Den medföljande videon beskriver användningen av GELFREE 8100 Fraktionering System, som partitioner komplexa protein prover på grundval av molekylvikt och återvinner fraktioner i flytande fas. Videon beskriver hur tekniken fungerar, hur den används, och ger resulterande data, med polyakrylamidgelelektrofores analys av fraktionerade nötkreatur lever homogenatet.
Den GELFREE 8100 Fraktionering System är ett nytt protein fraktionering system som utformats för att maximera protein återhämtning under molekylvikt baserade fraktionering. Systemet består av engångsprodukter, 8-prov patroner kapacitet och en bänk GELFREE Fraktionering Instrument. Under separation, är en ständig spänning mellan anod och katod reservoarer och varje protein blandningen elektrofores drivs från en lastning kammare i en specialdesignad gel kolumnen gel. Proteiner är koncentrerade till ett tight band i en stapling gel, och separeras baserat på deras respektive elektrofores mobiliteter i en lösning av gel. Som proteiner rinna genom kolonnen, de är fångade och koncentrerad i flytande fas i uppsamlingsbehållaren, fri från gelen. Instrumentet är sedan pausas med bestämda tidsintervall, och fraktioner samlas in med hjälp av en pipett. Denna process upprepas tills alla önskade fraktioner har samlats in. Om färre än 8 prover körs på en kassett, kan oanvända kammare användas i senare separationer.
Denna nya teknologi möjliggör snabb och enkel separation av upp till 8 komplexa protein blandningar samtidigt, och erbjuder flera fördelar jämfört med tidigare tillgängliga fraktionering metoder. Detta system kan fraktionering upp till 1 mg av det totala protein per kanal, för totalt 8 mg per patron. Intakta proteiner över ett brett viktområde separeras på basis av molekylvikt, behålla viktiga fysiokemiska egenskaper hos analyten. Vätskefasen entrapment ger hög återhämtning samtidigt som eliminerar behovet av band eller plats skärning, vilket gör fraktioneringsprocess mycket reproducerbara 1.
Den GELFREE 8100 Fraktionering System ger en snabb, enkel och reproducerbar metod för partitionering komplexa protein prover i separata molekylvikt-baserade fraktioner. Denna nya metod för fraktionering eliminerar behovet av band eller plats skärning, vilket gör det möjligt att isolera proteiner över ett brett massa intervall i 90 minuter. Möjligheten att läsa in relativt stora mängder av prov och återhämta fraktioner i flytande fasen är särskilt användbart i isolering och analys av låg överflöd proteiner, som vanligtvis svårare att upptäcka. Den resulterande fraktioner kan sedan användas i en mängd tillämpningar, såsom LC-MS, MALDI-TOF-och immunoblotting.
The authors have nothing to disclose.