मूल गौटिंगेन Minipig में सर्जिकल तकनीक: इंटुबैषेण, मूत्राशय कैथीटेराइजेशन, ऊरु पोत कैथीटेराइजेशन, और Transcardial छिड़काव
Summary
विज्ञान के क्षेत्र में घरेलू और लघु सूअरों का उपयोग हाल के वर्षों में काफी वृद्धि हुई है. कैसे इंटुबैषेण, transurethral मूत्राशय कैथीटेराइजेशन, और्विक धमनी और शिरा कैथीटेराइजेशन, के रूप में अच्छी तरह से transcardial छिड़काव करने के लिए प्रदर्शन करके, हम करने के लिए जैव चिकित्सा अनुसंधान में आगे गौटिंगेन minipigs के मूल्य में वृद्धि के उद्देश्य.
Abstract
The emergence of the Göttingen minipig in research of topics such as neuroscience, toxicology, diabetes, obesity, and experimental surgery reflects the close resemblance of these animals to human anatomy and physiology 1-6.The size of the Göttingen minipig permits the use of surgical equipment and advanced imaging modalities similar to those used in humans 6-8. The aim of this instructional video is to increase the awareness on the value of minipigs in biomedical research, by demonstrating how to perform tracheal intubation, transurethral bladder catheterization, femoral artery and vein catheterization, as well as transcardial perfusion.
Endotracheal Intubation should be performed whenever a minipig undergoes general anesthesia, because it maintains a patent airway, permits assisted ventilation and protects the airways from aspirates. Transurethral bladder catheterization can provide useful information about about hydration state as well as renal and cardiovascular function during long surgical procedures. Furthermore, urinary catheterization can prevent contamination of delicate medico-technical equipment and painful bladder extension which may harm the animal and unnecessarily influence the experiment due to increased vagal tone and altered physiological parameters. Arterial and venous catheterization is useful for obtaining repeated blood samples and monitoring various physiological parameters. Catheterization of femoral vessels is preferable to catheterization of the neck vessels for ease of access, when performing experiments involving frame-based stereotaxic neurosurgery and brain imaging. When performing vessel catheterization in survival studies, strict aseptic technique must be employed to avoid infections6. Transcardial perfusion is the most effective fixation method, and yields preeminent results when preparing minipig organs for histology and histochemistry2,9. For more information about anesthesia, surgery and experimental techniques in swine in general we refer to Swindle 2007. Supplementary information about premedication and induction of anesthesia, assisted ventilation, analgesia, pre- and postoperative care of Göttingen minipigs are available via the internet at http://www.minipigs.com10. For extensive information about porcine anatomy we refer to Nickel et al. Vol. 1-511.
Protocol
Discussion
इस प्रस्तुति में कैसे 12,13 अनुसंधान minipig में चार बार इस्तेमाल किया प्रक्रियाओं का प्रदर्शन करने पर कदम दर कदम निर्देश दृश्य प्रदान करता है . वर्णित तकनीकों landrace सूअरों और अन्य कुत्तों और 14 भेड़ जैसे बड़े शोध जानवरों में कम या कोई अनुकूलन के साथ इस्तेमाल किया जा सकता है. सड़न रोकनेवाला तकनीक संक्रमण से बचने के, जब अस्तित्व अध्ययन में वर्णित प्रक्रियाओं के प्रदर्शन के लिए नियोजित किया जाना चाहिए.
