Le modèle du nerf Epargnée blessures animal est décrit ici comme un modèle murin de douleur neuropathique périphérique suivantes dénervation partielle du nerf sciatique par lesioning les branches du tibia et du nerf péronier commun, laissant le nerf saphène reste intacte. Modification du comportement résultant d'allodynie mécanique est quantifiée par des filaments de von Frey.
La douleur neuropathique périphérique est une affection chronique grave des douleurs qui peuvent résulter d'un traumatisme des nerfs sensoriels dans le système nerveux périphérique. La blessure épargné nerveuses (SNI) du modèle induit des symptômes de la douleur neuropathique comme l'allodynie mécanique à savoir la douleur due à des stimuli tactiles qui n'ont normalement pas provoquer une réaction douloureuse [1].
Le modèle de souris SNI implique la ligature de deux des trois branches du nerf sciatique (nerf tibial et le nerf fibulaire commun), tandis que le nerf sural est laissé intact [2]. Les résultats des lésions dans l'hypersensibilité marquée dans la zone latérale de la patte, qui est innervé par le nerf sural épargné. Le côté non opéré de la souris peut être utilisée comme contrôle. Les avantages du modèle SNI sont la robustesse de la réponse et qu'il ne nécessite pas de compétences d'experts de microchirurgie.
Le seuil de réponse à la douleur mécanique est déterminée par des essais avec des filaments de von Frey de force de flexion croissante, qui sont répétitivement pressé contre la surface latérale de la patte [3], [4]. Une réaction à la douleur positif est défini comme retrait de la patte soudain broncher et / ou de patte léchage induit par le filament. Une réponse positive dans trois des cinq stimuli répétitifs est défini comme le seuil de douleur.
Tel que démontré dans le protocole vidéo, souris C57BL / 6 expériences allodynie profonde dès le jour suivant la chirurgie et de maintenir ce pendant plusieurs semaines.
Les étapes critiques
Dommages au nerf sural doit être évitée afin d'étudier les changements pathologiques dans les lésions du nerf saphène intacte suivants pour les nerfs tibial et fibulaire commun. Les dommages collatéraux du nerf sural peut conduire à la paralysie et peut donc être visualisé comme glisser du membre opéré postérieurs.
Seul le côté latéral de la patte est innervée par le nerf sural épargnée et, par conséquent, seule cette zone développe une neuropathie. Test d'autres domaines, innervée par les nerfs sectionnés, peut fortement biais de l'évaluation de seuil mécanique modifiée.
D'éventuelles modifications
D'autres types de ligatures peuvent être complémentaires en termes d'étudier les conditions suivantes douleur pathologique des lésions nerveuses périphériques, tels que les blessures constriction chronique [5] ou la ligature partielle du nerf [6]. Chaque procédure expérimentale dans les résultats des changements phénotypiques distinctes qui devraient être considérés avant de post-opératoires d'essai.
Par ailleurs, d'autres tests sensoriels tels que l'hyperalgésie thermique peut être appliquée [7], bien que ce phénotype est moins robuste SNI suivant.
Les applications futures
Cette technique peut être utilisée pour les tests de médicaments altérant le développement ou le maintien de l'allodynie mécanique [8]. Analyse du nerf sciatique, les ganglions de la racine dorsale (DRG) et / ou la moelle épinière lombaire permettre à la recherche des mécanismes moléculaires responsables du phénotype induit.
L'expérimentation animale a été réalisée selon bonnes pratiques de laboratoire en pleine conformité avec la réglementation danoise et européenne. Toutes les expériences ont été approuvés par l'expérimentation animale danoises Inspection du ministère de la Justice (2006/561-1206 nombre permission).
The authors have nothing to disclose.
Ce travail a été soutenu par la Fondation Lundbeck, la Fondation Carlsberg et Dagmar Marshall de la Fondation.
Anesthesia: Ketamine and Xylazine | Scalpel |
Ophthalmic ointment | Pair of tweezers nr. 2 |
Electric razor | Pair of tweezers nr. 5 |
Gloves | Pair of scissors for blunt dissection |
70% (v/v) ethanol | Micro scissors |
Cotton-wool buds/gaze | 6.0 Prolene non-absorbable suture |
Stereo microscope | 2 x needle holders |
Adhesive tape | Heat pad |
von Frey filaments (0.02 – 2.0 g for mice) (Stoelting) |