में सुई के हर स्ट्रोक के साथ नमूना कोशिकाओं, अग्रिम है. हालांकि, aspirated सामग्री सिरिंज के साथ सुई आकांक्षा विधानसभा के क्षेत्र में पहुँच नहीं किया जा अनुमति दी जानी चाहिए. यदि यह नहीं रोका है, सामग्री स्मीयरों (इस सामग्री, हालांकि, सेल ब्लॉक तैयार करने के लिए या Cytospin रूप में एकाग्रता विधियों, फिल्टर तरीकों, या हाल ही में तरल आधारित कोशिका विज्ञान की तैयारी के लिए हो सकता है इस्तेमाल किया जा) बनाने के लिए प्राप्त करने के लिए मुश्किल हो सकता है.
  3. प्रत्यक्ष स्मीयर तैयार करने और साइट पर सेल ब्लॉक वैकल्पिक immunocytochemistry lymphoproliferative घावों के immunophenotyping के लिए वैकल्पिक प्रवाह cytometry के लिए तैयारी के रूप में सहायक परीक्षण के लिए उपयुक्त triaging के साथ पर्याप्तता मूल्यांकन सहित, aspirated नमूना के प्रसंस्करण में उपयुक्त कौशल का विकास, सूक्ष्म जीव विज्ञान के लिए बाँझ गुजरता प्रस्तुत अध्ययन दोस्त, औरआणविक परीक्षण (cytogenetics, आदि) के लिए रियाल.

बा FNA प्रक्रिया (Shidham THFV के साथ दिखाया गया है [1] (FNA स्रोत, संयुक्त राज्य अमेरिका), तथापि, किसी अन्य FNA प्रणाली का अभ्यास करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है) प्रदर्शन (3,4,5 चित्रा).

  1. FNA विधानसभा की तैयारी के साथ वाल्व बंद कर दिया.
  2. घाव का पता लगाएँ और घाव में सुई टिप सम्मिलित.
  3. वाल्व खोलने के लिए वैक्यूम कनेक्ट करने के लिए, अपने टिप के लिए सुई के माध्यम से, प्रत्येक के लिए और fro घाव में स्ट्रोक के साथ घाव के प्रतिनिधि सेलुलर घटकों aspirate.
  4. अलग अलग दिशाओं में घाव में सुई डालने से घाव की वैक्यूम और नमूना विभिन्न क्षेत्रों बनाए रखें.
  5. वाल्व बंद करने के लिए सुई लुमेन में वैक्यूम काट.
  6. परिवेश की स्थिति (सुई से एक संक्षिप्त पल के लिए सिरिंज वाल्व रखती द्वारा उदाहरण और जोड़ने. यदि THFV 'जैसे inbuilt कदम, के साथ विशेष युक्ति का प्रयोग किया जाता है, यह और अन्य कदम के माध्यम से Ba6 Ba1 से ठोस हैं के साथ दबाव बराबर वाल्व प्रणाली में विभिन्न चरणों का पालन द्वारा स्वचालित रूप से) [1].
  7. घाव से निकालें सुई के साथ वाल्व बंद, आदेश में केशिका कार्रवाई द्वारा नमूना के नुकसान को रोकने के घाव में जब तक वहाँ हब के अंत में थोड़ा नकारात्मक दबाव है.
  8. गिलास स्लाइड पर aspirated सामग्री बेदखल करने के लिए प्रत्यक्ष स्मीयर (नीचे देखें) (6 आंकड़ा) तैयार है.

बी बी उचित ट्राइएज साथ aspirated नमूना के प्रसंस्करण.
कांच स्लाइड पर aspirate फैल और अच्छी गुणवत्ता प्रत्यक्ष स्मीयरों (चित्रा 6) की तैयारी उचित धुंधला हो जाना और ट्राइएज (चित्रा 7,8) द्वारा पीछा किया.

