Die Verschont Nerve Injury Tiermodell wird hier als ein Maus-Modell von peripheren neuropathischen Schmerzen nach einer partiellen Denervation der Ischiasnerv durch Läsion der Tibia-und N. peronaeus Filialen beschrieben, so dass die verbleibenden Nervus suralis intakt. Verhaltensmodifikation durch mechanische Allodynie wird durch von Frey Filamente quantifiziert.
Periphere neuropathische Schmerzen ist eine schwere chronische Schmerzen Bedingung, die von einem Trauma zu sensiblen Nerven in den peripheren Nervensystems führen kann. Das erspart Nervenverletzung (SNI) Modell induziert Symptome der neuropathischen Schmerzen wie mechanische Allodynie, dh Schmerzen durch taktile Reize, die normalerweise nicht provozieren eine schmerzhafte Reaktion [1].
Die SNI Mausmodell handelt Ligation von zwei der drei Zweige der Ischiasnerv (Nervus tibialis und der N. peronaeus), während der N. suralis ist intakt [2]. Die Läsion Ergebnisse in deutlichem Überempfindlichkeit im seitlichen Bereich der Pfote, die durch die verschont suralis innerviert ist. Die nicht operierten Seite der Maus können als Kontrolle verwendet werden. Die Vorteile des SNI-Modell sind die Robustheit der Reaktion, und dass es nicht erforderlich Experte mikrochirurgische Fähigkeiten.
Die Schwelle für mechanische Schmerzreaktion wird durch Tests mit von Frey Filamente der zunehmenden Biegekraft, die wiederholt gegen die seitlichen Bereich der Pfote gedrückt werden bestimmt [3], [4]. Eine positive Schmerzreaktion als plötzlich Pfote Rückzug definiert, der Wimper zu zucken und / oder Pfote leckt induziert durch das Filament. Eine positive Reaktion in drei von fünf repetitive Reize als Schmerzgrenze definiert.
Wie im Video-Protokoll zeigte, Erfahrung C57BL / 6 Mäusen tiefe Allodynie so früh wie am ersten Tag nach der Operation und Pflege dieser für mehrere Wochen.
Kritische Schritte
Schäden an der Nervus suralis sollte vermieden werden, um pathologische Veränderungen in den intakten N. suralis nach Verletzungen der Tibia und gemeinsame peroneus zu studieren. Kollateralschäden an der N. suralis kann zu Lähmungen führen und damit sichtbar gemacht werden wie das Ziehen des operierten Hinterbein.
Nur der lateralen Seite der Pfote wird durch die verschont suralis innerviert und damit entwickelt sich nur dieser Bereich Neuropathie. Testen anderen Bereichen, durch die durchtrennten Nerven innerviert, kann stark spannen die Auswertung der veränderten mechanischen Schwelle.
Mögliche Änderungen
Andere Arten von Ligationen können Zusatzprogramme werden in Bezug auf das Studium pathologischer Schmerzzustände folgenden peripheren Nervenverletzung, wie chronische Verengung Verletzungen [5] oder teilweise Nerven Ligation [6]. Jede experimentelle Vorgehen führt zu deutlichen phänotypische Veränderungen, die vor dem postoperativen Tests in Betracht gezogen werden sollte.
Darüber hinaus können auch andere sensorische Tests wie thermische Hyperalgesie [7] angewendet werden, obwohl dieser Phänotyp ist weniger robust folgenden SNI.
Zukünftige Anwendungen
Diese Technik kann für die Prüfung von Medikamenten verändern die Entwicklung oder Wartung von mechanischer Allodynie eingesetzt werden [8]. Die Analyse der Ischiasnerv, damit die Spinalganglien (DRG) und / oder der Lendenwirbelsäule Rückenmark Erforschung der molekularen Mechanismen, die für die induzierte Phänotyp.
Tierversuche wurde nach guter Laborpraxis in voller Übereinstimmung mit dem dänischen und europäischen Vorschriften durchgeführt. Alle Experimente wurden von der dänischen Tierversuche Inspectorate unter dem Ministry of Justice (Erlaubnis Nummer 2006/561-1206) zugelassen.
The authors have nothing to disclose.
Diese Arbeit wurde von der Lundbeck-Stiftung, die Carlsberg-Stiftung und Dagmar Marshall-Stiftung unterstützt.
Anesthesia: Ketamine and Xylazine | Scalpel |
Ophthalmic ointment | Pair of tweezers nr. 2 |
Electric razor | Pair of tweezers nr. 5 |
Gloves | Pair of scissors for blunt dissection |
70% (v/v) ethanol | Micro scissors |
Cotton-wool buds/gaze | 6.0 Prolene non-absorbable suture |
Stereo microscope | 2 x needle holders |
Adhesive tape | Heat pad |
von Frey filaments (0.02 – 2.0 g for mice) (Stoelting) |