Den skonas Nerve Injury djurmodell beskrivs här som en musmodell av perifer neuropatisk smärta efter partiell denervering av ischiasnerven som lesioning den sken-och gemensamma peroneusnerven grenar och lämnar de övriga Sural nerven intakt. Beteendemodifikation följd av mekanisk allodyni kvantifieras av von Frey filament.
Perifer neuropatisk smärta är en svår kroniskt smärttillstånd som kan uppstå genom trauma till sensoriska nerverna i perifera nervsystemet. De skonade nervskada (SNI) modell framkallar symtom på neuropatisk smärta, såsom mekanisk allodyni, dvs smärta på grund av taktila stimuli som normalt inte provocera fram ett smärtsamt svar [1].
Den SNI musmodell innebär ligation av två av de tre grenarna av ischiasnerven (tibial nerv och det gemensamma peroneusnerven), medan Sural nerven finns kvar intakt [2]. Lesionen resulterar i markerad överkänslighet i laterala delen av tassen, som innerveras av de skonade Sural nerv. Den icke-opererade sidan av musen kan användas som en kontroll. Fördelarna med SNI modellen är robustheten i svaret och att den inte kräver kompetens expert mikrokirurgisk.
Tröskeln för mekanisk smärta reaktion bestäms genom att testa med von Frey filament av ökad böjning kraft, som upprepade gånger pressas mot den laterala delen av tassen [3], [4]. En positiv smärta reaktion definieras som plötsliga tassen tillbakadragande, blinka och / eller tass slicka framkallas av glödtråden. Ett positivt svar i tre av fem repetitiva stimuli definieras som smärtgräns.
Som framgår i videon protokollet, C57BL / 6 möss erfarenhet djupa allodyni redan dagen efter operation och upprätthålla detta i flera veckor.
Kritiska steg
Skador på Sural nerv bör undvikas för att studera sjukliga förändringar i den intakta Sural nerv efter skada på sken-och gemensamma peroneal nerver. Säkerheter skador på Sural nerv kan leda till förlamning och kan därmed visualiseras som att dra av det opererade bakbenen.
Endast den laterala sidan av tassen är innerveras av skonade Sural nerv och därmed utvecklar endast detta område neuropati. Testa andra områden, innerveras av transected nerver, kan starkt partiskhet utvärdering av ändrade mekanisk tröskel.
Möjliga ändringar
Andra typer av ligations kan vara kompletterande i termer av att studera patologiska smärttillstånd efter perifer nervskada, till exempel kronisk sammandragning skador [5] eller delvis nerv ligation [6]. Varje experimentella procedur resulterar i olika fenotypiska förändringar som bör övervägas före efter operation testning.
Dessutom kan andra sensoriska tester såsom termisk hyperalgesi tillämpas [7], även om detta fenotyp är mindre robust följande SNI.
Framtida tillämpningar
Denna teknik kan användas för testning av läkemedel förändra utveckling eller underhåll av mekanisk allodyni [8]. Analys av ischiasnerven, dorsalrotsganglier (DRG) och / eller ländryggen ryggmärgen tillåta forskning om de molekylära mekanismerna ansvariga för den inducerade fenotypen.
Djurförsök har utförts enligt god laboratoriesed i full överensstämmelse med danska och europeiska regler. Alla experiment har godkänts av den danska djurförsök Inspektionen under justitieministeriet (tillstånd antal 2006/561-1206).
The authors have nothing to disclose.
Detta arbete stöddes av Lundbeck Foundation, Carlsberg Foundation och Dagmar Marshall Foundation.
Anesthesia: Ketamine and Xylazine | Scalpel |
Ophthalmic ointment | Pair of tweezers nr. 2 |
Electric razor | Pair of tweezers nr. 5 |
Gloves | Pair of scissors for blunt dissection |
70% (v/v) ethanol | Micro scissors |
Cotton-wool buds/gaze | 6.0 Prolene non-absorbable suture |
Stereo microscope | 2 x needle holders |
Adhesive tape | Heat pad |
von Frey filaments (0.02 – 2.0 g for mice) (Stoelting) |