高速スキャンサイクリックボルタンメトリーによる線条体の脳スライスにおけるシナプス前ドーパミンのダイナミクス
Summary
線条体の脳切片に電気的に誘発シナプス前ドーパミンのダイナミクスを測定するための高速スキャンサイクリックボルタンメトリーを使用する。
Abstract
大規模な調査が原因乱用薬物（例えば、コカインとアンフェタミン）、精神疾患で、それが果たす役割（例えば、統合失調症や注意欠陥多動性障害）、及び変性への関与の作用機序でその重要性神経伝達物質のドーパミンに焦点を当てているパーキンソン病やハンチントン病などの疾患。正常な生理的条件下では、ドーパミンは、運動活性、認知、学習、感情的な影響、および神経内分泌ホルモンの分泌を調節することが知られている。ドーパミンニューロンの最大密度の一つは、側坐核と尾状核 – 被殻と呼ばれる2つの別個の神経解剖学の領域に分けることができる線条体、中にです。目的は、マウスの線条体の中でスライス高速スキャンサイクリックボルタンメトリー（FSCV）の一般的なプロトコルを説明することです。 FSCVはdでリアルタイムにドーパミンの放出と取り込みを測定する機会を提供し、明確に定義された電気化学的手法です。iscreteの脳領域。炭素繊維の微小電極（〜7μmの径）ドーパミン酸化を検出するためにFSCVで使用されています。ドーパミンを検出するためにFSCVを使用しての分析の利点は 、in vivoマイクロダイアリシスのために補完的な情報を提供し、100ミリ秒未満の10ミクロンの空間分解能のその拡張された時間分解能である。
Protocol
Discussion
ここで紹介するプロトコルはFSCV実験用マウスの冠状脳スライスを準備し、使用する方法を示します。 11 –このメソッドはドーパミンダイナミクスを取得し、測定に固有のものですが、次のような他の神経伝達物質はアデノシン、過酸化水素、ノルエピネフリン、セロトニンはFSCV 3,8とin vivoまたは in vitro でモニターされている。 FSCVは、作用電極3,11に適用…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
（; AA – 016967とAA016967 – 01S1、NIAAA TAM）アルコール乱用やアルコール依存症の国立研究所から提供された資金は、ウェイン州立大学は、資金を起動し、ウェイン州立大学研究助成プログラム。内容はもっぱら著者の責任であるとNIAAAや国立衛生研究所の公式見解を表すものではありません。
Materials
| Name | Company | CAS number |
Reagent |
||
Potassium Chloride |
Fisher | 7447407 |
Sodium chloride |
EMD Chemicals | 7647145 |
Magnesium chloride |
Fisher |
7791186 |
Calcium chloride |
Fisher |
10035048 |
Sodium bicarbonate |
EMD Chemicals |
144558 |
Sodium phosphate,Dibasic |
EMD Chemicals |
7558794 |
D-glucose |
Fisher |
50997 |
Ascorbic acid |
Fisher |
50817 |
Sucrose |
Fisher |
57501 |
|
|
|
Materials |
Vendor |
Catalogue number |
Carbon fiber |
Goodfellow Oakdale, PA | |
Glass capillary |
A-M Systems Carlsborg WA. | 602000 |
Silver wire |
A-M Systems Carlsborg WA. | 787000 |
Tungsten stimulating electrode |
Plastics One, Roanoke, VA | |
Platinum wire |
||
Lead wire |
Squires Electronics, Cornelius, OR | |
Loctite 404 instant adhesive |
Hankal Corp. Rocky Hill CT. |
|
Razor blade |
World precision Instruments Inc. FL. | |
BD Spinal needle |
BD Medical systems, Franlin Lake, NJ |
REF 405234 |
Surgical Blade |
Feather Safety razor Co. LTD. Japan | |
|
||
Software |
Vendor |
Catalogue number |
TH software |
ESA Inc.,Chelmsford, MA | |
Instrument |
Vendor |
Catalogue number |
Submersion recording chamber |
Custom Scientific, Denver, CO | |
Neorolog stimulus isolator |
Digitmeter, Hertfordshire, England | |
Automatic temperature controller |
Warner Instrument Corporation | |
Microscope (SZX7) |
Olympus | |
Microscope |
Fisher | |
Vibratome 3000 sectioning system |
St. Louis , MO. | |
Perfusion pump |
Watson Marlow Limited, Falmouth Cornwall – England | H110708 |
Micropipette puller |
Narishige, Tokyo, Japan | |
ChemClamp potentiostat |
Dagan Corporations, Minneapolis, MN. |
References
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