  1. कांच स्लाइड पर उखाड़ फेंकना aspirate की एक बूंद दृष्टिकोण की एक किस्म के रूप में दिखाया गया है (चित्रा 6) [2] द्वारा फैला हुआ है. सामान्य दृष्टिकोण 'एक' है. हालांकि, अगर नमूना रक्त कुछ microfragments के साथ पतला है, अतिरिक्त रक्त झुकाव स्लाइड से दूर सूखा है, और microfragments तब इस स्लाइड और दूसरा गिलास स्लाइड 'एक' समान के बीच फैल रहे हैं. यदि aspirate मुख्य रूप से जैसे microfragments lymphoproliferative घावों से, बिना निलंबन है, यह 'ख' या 'ग' के लिए इसी तरह फैला हुआ है.
  2. स्मीयरों और संसाधित किया जा सकता है तय साइट पर पर्याप्तता मूल्यांकन के दौरान अलग धुंधला हो जाना तरीकों के लिए तरीके की विविधता में. हालांकि, सबसे अच्छा तरीका हवा शुष्क स्मीयरों है. हवा सूखे स्मीयरों Romanowski दाग (जैसे Difff Quik दाग, राइट दाग के रूप में) मेथनॉल निर्धारण के बाद या पैप के साथ साथ दाग किया जा सकता है के बाद दाग खारा पुनर्जलीकरण और बाद निर्धारण (95% इथेनॉल में या 5 के साथ 95% इथेनॉल में अधिमानतः % एसिटिक एसिड) [3] Obscuring रक्त के कारण हस्तक्षेप के उन्मूलन में एक महत्वपूर्ण [3] लाभ है.
  3. साइट पर पर्याप्तता मूल्यांकन के दौरान प्रारंभिक cytomorphologic निष्कर्षों के आधार पर, अतिरिक्त ट्राइएज (जैसे वैकल्पिक सेल ब्लॉक, इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी, सूक्ष्मजीवविज्ञान संस्कृतियों, प्रवाह cytometry, आणविक परीक्षण आदि - cytogenetics) के रूप में सिफारिश की है संकेत.

प्रतिनिधि परिणाम:

1 आंकड़ा
संख्या 1 के एक बड़ा संस्करण देख कृपया यहाँ क्लिक करें .
चित्रा 1 FNA प्रवीणता अभ्यास के लिए ए वी प्रेत की तैयारी के लिए आवश्यक सामग्री. (* हम सरन प्लास्टिक लपेटो जो अंत में गहनी करना के लिए छड़ी नहीं था का उपयोग करें, जबकि ठूंसकर बंद करना का पूरा इलाज के बाद हटाने.)


चित्रा 2
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चित्रा 2 तैयारी ए वी प्रेत घाव.


चित्रा 3
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चित्रा 3 FNA प्रक्रिया में महत्वपूर्ण कदम है .


आंकड़ा 4
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चित्रा 4. EUS-FNA क्रिटिकल कदम के सारांश * (चित्र 3 देखें)


चित्रा 5
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चित्रा 5 FNA proc में महत्वपूर्ण कदम से संबंधित नुकसानedure.


6 आंकड़ा
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चित्रा 6 FNA नमूना के दो स्लाइड्स के बीच प्रत्यक्ष स्मीयरों की तैयारी.


7 आंकड़ा
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7 चित्रा गीले तय बनाम एयर सूखे स्मीयरों.


8 आंकड़ा
कृपया यहाँ क्लिक करें आंकड़ा 8 का एक बड़ा संस्करण देख.
8 चित्रा गीले तय बनाम एयर सूखे स्मीयरों.

Discussion

ठीक सुई आकांक्षा बायोप्सी (FNAB) व्यापक रूप से विभिन्न ट्यूमर और घावों के ऊतक के निदान के लिए एक किफायती, सुरक्षित, और तेजी से न्यूनतम इनवेसिव तकनीक के रूप में प्रदर्शन कर रहे हैं. इस प्रक्रिया में 18 से 27 गेज सुई घाव में डाला जाता है, आगे और पीछे के तहत कई बार चले गए चर तीव्रता नियंत्रित (वैक्यूम चूषण) से केवल केशिका कार्रवाई के रूप में कम से कम के बारे में 10 मिलीलीटर से लेकर घाव के विभिन्न क्षेत्रों में सिरिंज में वैक्यूम नैदानिक ​​ऊतक सामग्री निकालते हैं. उच्च संख्या के साथ एक बेहतर गेज सुई के लिए अच्छा कोशिका विज्ञान सामग्री को पुनः प्राप्त करने के लिए सीधे स्मीयरों तैयार करने के लिए पसंद है. 18G सेल ब्लॉक, प्रवाह cytometry, इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी, cytogenetics, सूक्ष्मजीवविज्ञान संस्कृतियों आदि हालांकि प्रक्रिया सरल है, उचित और ठोस तरीके से उचित कदम पर वैक्यूम की रिहाई के आवेदन के साथ विभिन्न चरणों को नियंत्रित करने के लिए अधिक उपयुक्त नमूना प्राप्त की व्यापक गेज सुई अत्यंत महत्वपूर्ण है इष्टतम परिणामों के लिए.

