使用科学的国内和小型猪在近年来有明显的增加。演示如何执行,经尿道膀胱导尿插管,股动脉和静脉插管,以及transcardial灌注,我们的目标,进一步加大在生物医学研究中的哥廷根小型猪的价值。
哥廷根小型猪研究的主题,如神经科学,毒理学,糖尿病,肥胖,和实验手术的出现,反映了人体解剖学和生理学1-6这些动物非常相似。哥廷根小型猪的大小允许使用的手术6-8在人类所使用的类似设备和先进的成像方式。本教学视频的目的是演示如何进行气管插管,经尿道膀胱插管,股动脉和静脉插管,以及transcardial灌注,增加对小型猪在生物医学研究的价值的意识。
每当一个小型猪进行全身麻醉,因为它维护了专利的气道,允许辅助通气,保护吸呼吸道,应进行气管插管。经尿道膀胱导尿,可在漫长的手术过程中提供有关水合状态的有用信息,以及肾脏和心血管功能。此外,尿导管检查可以防止污染微妙的医疗技术设备和膀胱疼痛的扩展,这可能会伤害动物和不必要的影响的实验,由于迷走神经张力增加和生理参数的改变。动脉和静脉插管获得重复的血液样本,并监测各种生理参数。涉及基于帧的立体定向神经外科和脑成像进行实验时,股血管插管导尿颈部血管四通八达的交通网络,更可取。执行船只在生存研究导尿时,必须严格无菌技术操作,以避免感染6。 Transcardial灌注是最有效的固定方法,并准备小型猪器官组织学和组织化学 2,9时,会产生杰出的成果。有关麻醉,手术和实验技术,在一般的猪的详细信息,我们是指骗取2007年。补充资料,对术前用药和麻醉诱导,辅助通气,镇痛,术前和术后护理哥廷根小型猪可通过互联网 http://www.minipigs.com 10 。有关猪解剖的广泛的信息,我们是指镍等。卷1-5 11。
此演示文稿提供了有关如何执行四个经常使用的程序,在小型猪研究12,13的视觉指示一步一步。描述的技术可以用很少或根本没有适应,长白猪的猪和其他大型研究的动物如狗和羊14。必须采用无菌技术操作,以避免感染,当生存研究中所描述的程序。
麻醉诱导是很重要的动物福利和科学的原因,并应提供角膜反射和良好的肌肉松弛的情况下,气管插管前尝试。然而,因为使用的麻醉剂诱导是不给予固定剂量,但预期的效果观察,直到管理,重要的是密切监测动物因窒息的危险,特别是如果使用异丙酚6,10。 xylocaine喷雾或肌肉松弛剂的使用气管插管,可以方便的引入管,但神经肌肉阻断剂的使用应只能由那些训练有素的这种程序,以符合道德要求的人员进行。应注意不要创伤插管时喉通道,以避免气管肿胀和水肿。 10甾体抗炎药或类似的消炎药物可以治疗呼吸道水肿。猪气管插管,可以从不同的位置,但动物在它的后面往往是定期开展人力插管容易,因为它提出以类似的方式6呼吸道。插管过程中最常见的错误是无心管放置在食管,喉通道时,动物是在它的后面正好低于位于。请注意,不应该管的先进没有首先清晰地识别arytenoids软骨和声带。
经尿道经尿道膀胱导尿是在女猪很容易做到,而这个过程是非常困难的,也许是不可能的,在男性6,的。应该指出,因为女性的尿道口阴道前,阴道口较大,可误插管。灭菌和消毒润滑剂的使用是最好的生存研究。此外,局部麻醉作用的润滑剂,可缓解导尿过程。
当执行股动脉和静脉catherization,血管导管的选择和如何担保非生存和生存研究之间的差异,尤其是当导管植入时间6长时间。例如慢性植入导管应高度生物相容性,有固定的保留或袖口珠,以及不随着 时间的推移创伤的血管壁,从而诱发血栓形成或侵蚀6。
在目前的视频中,我们使用一个封闭的系统,由压缩空气驱动transcardial灌注。另一种选择是使用由重力驱动系统。重力系统,压缩空气系统利用比较优势的是,他们是简单,高效,目前没有加压空气进入血管系统的风险。然而,重力系统施加静水压力不断变化,在灌注过程中,这可能会影响的 15个组织学结果。根据一个要执行的组织病理学研究哪种类型,它可能是有利的肝素生理盐水灌注与动物的。这是特别importantance进行免疫荧光染色时,为了避免红细胞引起的自体荧光的问题。此外,如果感兴趣的器官是大脑,可以钳制降主动脉保存固定液。然而,在猪,这一步需要额外的解剖,并将延长的过程。
The authors have nothing to disclose.
这项研究是由Lundbeck公司基金会,克伦Elise的詹森基金会,丹麦中部地区的卫生研究基金和奥胡斯大学医院临床医学研究所的财政支持。我们承认唐纳德F史密斯,安德斯斯蒂恩Soerensen,亨里克Soerensen,Asbjoern Ettrup – 克里斯滕森,并在Paaskehoejgaard工作人员娴熟的援助表示感谢。
Procedure | Equipment | Company | Catalogue-number |
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Intubation | |||
Respirator | Datex-Ohmeda S/S Avance, GE Healthcare | 1009-9002-000 | |
Suction with blunt tip | Unomedical | 34091181 | |
Laryngoscope | Miller | 85-0045 (Laryngoscope set) | |
Endotracheal tube 5.5 mm ID | Smiths Medical International Ltd. | 100/199/055 | |
Stylet | Hudson RCI | 5-151001 | |
Syringe 5ml | |||
Stethoscope | Martin | 17-262-00 | |
Bladder catherization | |||
AquaFlate glycerine silicone Foley catheter 8-French with stylet | Rüsch | 178003 | |
Speculum nasal | Martin | 36-859-50 | |
Speculum rectal | Martin | 30-613-15 | |
Blunt-tip forceps | Martin | 13-374-16 | |
Catheter lubricant gel | |||
Cathejell Lidocain | Montavit | CJL08501 | |
Instillagel Comb. | Farco Pharma | 08-40-200 | |
A4 Urine drainage bag | Unomedical | 38 155 1S | |
Adhesive tape | |||
Femoral artery and vein catherization </ | |||
Scalpel | Martin | 10-295-11 | |
Blunt-tip surgical scissors | Martin | 11-881-18 | |
Tissue forceps | Martin | 12-100-14 | |
Small blunt-tip surgical forceps | Martin | 13-375-13 | |
Small self-retaining Tissue retractor | Martin | 15-753-13 | |
Needleholder | Martin | 20-634-14 | |
Surgical swaps | |||
Suture with needle | |||
Saline | |||
Heparine | LEO | 585679 | |
18-gauge venflon | BD Venflon Pro | 393206 | |
4-French brite tip sheaths with introducer and Seldinger guide wire | Cordis | 154-2629-1/0017 | |
Transcardial perfusion | |||
Pressurized perfusion system | Home made from parts available in most professional hardware stores | ||
Fume extraction system | Gram A/S | 01750000 and 0303700 | |
Perfusant 5L | |||
Blunt-tip surgical scissors | Martin | 11-881-18 | |
Bone shears | F.S.T | 16150-24 | |
Large curved tip self-holding forceps | Martin | 13-421-18 | |
Self retaining sternal retractor | Rudolf Medical | 7520-10 | |
Pentobarbital | The Royal Veterinary and Agricultural University (KVL) | 200 mg/ml | |
22-gauge venflon | BD Venflon Pro | 393202 |