二次电喷雾电离质谱(SESI – MS),挥发性有机化合物(VOCs)的检测,而不需要任何样品预处理。该协议提供迅速细菌使用SESI – MS的挥发性有机化合物的特性(在几分钟之内)的说明。
二次电喷雾电离质谱(SESI – MS),开发快速检测挥发性化合物的方法,而不需要样品预处理,一个。该方法最初是由芬恩和他的同事1,并已应用于检测非法毒品和爆炸物 3-4,皮肤挥发物 5的特性,并分析呼吸6-7。
SESI发生电离电的解决方案和挥发性待测之间的质子转移反应,因此适合杂有机分子的分析,就像在传统的电喷雾电离(ESI)。不过,与标准ESI,SESI质子转移过程发生在气相中的解决方案,而不是(图1),因此SESI最好是适合用于检测有机挥发物和气溶胶。
我们正在扩大使用SESI – MS检测细菌挥发物作为细菌的鉴定和表征 8方法。我们已经证明,SESI – MS挥发的指纹,与统计分析方法相结合,可以用来区分在生长介质的各种细菌属,种和混合文化,在这里,我们提供获得细菌使用SESI挥发指纹的步骤 – MS,包括应该优化,以确保强大的细菌的鉴定和表征的仪器参数。
细菌产生的挥发物的不同组合,可利用 10-12细菌鉴定及代谢状况的评估。这里描述SESI – MS法提供了一种快速定性没有任何样品制备细菌挥发物(在两分钟或更少),产生细菌的“指纹”鉴定的品种在过去的几十年的其他8个大气压电离手段。 MS技术已应用于挥发性化合物的特性,包括选择性离子流管(SIFT)和质子转移反应质谱(PTR)。 SESI这些等离子的方法提供的独特优势在于,它是可能的特定片段峰(提供适当类型的质谱仪,已被改编为SESI),这是一个化合物鉴定的重要工具。我们没有解决在上面列出的协议的高峰碎片,但如何可用于细菌挥发物的定性碎片信息的例子,请参阅 朱 ,等。8
SESI – MS直接应用在原位检测细菌性肺部感染,通过呼吸分析,但也可以适用于任何设置挥发采样。例如,挥发物在尿液,血液,呼吸,这是相关的代谢紊乱的诊断分析,胃肠道疾病,癌症和环境接触,是非常适合SESI – MS 13,14 SESI – MS也有广泛的非临床VOC指纹识别应用程序,包括食品与成熟,老化,或破坏相关的特征挥发物的快速分析 15-18 。
The authors have nothing to disclose.
这项工作是由美国国立卫生研究院授予RR021905 P20 – 01,CF RPD授予STANTO07R0,以及美国航空航天局授予NNH09ZNE002C。
Material Name | Type | Company | Catalogue # | Comment |
API-3000 Triple Quadrupole | Instrument | SCIEX | Purchased with Analyst 1.4.2 (Applied Biosystems) | |
SESI Ion Source | Instrument | Custom-made; See reference 6 | ||
Gas flow meter | Equipment | Cole-Parmer | EW-03217-74 | |
Carbon dioxide | Equipment | Airgas | CD I300 | ≥ 99.99% pure |
Nitrogen | Equipment | Airgas | NI UHP300 | Ultra high purity |
100 mL glass media bottles | Equipment | VWR | 89012-114 | GL45 screw threads |
Bottle caps with luer ports | Equipment | Bio Chem Fluidics | 00945T-3 | Cap assembly |
Luer port plugs | Equipment | Bio Chem Fluidics | 009LP | Cap assembly |
Tubing 1/4″ (OD) x 1/8″ (ID) | Equipment | Cole-Parmer | EW-95875-02 | Cap assembly & gas transfer lines |
Tubing 1/8″ (OD) x 1/16″ (ID) | Equipment | Cole-Parmer | EW-06605-27 | Cap assembly |
Two-way valves | Equipment | Cole-Parmer | 07391-04 | Cap assembly |
Filter, Grade AAQ | Equipment | Balston Filters | 9922-05 | |
Formic acid, LC/MS grade | Reagent | Fisher | A117-05AMP | Electrospray solution |
Methanol, LC/MS grade | Reagent | Fisher | A456-500 | Electrospray solution |
Water, LC/MS grade | Reagent | Fisher | W6-500 | Electrospray solution |