विशेष रूप से डिजाइन उच्च उपज सुई, पारंपरिक चमड़े के नीचे सुई या उनके संशोधनों की अनुपलब्धता के कारण इस प्रक्रिया का प्रदर्शन किया जाता है. हालांकि, चमड़े के नीचे सुई कई सीमाओं नमूना की कम उपज के लिए अग्रणी अगर पारंपरिक तरीके से इस्तेमाल किया है. विशेष सिरिंज पकड़ती की आवश्यकता आमतौर पर प्रक्रिया की जटिलता के लिए कहते हैं. इस प्रकार, व्यावसायिक रूप से उपलब्ध उपयुक्त FNAB सुई डिवाइस की कमी के कारण, यह बहुत बहुमुखी प्रक्रिया अपर्याप्त नमूना पुनर्प्राप्ति के एक लगातार समस्या ग्रस्त है. हाल ही में, एक reproducibility के साथ उपज में वृद्धि डिवाइस [1] सूचित किया गया है.

इसके अलावा, वर्तमान में स्वास्थ्य कर्मियों द्वारा निवासियों और साथियों सहित प्रशिक्षण में FNAB प्रदर्शन में प्रवीणता अभ्यास के लिए उपयुक्त मॉडल की कमी है. हम मानकीकृत ताजा मवेशी जिगर FNAB प्रवीणता अभ्यास के लिए लाटेकस दस्ताने में भरवां का एक टुकड़ा के साथ एक मॉडल था. हालांकि, इस मॉडल के लिए मुश्किल है एक अल्प सूचना पर आयोजित. ताजा मवेशी जिगर की खरीद आमतौर पर सीमित दुर्दशा है. इसके अलावा, जिगर की हैंडलिंग एक महत्वपूर्ण आकर्षित के रूप में संदूषण से संबंधित कारकों वापस शुरू हो सकता है. वनस्पतिक दूध दस्ताने के लिए प्रवृत्ति को कुछ सुई चुभन के बाद रिसाव अभ्यास सत्र के दौरान संभावित गड़बड़ करने के लिए होता है.

हम रिपोर्ट और एक उपन्यास है, लेकिन एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध सिलिकॉन रबर गहनी करना और अन्य सामग्री आसानी से उपलब्ध में केले का एक छोटा सा टुकड़ा (या सॉसेज) embedding की सरल विधि का वर्णन. FNAB प्रेत वैक्यूम मुहर इस प्रकार से सामग्री की आकांक्षा की अनुमति एम्बेडेड नमूना, नैदानिक ​​सेटिंग में एक घाव पर वास्तविक FNAB प्रक्रिया के बराबर रखता है. इस वीडियो में, हम FNAB प्रेत घाव बनाने और FNAB प्रक्रिया अभ्यास की प्रक्रिया प्रदर्शित करता है. यह भी संक्षिप्त पुनर्प्राप्त नमूना के स्मियर तैयारी और [2,3] धुंधला सहित प्रसंस्करण में दर्शाता है.

क्योंकि गहनी करना करने के लिए इलाज के लिए समय लगता है, प्रेत घाव 24 से 48 घंटे के बारे में अग्रिम में तैयार किया जाना चाहिए अभ्यास सत्र से पहले. प्रेत घाव का उपयोग करने के लिए तैयार तुलनीय (FNA स्रोत, संयुक्त राज्य अमरीका) एक वाणिज्यिक स्रोत से प्राप्त किया जा सकता है.

FNAB प्रवीणता अभ्यास के लिए प्रेत घाव निवासियों और साथियों के नैदानिक ​​सेटिंग में रोगियों पर FNAB प्रदर्शन की शुरुआत से पहले प्रशिक्षण के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.

References

  1. Shidham, V. B., Pandit, A. W., Rao, R. N., Basir, Z., Shidham, A. Tissue Harvester with Functional Valve (THFV): Shidham's device for reproducibly higher specimen yield by fine needle aspiration biopsy with easy to perform steps. BMC Clinical Pathology. 7, (2), (2007).
  2. Shidham, V. B., Epple, J. AppendiX I: Collection and processing of effusion fluids for cytopathologic evaluation. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. 'Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids' First edition, Elsevier; W.B. Saunders Company. Chapter 15 207-235 (2007).
  3. Shidham, V., Kampalath, B., England, J. Routine air drying of all the smears prepared during fine needle aspiration and intraoperative cytology studies: An opportunity to practice a unified protocol, offering the flexibility of choosing variety of staining methods. Acta Cytologica. (45), 60-68 (2001).
तैयारी और प्रेत घावों का उपयोग करने के लिए ठीक सुई आकांक्षा बायोप्सी अभ्यास
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Cite this Article

Shidham, V. B., Varsegi, G. M., D'Amore, K., Shidham, A. Preparation and Using Phantom Lesions to Practice Fine Needle Aspiration Biopsies. J. Vis. Exp. (31), e1404, doi:10.3791/1404 (2009).More

Shidham, V. B., Varsegi, G. M., D'Amore, K., Shidham, A. Preparation and Using Phantom Lesions to Practice Fine Needle Aspiration Biopsies. J. Vis. Exp. (31), e1404, doi:10.3791/1404 (2009).

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