Dynamique présynaptique de la dopamine dans le striatum avec des tranches de cerveau de voltampérométrie cyclique à balayage rapide
Summary
L'utilisation de voltampérométrie cyclique balayage rapide pour mesurer la dynamique évoquée électriquement présynaptique de la dopamine dans le striatum des tranches de cerveau.
Abstract
Des recherches approfondies ont porté sur la dopamine, un neurotransmetteur en raison de son importance dans le mécanisme d'action de l'abus des drogues (cocaïne et d'amphétamines par exemple), le rôle qu'elle joue dans les maladies psychiatriques (schizophrénie et de trouble d'hyperactivité avec déficit de l'attention), et son implication dans dégénératives troubles comme le Parkinson et la maladie de Huntington. Sous des conditions physiologiques normales, la dopamine est connue pour réguler l'activité locomotrice, la cognition, l'apprentissage, affectent émotionnel, et la sécrétion d'hormones neuroendocrines. Une des plus grandes densités de neurones dopaminergiques est dans le striatum, qui peut être divisé en deux régions distinctes neuroanatomiques connu comme le noyau accumbens et le noyau caudé-putamen. L'objectif est d'illustrer un protocole général pour la voltamétrie cyclique tranche de balayage rapide (FSCV) dans le striatum de souris. FSCV est une technique bien définie électrochimique fournissant l'occasion de mesurer la libération de dopamine et de l'absorption en temps réel dans drégions du cerveau iscrete. Microélectrodes en fibre de carbone (diamètre de ~ 7 pm) sont utilisés dans FSCV pour détecter l'oxydation de dopamine. L'avantage d'utiliser des analyses pour détecter FSCV dopamine est sa résolution temporelle accrue de 100 millisecondes et une résolution spatiale de moins de dix microns, fournissant des informations complémentaires à la microdialyse in vivo.
Protocol
Discussion
Le protocole présenté ici montre comment préparer et utiliser des tranches de cerveau de souris pour des expériences FSCV coronale. Bien que cette méthode est spécifique à l'obtention et la mesure de la dynamique de la dopamine, d'autres neurotransmetteurs tels que l'adénosine, le peroxyde d'hydrogène, la noradrénaline et la sérotonine ont été suivis in vivo ou in vitro avec FSCV 3, 8 – 11. FSCV peut être utilisé pour surveiller certains de ces autres neurotran…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Le financement fourni par le National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism (NIAAA, AA-016 967 et AA016967-01S1; TAM), Wayne State University fonds de démarrage, et la Wayne State University Research Grant Programme. Le contenu est exclusivement la responsabilité de leurs auteurs et ne représentent pas les vues officielles de NIAAA ou les National Institutes of Health.
Materials
| Name | Company | CAS number |
Reagent |
||
Potassium Chloride |
Fisher | 7447407 |
Sodium chloride |
EMD Chemicals | 7647145 |
Magnesium chloride |
Fisher |
7791186 |
Calcium chloride |
Fisher |
10035048 |
Sodium bicarbonate |
EMD Chemicals |
144558 |
Sodium phosphate,Dibasic |
EMD Chemicals |
7558794 |
D-glucose |
Fisher |
50997 |
Ascorbic acid |
Fisher |
50817 |
Sucrose |
Fisher |
57501 |
|
|
|
Materials |
Vendor |
Catalogue number |
Carbon fiber |
Goodfellow Oakdale, PA | |
Glass capillary |
A-M Systems Carlsborg WA. | 602000 |
Silver wire |
A-M Systems Carlsborg WA. | 787000 |
Tungsten stimulating electrode |
Plastics One, Roanoke, VA | |
Platinum wire |
||
Lead wire |
Squires Electronics, Cornelius, OR | |
Loctite 404 instant adhesive |
Hankal Corp. Rocky Hill CT. |
|
Razor blade |
World precision Instruments Inc. FL. | |
BD Spinal needle |
BD Medical systems, Franlin Lake, NJ |
REF 405234 |
Surgical Blade |
Feather Safety razor Co. LTD. Japan | |
|
||
Software |
Vendor |
Catalogue number |
TH software |
ESA Inc.,Chelmsford, MA | |
Instrument |
Vendor |
Catalogue number |
Submersion recording chamber |
Custom Scientific, Denver, CO | |
Neorolog stimulus isolator |
Digitmeter, Hertfordshire, England | |
Automatic temperature controller |
Warner Instrument Corporation | |
Microscope (SZX7) |
Olympus | |
Microscope |
Fisher | |
Vibratome 3000 sectioning system |
St. Louis , MO. | |
Perfusion pump |
Watson Marlow Limited, Falmouth Cornwall – England | H110708 |
Micropipette puller |
Narishige, Tokyo, Japan | |
ChemClamp potentiostat |
Dagan Corporations, Minneapolis, MN. |
References
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