संज्ञाहरण के प्रेरण पशु कल्याण और वैज्ञानिक कारणों के लिए महत्वपूर्ण है, और corneal सजगता के अभाव और अच्छा पेशी छूट प्रदान करना चाहिए पहले अंतःश्वासनलीय इंटुबैषेण प्रयास किया गया है. हालांकि, क्योंकि प्रेरण के लिए इस्तेमाल किया anesthetics निर्धारित मात्रा में नहीं दी हैं, लेकिन प्रशासित जब तक वांछित प्रभाव को मनाया जाता है, यह महत्वपूर्ण है को बारीकी से apnea के जोखिम की वजह से पशु की निगरानी, विशेष रूप से 6,10 propofol का उपयोग कर यदि. Tracheal इंटुबैषेण के लिए, xylocaine स्प्रे या मांसपेशी आराम देने वाली दवाई का उपयोग ट्यूब की शुरूआत की सुविधा है, लेकिन सकता है neuromuscular ब्लॉकर्स का उपयोग केवल जो ऐसी प्रक्रियाओं में अच्छी तरह से प्रशिक्षित किया जाता है के नैतिक आवश्यकताओं के साथ इतनी के रूप में अनुरूप कर्मियों द्वारा किया जाना चाहिए. केयर इंटुबैषेण के दौरान laryngeal बीतने के घाव नहीं है, आदेश में tracheal सूजन और edema से बचने के लिए लिया जाना चाहिए. Airway शोफ NSAID या इसी तरह के विरोधी भड़काऊ 10 दवाओं के साथ इलाज किया जा सकता है. सूअर विभिन्न पदों से intubated किया जा सकता है है, लेकिन अपनी पीठ पर जानवरों उन जो नियमित रूप से मानव इंटुबैषेण ले के लिए आसान हो जाता है, के रूप में यह एक समान तरीके से 6 airway प्रस्तुत. इंटुबैषेण के दौरान सबसे आम त्रुटि घेघा, जो laryngeal बीतने जब जानवर अपनी पीठ पर रखा गया है के ठीक नीचे स्थित है में ट्यूब के अनजाने स्थान है. नोट पहली बार स्पष्ट रूप से arytenoids cartilages और मुखर रस्सियों की पहचान के बिना, ट्यूब जा कभी नहीं उन्नत करना चाहिए.
मूत्राशय के मूत्रमार्ग के माध्यम से transurethral कैथीटेराइजेशन आसानी महिला सूअरों में किया जाता है, जबकि इस प्रक्रिया अत्यंत कठिन है, 6 पुरुषों में शायद असंभव है . यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि के बाद से महिला मूत्रमार्ग छिद्र योनि के लिए पूर्वकाल है, बड़ा योनि खोलने गलती catheterized किया जा सकता है. बाँझ और disinfecting स्नेहक के उपयोग के अस्तित्व के अध्ययन के लिए सलाह दी जाती है. इसके अलावा, स्थानीय चतनाशून्य करनेवाली औषधि के प्रभाव के साथ स्नेहक कैथीटेराइजेशन प्रक्रिया को कम कर सकते हैं.
जब प्रदर्शन और्विक धमनी और शिरा catherization, पोत कैथेटर की पसंद और कैसे वे सुरक्षित हैं गैर – अस्तित्व और अस्तित्व के अध्ययन के बीच अलग करने के लिए, खासकर जब कैथेटर 6 समय की एक विस्तारित अवधि के लिए प्रत्यारोपित कर रहे हैं. पुरानी आरोपण उदाहरण के लिए कैथेटर अत्यधिक biocompatible होना चाहिए, निर्धारण के लिए अवधारण मोती या कफ के रूप में अच्छी तरह के रूप में समय पर पोत दीवार घाव नहीं है, इस प्रकार घनास्त्रता या कटाव 6 उत्प्रेरण.
