보조 전기 분무 이온화 질량 분석계 (SESI – MS)은 샘플 전처리가 필요하지 않고 휘발성 유기 화합물 (휘발성 유기 화합물)의 검출이 가능합니다. 이 프로토콜은 SESI – MS를 사용하여 세균 휘발성 유기 화합물의 급속한 (분 이내) 특성화하기위한 지침을 제공합니다.
보조 전기 분무 이온화 질량 분석계 (SESI – MS)는 샘플 전처리가 필요없이, 휘발성 화합물의 신속한 감지를 위해 개발된 방법입니다. 방법은 먼저 펜 및 동료 1 설명되었으며 불법 마약 2 폭발물 3-4, 피부 휘발성 물질 5 특성과 호흡 6-7의 분석의 검출에 적용되었습니다.
SESI 이온화는 전기 분무 솔루션과 휘발성 analyte 사이 프로톤 전달 반응에 의해 발생하고, 마찬가지로 전통적인 전기 분무 이온화 (ESI)에, 이종 유기 분자의 분석에 따라서 적합합니다. 그러나, 표준 ESI 달리 SESI의 프로톤 전송 과정은 솔루션의 기상 단계보다는 (그림 1)에서 발생하고, 따라서 SESI 유기 휘발성 물질과 에어로졸 검출에 가장 적합합니다.
우리는 박테리아 식별 및 특성 8 방법으로 세균 휘발성 물질의 검출에 SESI – MS의 이용을 확대하고 있습니다. 우리는 통계 분석 방식과 결합된 SESI – MS 휘발성 지문이, 성장 매체의 다양한 세균 장군, 종, 그리고 혼합 문화를 차별화하는 데 사용할 수있는 것을 증명하고있다. 8 자 SESI을 사용하여 박테리아 휘발성 지문을 취득하는 단계를 제공합니다 강력한 박테리아 식별 및 특성화를 위해 최적화되어야 수단 매개 변수를 포함 – MS.
박테리아는 박테리아 식별 10-12과 신진 대사 상태의 평가를 위해 활용할 수있는 휘발성 물질의 다양한 조합을 생산하고 있습니다. SESI – MS 방법은 여기서 설명하는 것은 급속하게 종족의 식별을위한 박테리아 "지문"을 생성하는 샘플 준비를하지 않고 박테리아 휘발성 물질을 (두 분 이내에) 특성화하는 수단을 제공합니다. 지난 몇 십년 8 다른 대기압 이온화가 MS의 기술은 선택적 이온 유동 튜브 (선별)과 프로톤 전달 반응 (PTR) 질량 분광법을 포함한 휘발성 화합물의 특성에 적용되었습니다. SESI이 다른 이온화 방법을 통해 제공하는 독특한 장점은 복합 식별을위한 중요한 도구입니다 조각 구체적인 봉우리 (SESI에 맞게 조정될 수 있습니다 질량 분석기의 적절한 유형을 제공) 할 수있다는 것입니다. 우리는 위에 나열된 프로토콜의 정상 분열을 해결하지만, 조각화 정보는 세균 휘발성 물질의 특성에 사용할 수있는 방법의 예를 들면, 외, Zhu을 참조하시기 바랍니다 않았 8.
SESI – MS 숨을 분석을 통해 세균성 폐 감염의 현장 검출에 직접 응용 프로그램을 가지고 있지만, 휘발성 샘플링이 가능합니다 어느 설정에도 적용할 수 있습니다. 예를 들어, 신진 대사 질환의 진단에 관련된 소변, 혈액 및 호흡에 휘발성 물질의 분석은 위장 질환, 암, 및 환경 노출은 잘 SESI – MS에 적합합니다. 13,14 SESI – MS도있다 , 숙성 노화, 또는 망치고과 관련된 특성 휘발성 물질에 대한 식품의 신속한 분석을 포함하지 않은 임상 VOC 지문 애플 리케이션의 광범위한. 15-18
The authors have nothing to disclose.
이 작품은 NIH 그랜트 P20 RR021905 – 01, CF RPD 부여 STANTO07R0, 그리고 NASA 부여 NNH09ZNE002C에 의해 후원됩니다.
Material Name | Type | Company | Catalogue # | Comment |
API-3000 Triple Quadrupole | Instrument | SCIEX | Purchased with Analyst 1.4.2 (Applied Biosystems) | |
SESI Ion Source | Instrument | Custom-made; See reference 6 | ||
Gas flow meter | Equipment | Cole-Parmer | EW-03217-74 | |
Carbon dioxide | Equipment | Airgas | CD I300 | ≥ 99.99% pure |
Nitrogen | Equipment | Airgas | NI UHP300 | Ultra high purity |
100 mL glass media bottles | Equipment | VWR | 89012-114 | GL45 screw threads |
Bottle caps with luer ports | Equipment | Bio Chem Fluidics | 00945T-3 | Cap assembly |
Luer port plugs | Equipment | Bio Chem Fluidics | 009LP | Cap assembly |
Tubing 1/4″ (OD) x 1/8″ (ID) | Equipment | Cole-Parmer | EW-95875-02 | Cap assembly & gas transfer lines |
Tubing 1/8″ (OD) x 1/16″ (ID) | Equipment | Cole-Parmer | EW-06605-27 | Cap assembly |
Two-way valves | Equipment | Cole-Parmer | 07391-04 | Cap assembly |
Filter, Grade AAQ | Equipment | Balston Filters | 9922-05 | |
Formic acid, LC/MS grade | Reagent | Fisher | A117-05AMP | Electrospray solution |
Methanol, LC/MS grade | Reagent | Fisher | A456-500 | Electrospray solution |
Water, LC/MS grade | Reagent | Fisher | W6-500 | Electrospray solution |