Пощадили повреждение нерва животного модель описывается здесь как мышь модель периферической нейропатической боли после частичной денервации седалищного нерва lesioning большеберцового и общего малоберцового ветвей нерва, оставив икроножных нервов нетронутым. Поведенческие модификации в результате механической аллодиния можно измерить с помощью нитей фон Фрей.
Периферийные нейропатической боли является тяжелым хроническим заболеванием боль, которая может быть результатом травмы чувствительных нервов в периферической нервной системе. Пощадили повреждение нерва (SNI) модель вызывает симптомы нейропатической боли, такие как механическая боль аллодиния т.е. из-за тактильные раздражения, которые обычно не вызывают болезненных ответ [1].
Модель SNI мыши включает перевязку двух из трех ветвей седалищного нерва (большеберцового нерва и общего малоберцового нерва), а икроножных нервов остается без изменений [2]. Поражение приводит к повышенной чувствительности отмечен в боковой площади лапу, которая иннервируется пощадил икроножных нерва. Неоперированных сторону мышь можно использовать в качестве контроля. Преимущества модели SNI являются надежность и ответ, что он не требует навыков эксперт микрохирургических.
Порог для механического ответа боли определяется путем тестирования с фон нитей Фрей увеличения силы изгиба, которые многократно прижимается боковой площади лапу [3], [4]. Положительная реакция боль определяется как внезапное снятие лапу, дрогнув и / или лапу лизать индуцированных нити. Положительный отклик в трех из пяти повторяющихся стимулов определяется как болевой порог.
Как показано в видео-протокол, C57BL / 6 мышей опыт глубокого аллодиния уже на следующий день после операции и сохранить это в течение нескольких недель.
Критические шаги
Повреждение нервов икроножных следует избегать в целях изучения патологических изменений в нетронутой икроножных травмы следующие нерв голени и общего малоберцового нервов. Сопутствующий ущерб в икроножных нерва может привести к параличу и тем самым могут быть представлены в виде увлечения работают задние конечности.
Только боковые стороны лапы иннервируется пощадил икроножных нервов и, следовательно, только в этой области развивается нейропатия. Тестирование других областях, иннервируемых пересекаются нервы, может сильно искажать результаты оценки измененных механических порога.
Возможные изменения
Другие виды перевязки может быть дополнительным с точки зрения изучения патологических состояний боли после травмы периферических нервов, таких как хронические травмы сужение [5] или частичной перевязке нервов [6]. Каждый экспериментальных результатов процедуры в различных фенотипические изменения, которые должны быть рассмотрены до послеоперационного тестирования.
Кроме того, в других сенсорных тестов, таких как тепловой гипералгезии может быть применен [7], хотя этот фенотип менее надежные следующие SNI.
Будущие приложения
Этот метод может быть использован для тестирования лекарств изменяя развития или поддержания механической аллодиния [8]. Анализ седалищного нерва, спинной ганглий корня (DRG) и / или поясничного спинного мозга позволяют исследование молекулярных механизмов, ответственных за индуцированного фенотипа.
Эксперименты на животных проводили в соответствии с надлежащей лабораторной практики в полное соответствие с датскими и европейскими нормами. Все эксперименты были одобрены датский эксперименты на животных, инспекция при Министерстве юстиции (разрешения числа 2006/561-1206).
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была поддержана фондом Lundbeck, Carlsberg фонда и Фонда Маршалла Дагмар.
Anesthesia: Ketamine and Xylazine | Scalpel |
Ophthalmic ointment | Pair of tweezers nr. 2 |
Electric razor | Pair of tweezers nr. 5 |
Gloves | Pair of scissors for blunt dissection |
70% (v/v) ethanol | Micro scissors |
Cotton-wool buds/gaze | 6.0 Prolene non-absorbable suture |
Stereo microscope | 2 x needle holders |
Adhesive tape | Heat pad |
von Frey filaments (0.02 – 2.0 g for mice) (Stoelting) |