वर्तमान वीडियो में, हम एक बंद transcardial छिड़काव के लिए संपीड़ित हवा द्वारा संचालित प्रणाली का उपयोग करें. एक अन्य विकल्प के लिए एक गुरुत्वाकर्षण के द्वारा संचालित प्रणाली का उपयोग करने के लिए है. संपीड़ित हवा का उपयोग कर सिस्टम की तुलना में गुरुत्वाकर्षण प्रणाली का लाभ यह है कि वे सरल, कुशल हैं, और दबाव नाड़ी तंत्र में प्रवेश हवा का कोई खतरा मौजूद है. हालांकि, हीड्रास्टाटिक दबाव गुरुत्वाकर्षण प्रणाली द्वारा exerted छिड़काव के दौरान लगातार परिवर्तन, और इस histological 15 परिणाम को प्रभावित कर सकते हैं. जिस पर प्रकार histopathological अध्ययन एक प्रदर्शन करना चाहता है के आधार पर, यह पहली बार heparinized नमक के साथ पशु perfuse फायदेमंद हो सकता है. यह विशेष रूप से importantance जब immunofluorescent धुंधला प्रदर्शन autofluorescence एरिथ्रोसाइट्स द्वारा वजह से समस्याओं से बचने के क्रम में. इसके अलावा, अगर ब्याज की अंग मस्तिष्क है, महाधमनी उतरते लगानेवाला बचाने clamped किया जा सकता है. हालांकि, सूअरों में, इस कदम अतिरिक्त जरूरत पर जोर देता विदारक और प्रक्रिया को लम्बा खींच जाएगा.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
अध्ययन आर्थिक लंडबेक फाउंडेशन, करेन एलिस जेन्सेन फाउंडेशन, केन्द्रीय डेनमार्क क्षेत्र के स्वास्थ्य रिसर्च फंड और नैदानिक चिकित्सा आरहूस विश्वविद्यालय अस्पताल के संस्थान द्वारा समर्थित किया गया था. हम डोनाल्ड एफ स्मिथ, ऐन्डर्स स्टीन सोरेनसेन, Henrik सोरेनसेन, Ettrup Christensen Asbjoern, और Paaskehoejgaard में कर्मचारियों के कुशल सहायता आभार के साथ स्वीकार करते हैं.
Materials
| Procedure | Equipment | Company | Catalogue-number |
|---|---|---|---|
| Intubation | |||
| Respirator | Datex-Ohmeda S/S Avance, GE Healthcare | 1009-9002-000 | |
| Suction with blunt tip | Unomedical | 34091181 | |
| Laryngoscope | Miller | 85-0045 (Laryngoscope set) | |
| Endotracheal tube 5.5 mm ID | Smiths Medical International Ltd. | 100/199/055 | |
| Stylet | Hudson RCI | 5-151001 | |
| Syringe 5ml | |||
| Stethoscope | Martin | 17-262-00 | |
| Bladder catherization | |||
| AquaFlate glycerine silicone Foley catheter 8-French with stylet | Rüsch | 178003 | |
| Speculum nasal | Martin | 36-859-50 | |
| Speculum rectal | Martin | 30-613-15 | |
| Blunt-tip forceps | Martin | 13-374-16 | |
| Catheter lubricant gel | |||
| Cathejell Lidocain | Montavit | CJL08501 | |
| Instillagel Comb. | Farco Pharma | 08-40-200 | |
| A4 Urine drainage bag | Unomedical | 38 155 1S | |
| Adhesive tape | |||
| Femoral artery and vein catherization </ | |||
| Scalpel | Martin | 10-295-11 | |
| Blunt-tip surgical scissors | Martin | 11-881-18 | |
| Tissue forceps | Martin | 12-100-14 | |
| Small blunt-tip surgical forceps | Martin | 13-375-13 | |
| Small self-retaining Tissue retractor | Martin | 15-753-13 | |
| Needleholder | Martin | 20-634-14 | |
| Surgical swaps | |||
| Suture with needle | |||
| Saline | |||
| Heparine | LEO | 585679 | |
| 18-gauge venflon | BD Venflon Pro | 393206 | |
| 4-French brite tip sheaths with introducer and Seldinger guide wire | Cordis | 154-2629-1/0017 | |
| Transcardial perfusion | |||
| Pressurized perfusion system | Home made from parts available in most professional hardware stores | ||
| Fume extraction system | Gram A/S | 01750000 and 0303700 | |
| Perfusant 5L | |||
| Blunt-tip surgical scissors | Martin | 11-881-18 | |
| Bone shears | F.S.T | 16150-24 | |
| Large curved tip self-holding forceps | Martin | 13-421-18 | |
| Self retaining sternal retractor | Rudolf Medical | 7520-10 | |
| Pentobarbital | The Royal Veterinary and Agricultural University (KVL) | 200 mg/ml | |
| 22-gauge venflon | BD Venflon Pro | 393202 |
References
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