我们的协议描述了如何解剖大鼠腹部的乳腺和如何准备乳腺整个坐骑。它还介绍了如何分析乳腺形态,使用三个端点(末端芽数,上皮细胞伸长和分化),并利用这些结果来预测膳食修改暴露大鼠乳腺癌的风险<em>在子宫内</em>或期间prepuberty。
在乳腺癌显示的啮齿类动物模型的研究时, 暴露在子宫内和青春期期间,饮食/荷尔蒙因素对乳腺进行广泛的建模和重新建模,改变致癌物诱发乳腺肿瘤的易感性。类似的研究结果已在人类描述:例如,高出生体重会增加以后患乳腺癌的风险,并在童年的大豆膳食摄入量减少患乳腺癌的风险。据认为,这些产前和产后的饮食修改诱发持久的形态在乳腺的变化,反过来说,修改以后的生活中患乳腺癌的风险。这些形态的变化可能反映了表观遗传修饰,如DNA甲基化的变化,组蛋白和miRNA的表达,进而影响基因的转录。在这篇文章中,我们描述了如何在乳腺形态的变化可以预测在大鼠乳腺癌的风险。我们的协议,具体介绍如何解剖和删除大鼠腹部乳腺,以及如何准备乳腺整个坐骑。它还介绍了如何根据三个终点(末端芽数,上皮细胞伸长和分化),并利用这些数据来预测发展乳腺癌的风险分析乳腺形态。
评估乳腺形态的最终点和上皮树的生长,可用于预测是否早期的生活饮食的操作,或在子宫内或青春期的激素环境改变的其他操作,修改后乳腺癌的风险。由于在人类乳腺癌是乳腺结构(终端导管小叶单位,TDLUs)大鼠TEBs相似的启动,这种技术可用于确定早期生活中的接触可能会影响到患乳腺癌的风险。此外,乳腺密度高的妇女增加乳腺癌的4-6倍的风险,并评估乳腺上皮树的生长,可用于识别的决定因素乳腺密度和减少这种密度的因素。要获得此信息,应充分解剖乳腺,适当在玻片上捉襟见肘,因此,它的所有组件可以在显微镜下可视化。此外,适当胭脂红染色和二甲苯delipidation将提供适用于乳腺癌的风险评估的整个坐骑。
The authors have nothing to disclose.
美国国立癌症研究所(U54 CA00100970),美国国立癌症研究所(1 R03 CA150040 – 01),ACS(116602 – PF – 09 – 018 – 01 – CNE)
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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Glacial acetic acid | EM | AX0073-9 | Carnoy’s Fixative | |
Absolute ethanol | The Waner-Graham Co. | 64-17-5 | Carnoy’s Fixative | |
Carmine | Sigma | C1022 | Carmine solution | |
Aluminum potassium sulfate | Sigma | A7167 | Carmine solution |